Efeitos da dieta hiperlipídica e da suplementação com ácido palmitoleico (ômega-7) sobre o perfil inflamatório da fração celular do estroma vascular extraído do tecido adiposo de camundongos

Abdala, Fernanda Miranda [UNIFESP]

Efeitos da dieta hiperlipídica e da suplementação com ácido palmitoleico (ômega-7) sobre o perfil inflamatório da fração celular do estroma vascular extraído do tecido adiposo de camundongos

dc.contributor.advisor	Vale, Maria Isabel Cardoso Alonso [UNIFESP]
dc.contributor.advisorLattes	http://lattes.cnpq.br/4266175652800598	pt_BR
dc.contributor.author	Abdala, Fernanda Miranda [UNIFESP]
dc.contributor.authorLattes	http://lattes.cnpq.br/8470551582782934	pt_BR
dc.coverage.spatial	Diadema	pt_BR
dc.date.accessioned	2021-08-12T17:02:15Z
dc.date.available	2021-08-12T17:02:15Z
dc.date.issued	2021-08-05
dc.description.abstract	Complications related to obesity are directly related to the expansion of white adipose tissue (WAT) mass and evidence the influence of this tissue on energy balance and on the genesis of metabolic and inflammatory changes. There is an important distinction between a healthy expansion and a pathological expansion of WAT, consisting the last, in a fast growth of fat mass through the hypertrophy of pre-existing fat cells, with a higher degree of infiltration of activated macrophages (M1). WAT macrophages differ in M1 or M2 phenotypes, depending on the stimulus of the microenvironment. The macrophages of M1 phenotype are recognized by proinflammatory while macrophages of M2 phenotype are recognized by the anti-inflammatory action. We have investigated the role of fatty acids (FA) as bioactive substance in WAT. The palmitoleic acid is an FA of 16 carbon, monounsaturated in carbon omega 7 (C16: ln7). It was described that this FA improves the insulin sensibility in muscle, decrease the hepatic steatosis and reduces inflammatory parameters in macrophages. In the present study, we investigated the effect of palmitoleic acid on inflammatory profile of the vascular stromal (VS) cell fraction removed from epididymal WAT of mice induced to obesity induced by high fat diet (HFD). For this purpose, 8-week-old male C57Bl/6j mice were induced to obesity by a HFD (59% fat) for 8 weeks. From the 5th week of experimental protocol, half of the animals in the HFD group received palmitoleic acid (300 mg/kg BW daily by gavage) for 4 weeks. The body mass gain, food intake and adiposity were measured. The epididymal WAT was re-moved and weighted, and the cells digested by collagenase. VS cells containing macrophages and adipose tissue derived stem cells (ADSC) were separated from adipocytes by centrifugation. The gene expression profile of the inflammatory cy-tokines present in the VS cell fraction of the animals WAT was evaluated by analysis of gene expression coding IL-6, TNF-a, IRF-5, CXCL-9, CXCL-10 and NOS2 (M1 phenotype polarization characteristics), IL-4, IL-10, IL-13, IRF-4, TGF-ß and ARG-1 (M2 phenotype polarization characteristics) by real time RT-PCR (qRT-PCR). We ob-served that the treatment with C16:1n7 was able to partially prevent the animals' body mass and adipocyte hypertrophy triggered by HFD. Additionally, it reversed the increased expression of genes encoding pro-inflammatory cytokines IL-6, TNF-a, IRF-5 and CXCL-10 by the cellular fraction of the EV. In summary, our results sug-gest that palmitoleic acid exerts an anti-obesogenic effect, attenuating the complications of HFD-induced obesity.	pt_BR
dc.description.abstract	Complicações relativas à obesidade tem relação direta com a expansão da massa do tecido adiposo branco (TAB) e evidenciam a influência deste tecido no balanço energético e na gênese de alterações metabólicas e inflamatórias. Ha´ uma importante distinção entre uma expansão saudável e uma expansão patológica do TAB, sendo que a expansão patológica do TAB consiste no rápido crescimento da massa de gordura por meio da hipertrofia de ce´lulas de gordura existentes, com um alto grau de infiltrac¸a~o de macro´fagos ativados (M1). Macrófagos do TAB se diferenciam em fenótipos M1 ou M2, dependendo do estímulo do microambiente. Os macrófagos de fenótipo M1 são reconhecidos como pró-inflamatórios enquanto os macrófagos de fenótipo M2 são reconhecidos pela ação anti-inflamatória. Nosso laboratório tem investigado o papel de ácidos graxos (AGs) como substância bioativa no TAB. O ácido palmitoleico é um AG de 16 carbonos, monoinsaturado no carbono ômega-7 (C16:1n7). Foi descrito que este AG melhora a sensibilidade à insulina no músculo, diminui a esteatose hepática e exerce efeitos na redução de parâmetros inflamatórios em macrófagos. No presente estudo, investigamos a ação do ácido palmitoleico em camundongos obesos induzidos por dieta hiperlipídica (DHL) sobre o perfil inflamatório da fração celular do estroma vascular (EV) do TAB epididimal. Para tanto, utilizamos camundongos C57Bl/6j machos de 8 semanas induzidos à obesidade através da ingestão (durante 8 semanas) de uma DHL (59% de lipídeos). A partir da 5ª semana de protocolo experimental, metade dos animais do grupo que recebeu DHL receberam suplementação com o ácido palmitoleico (300 mg/kg p.c., por gavagem diária), por 4 semanas. Analisamos a massa corpórea, a ingestão alimentar e a adiposidade. O TAB epididimal foi retirado, pesado e as células digeridas com colagenase. Células do EV, incluindo pré-adipócitos, macrófagos e células multipotentes derivadas do TAB (CMDAs), foram separadas dos adipócitos por centrifugação. O perfil de expressão gênica das citocinas inflamatórias presentes na fração EV do TAB dos animais foi avaliado mediante análise da expressão de genes que codificam IL-6, TNF-a, IRF-5, CXCL-9, CXCL-10 e NOS2 (características da polarização para macrófagos M1), IL-4, IL-10, IL-13, TGF-ß, ARG-1 e IRF-4 (características da polarização para macrófagos M2) por RT-PCR em tempo real (qRT-PCR). Observamos que o tratamento com C16:1n7 foi capaz de prevenir parcialmente a massa corporal dos animais e a hipertrofia dos adipócitos desencadeada pela DHL. Adicionalmente, reverteu o aumento de expressão de genes que codificam citocinas pró-inflamatórias IL-6, TNF-a, IRF-5 e CXCL-10 pela fração celular do EV. Em suma, nossos dados sugerem que o ácido palmitoleico exerce um efeito anti-obesogênico, atenuando as complicações da obesidade induzida pela DHL.	pt_BR
dc.format.extent	52 f.	pt_BR
dc.identifier.uri	https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/61491
dc.language	por	pt_BR
dc.publisher	Universidade Federal de São Paulo	pt_BR
dc.rights	info:eu-repo/semantics/restrictedAccess	pt_BR
dc.subject	Obesidade	pt_BR
dc.subject	Inflamação	pt_BR
dc.subject	Adipócitos	pt_BR
dc.subject	Macrófagos M1	pt_BR
dc.subject	Citocinas	pt_BR
dc.title	Efeitos da dieta hiperlipídica e da suplementação com ácido palmitoleico (ômega-7) sobre o perfil inflamatório da fração celular do estroma vascular extraído do tecido adiposo de camundongos	pt_BR
dc.title.alternative	Effects of high-fat diet and supplementation with palmitoleic acid (omega-7) on the inflammatory profile of vascular stromal cell fraction extracted from adipose tissue of mice	pt_BR
dc.type	info:eu-repo/semantics/bachelorThesis	pt_BR
dcterms.subject	Obesity	en
dcterms.subject	Inflammation	en
dcterms.subject	Adipocytes	en
dcterms.subject	M1 macrophages	en
dcterms.subject	Cytokines	en
unifesp.campus	Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas (ICAQF)	pt_BR
unifesp.graduacao	Farmácia	pt_BR