Caracterizacao da enzima mevalonato quinase

Caracterizacao da enzima mevalonato quinase

Alternative title Characterization of the mevalonate kinase enzyme: a bifunctional protein in Trypanosoma cruzi
Author Ferreira, Eden Ramalho Autor UNIFESP Google Scholar
Abstract Mevalonato quinase (MVK) e uma enzima essencial na via do mevalonato. Essa via e responsavel pela biossintese de isoprenoides convertendo mevalonato em esterois como colesterol em humanos e ergosterol em tripanosomatideos. MVK e conservada desde bacterias ate mamiferos e localiza-se nos glicossomos de tripanosomatideos. Ferramentas de bioInformática demonstraram que T. cruzi tem duas isoformas de MVK (TcMVK1 e TcMVK2). TcMVK1 tem um peptideo sinal bem definido localizado na porcao N-terminal, sugerindo a secrecao da proteina. Para avaliar o papel da secrecao de TcMVK na interacao com a celula hospedeira, foi produzida TcMVK recombinante (rTcMVK) assim como anticorpos -TcMVK. A forma secretada de TcMVK liga-se de maneira dose dependente a celulas HeLa, modula positivamente a internalizacao de amastigotas extracelulares de T. cruzi (EAs) mas inibe a invasao por tripomastigotas metaciclicos (MTs). TcMVK foi encontrada no sobrenadante de MTs e EAs por tecnica de western blotting pelo uso do anticorpo -TcMVK. Imagens de imunofluorescencia de MTs, adquiridas por microscopia confocal, mostraram a colocalizacao parcial de TcMVK e BiP, uma proteina constitutiva de reticulo endoplasmatico. Experimentos de sinalizacao de celulas HeLa mostraram que rTcMVK induziu a fosforilacao de componentes da via MAPK e de proteinas relacionadas com mudancas no citoesqueleto de actina. Os resultados sugerem entao TcMVK como uma proteina moonlighting, visto o seu comportamento atipico. Enzimas ou proteinas moonlighting sao proteinas que podem realizar mais de uma funcao, sendo a segunda bastante diferente da funcao original. Muitas enzimas moonlighting sao classicamente envolvidas em vias metabolicas como a via glicolitica. Adicionalmente ao seu papel tipico na biossintese de isoprenoides nos glicossomos, TcMVK e secretada e pode modular a sinalizacao celular requerida para a invasao de T. cruzi. Essa seria uma caracteristica unica para uma enzima de T. cruzi
Keywords Trypanosoma cruzi
Fosfotransferases (Aceptor do Grupo Álcool)
Proteínas
Language Portuguese
Date 2012
Published in São Paulo: [s.n.], 2012. 87 p.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 87 p.
Access rights Closed access
Type Thesis
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/22272

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