Estudos das variações intraespecíficas/interpopulacionais e avaliação da atividade anti-leishmania dos óleos voláteis das folhas de Guarea macrophylla Vahl. ssp. tuberculata Vellozo (Meliaaceae)
Data
2015-04-29
Autores
Oliveira, Emerson Alves de 
Orientadores
Lago, João Henrique Ghilardi
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
The present work studies the chemical composition of intraspecific and interpopulational variations of the volatile oils contained on G. macrophylla leaves. For the accomplishment of such study were collected five samples of two different specimens located on the cities of São Paulo (I) and Cubatão (II) every three months along the term of one year. Thru CG, CG/EM analysis and calculation of Kovats indices were identified 57 compounds. Besides that, it was noticed a phytogeografical variation, being that the oil collected from (I) showed larger qualitative diversity (57 compounds) in relation to oil collected from (II) (32 compounds). Nonetheless, a chemical similarity was noticed since the sesquiterpenes were majority in both oils 73.27±0.64% to 85.87±0.76% and 68.24±1.72% to 80.78±1.76%, for I and II respectively. Three meteorological variables were monitored during the study, median maximum temperature, median minimum temperature and total precipitation indices. From the meteorological variables analysis and compilation it was possible to identify a different climatic profile for both cities, which according to literature and our field observations may have influenced the oils variations in gain and compounds, being that the gain might have influenced directly by the total precipitation. The raw volatile oils in the five samples collected also underwent anti-Leishmania trials using promastigotes and amastigotes from L. (L.) amazonensis. The anti-promastigote evaluation the volatile oils showed CE50 results varying from 11.8±5.2 to 17.2±5.1 and 12.0±1.2 to 20.5 ±2.7 µg/mL for subjects I and II respectively, indicating a strong anti-promastigote action. In the anti-amastigote evaluation the volatile oils from subject I shows significant dose dependent anti-amastigote action. Nonetheless, the dose dependent anti-amastigote action was not observed on subject II. The results of the anti-amastigote activity observed on subject I are coincidently inverse to the seasonal bicyclogermacrene variation percentage presented by the same subject, which suggests possible direct action of this compound in the infection indexes. The volatile oils also underwent trials for cytotoxicity (macrophage J774) and IS calculation, for cytotoxicity the CC50 varied from 65.6±6.1 to ?100 and 17.7±4.6 to 32.3±2.8 µg/mL for subjects I and II respectively. The verified index selectivity were 4.8 to ?5.8 and 1.2 to 2.7 for subjects I and II respectively. Due to the pharmacological potential observed in this study, the G. macrophylla?s volatile oil may be considered as a potential source for future studies in search of a prototype, thus enabling the development of antiparasitic pharmacos and phytotherapies.
No presente trabalho foi realizado o estudo da composição química e das variações intraespecíficas e interpopulacionais dos óleos voláteis das folhas G. macrophylla. Para tanto foram realizadas cinco coletas trimestrais ao longo de um ano em dois espécimes distintos, localizados nas cidades de São Paulo (I) e Cubatão (II). Tal estudo possibilitou através de análises por CG, CG/EM e cálculo do índice de Kovats a identificação de 57 compostos. Além disso, uma variação fitogeográfica foi observada, sendo que o óleo proveniente de (I) mostrou maior diversidade qualitativa (57 compostos) em relação ao óleo (II) (32 compostos). No entanto, foi observada uma similaridade química, visto que em ambos os óleos os sesquiterpenos foram majoritários 73,27±0,64% a 85,87±0,76% e 68,24±1,72% a 80,78±1,76% respectivamente para os indivíduos I e II. Cada região teve três variáveis meteorológicas monitoradas durante o período de estudo, sendo a temperatura máxima média, temperatura mínima média e o índice de precipitação total. A partir da compilação e análise das variáveis meteorológicas foi possível verificar um perfil climático diferente para as duas cidades, o que de acordo com a literatura e com nossas observações de campo, pode ter influenciado a variação do rendimento dos óleos e a composição química, uma vez que o rendimento dos óleos parece ter sofrido influência da precipitação total. Os óleos voláteis oriundos das cinco coletas dos dois indivíduos também foram submetidos a ensaios anti-Leishmania, utilizando-se promastigotas e amastigotas de L. (L.) amazonensis. Na avaliação anti-promastigotas os óleos voláteis apresentaram resultados de CE50 variando de 11,8±5,2 a 17,2±5,1 e 12,0±1,2 a 20,5±2,7 µg/mL para os indivíduos I e II respectivamente, indicando forte ação anti-promastigotas. Na avaliação anti-amastigotas os óleos voláteis do indivíduo I apresentaram significativa ação anti-amastigota dose dependente, porém a mesma ação anti-amastigota não foi observada no indivíduo II. O resultados da atividade anti-amastigota percebida no indivíduo I coincide de maneira inversa, com a variação sazonal da porcentagem de biciclogermacreno neste indivíduo, sugerindo assim, uma possível ação direta deste composto nos índices de infecção. Os óleos voláteis também foram submetidos a ensaios de citotoxicidade (macrófagos J774) e cálculo do IS, para a citotoxicidade o CC50 variou de 65,6±6,1 a ?100 e 17,7±4,6 a 32,3±2,8 µg/mL para os indivíduos I e II respectivamente. Os índices de seletividade verificados foram de 4,8 a ?5,8 e 1,2 a 2,7 para os indivíduos I e II respectivamente. Diante do potencial farmacológico observado neste estudo, o óleo volátil de G. macrophylla pode ser considerado como uma fonte potencial para futuros estudos, visando a obtenção de um protótipo para o desenvolvimento de fármacos ou fitoterápicos antiparasitários.
No presente trabalho foi realizado o estudo da composição química e das variações intraespecíficas e interpopulacionais dos óleos voláteis das folhas G. macrophylla. Para tanto foram realizadas cinco coletas trimestrais ao longo de um ano em dois espécimes distintos, localizados nas cidades de São Paulo (I) e Cubatão (II). Tal estudo possibilitou através de análises por CG, CG/EM e cálculo do índice de Kovats a identificação de 57 compostos. Além disso, uma variação fitogeográfica foi observada, sendo que o óleo proveniente de (I) mostrou maior diversidade qualitativa (57 compostos) em relação ao óleo (II) (32 compostos). No entanto, foi observada uma similaridade química, visto que em ambos os óleos os sesquiterpenos foram majoritários 73,27±0,64% a 85,87±0,76% e 68,24±1,72% a 80,78±1,76% respectivamente para os indivíduos I e II. Cada região teve três variáveis meteorológicas monitoradas durante o período de estudo, sendo a temperatura máxima média, temperatura mínima média e o índice de precipitação total. A partir da compilação e análise das variáveis meteorológicas foi possível verificar um perfil climático diferente para as duas cidades, o que de acordo com a literatura e com nossas observações de campo, pode ter influenciado a variação do rendimento dos óleos e a composição química, uma vez que o rendimento dos óleos parece ter sofrido influência da precipitação total. Os óleos voláteis oriundos das cinco coletas dos dois indivíduos também foram submetidos a ensaios anti-Leishmania, utilizando-se promastigotas e amastigotas de L. (L.) amazonensis. Na avaliação anti-promastigotas os óleos voláteis apresentaram resultados de CE50 variando de 11,8±5,2 a 17,2±5,1 e 12,0±1,2 a 20,5±2,7 µg/mL para os indivíduos I e II respectivamente, indicando forte ação anti-promastigotas. Na avaliação anti-amastigotas os óleos voláteis do indivíduo I apresentaram significativa ação anti-amastigota dose dependente, porém a mesma ação anti-amastigota não foi observada no indivíduo II. O resultados da atividade anti-amastigota percebida no indivíduo I coincide de maneira inversa, com a variação sazonal da porcentagem de biciclogermacreno neste indivíduo, sugerindo assim, uma possível ação direta deste composto nos índices de infecção. Os óleos voláteis também foram submetidos a ensaios de citotoxicidade (macrófagos J774) e cálculo do IS, para a citotoxicidade o CC50 variou de 65,6±6,1 a ?100 e 17,7±4,6 a 32,3±2,8 µg/mL para os indivíduos I e II respectivamente. Os índices de seletividade verificados foram de 4,8 a ?5,8 e 1,2 a 2,7 para os indivíduos I e II respectivamente. Diante do potencial farmacológico observado neste estudo, o óleo volátil de G. macrophylla pode ser considerado como uma fonte potencial para futuros estudos, visando a obtenção de um protótipo para o desenvolvimento de fármacos ou fitoterápicos antiparasitários.
Descrição
Citação
OLIVEIRA, Emerson Alves de. Estudos das variações intraespecíficas/interpopulacionais e avaliação da atividade anti-leishmania dos óleos voláteis das folhas de Guarea macrophylla vahl. ssp. tuberculata Vellozo (Meliaaceae). 2015. 148 f. Dissertação (Mestrado) - Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Diadema, 2015.