Caracterizacao da enzima mevalonato quinase
Data
2012
Autores
Ferreira, Eden Ramalho 
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
Mevalonato quinase (MVK) e uma enzima essencial na via do mevalonato. Essa via e responsavel pela biossintese de isoprenoides convertendo mevalonato em esterois como colesterol em humanos e ergosterol em tripanosomatideos. MVK e conservada desde bacterias ate mamiferos e localiza-se nos glicossomos de tripanosomatideos. Ferramentas de bioInformática demonstraram que T. cruzi tem duas isoformas de MVK (TcMVK1 e TcMVK2). TcMVK1 tem um peptideo sinal bem definido localizado na porcao N-terminal, sugerindo a secrecao da proteina. Para avaliar o papel da secrecao de TcMVK na interacao com a celula hospedeira, foi produzida TcMVK recombinante (rTcMVK) assim como anticorpos -TcMVK. A forma secretada de TcMVK liga-se de maneira dose dependente a celulas HeLa, modula positivamente a internalizacao de amastigotas extracelulares de T. cruzi (EAs) mas inibe a invasao por tripomastigotas metaciclicos (MTs). TcMVK foi encontrada no sobrenadante de MTs e EAs por tecnica de western blotting pelo uso do anticorpo -TcMVK. Imagens de imunofluorescencia de MTs, adquiridas por microscopia confocal, mostraram a colocalizacao parcial de TcMVK e BiP, uma proteina constitutiva de reticulo endoplasmatico. Experimentos de sinalizacao de celulas HeLa mostraram que rTcMVK induziu a fosforilacao de componentes da via MAPK e de proteinas relacionadas com mudancas no citoesqueleto de actina. Os resultados sugerem entao TcMVK como uma proteina moonlighting, visto o seu comportamento atipico. Enzimas ou proteinas moonlighting sao proteinas que podem realizar mais de uma funcao, sendo a segunda bastante diferente da funcao original. Muitas enzimas moonlighting sao classicamente envolvidas em vias metabolicas como a via glicolitica. Adicionalmente ao seu papel tipico na biossintese de isoprenoides nos glicossomos, TcMVK e secretada e pode modular a sinalizacao celular requerida para a invasao de T. cruzi. Essa seria uma caracteristica unica para uma enzima de T. cruzi
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2012. 87 p.