Estudo da biodegradação de hidrocarbonetos por bactérias provindas de mar profundo
Data
2017-08-10
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
Oil seeps are locations with gas and oil infiltration occurring above ground or offshore structures (deep sea). Offshore exploration of these environments has been limited, due to their in situ sampling and observation difficulties. The advent of submarines and remotely operated vehicles (ROVs), recently, allowed the investigation of biological communities related to different physiological processes in oil seeps. In this context, the present work had the privilege to obtain samples for this environment, from developed expeditions at the Atlantic ocean region, known as São Paulo Plateau. It was possible to have 162 isolates of bacteria, those were submitted to fast screenings to verify abilities to survive using hexadecane as sole carbon source. It was also possible to select strains able to produce metabolites with emulsifying activity under automotive motor oil. The hydrocarbon biodegradation ability was evaluated by chromatographic analysis (GC-MS). In this context, three (3) isolates (Csh 01, Csh 26 and Csh 28A) were selected, showing hydrocarbon biodegradation indexes above to 50 %. Phylogenetically, these bacteria were affiliated to the genus Bacillus sp., closely related to Bacillus cereus species. Two (2) isolates (Csh 31 and Csh 32B) were selected about their emulsifying abilities, above to 50 %. The isolated Csh31 was characterized as Klebsiella oxytoca, while Csh 32B was identified as Bacillus pumilus.
Oil seeps são locais com infiltração de gás e petróleo podendo ocorrer acima das estruturas terrestres ou offshore (mar profundo). Sua exploração em offshore tem sido limitada devido a dificuldades de amostragem e observação in situ. O advento dos submarinos e veículos operados remotamente (ROVs) recentemente permitiu a exploração destas regiões, permitindo a investigação de comunidades biológicas relacionadas a diferentes processos fisiológicos para a sua sobrevivência. Neste contexto, o presente trabalho teve o privilégio de obter amostras desse ambiente, resultado de expedições na região do Atlântico conhecida como Platô São Paulo, sendo possível o isolamento de 162 bactérias. Tais isolados foram submetidos a procedimentos envolvendo técnicas de triagem rápida para a verificação da habilidade de sobrevivência em condições de exposição ao hidrocarboneto n-hexadecano, como uma fonte única de carbono. Neste quesito, foi possível a seleção de 51 isolados bacterianos, os quais também foram avaliados quanto à produção de metabólitos com atividade emulsificante, quando utilizado óleo de motor automotivo como agente não polar. A atividade biodegradadora das 51 bactérias frente à hexadecano foi analisadas por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). Assim, três (3) isolados (Csh 01, Csh 26 e Csh 28A ) revelaram taxas de biodegradação do hidrocarboneto acima de 50 %, tendo sido os mesmos caracterizados como pertencentes ao gênero Bacillus sp., com maior proximidade filogenética à espécie Bacillus cereus. Dois isolados foram selecionados quanto a atividade emulsificante acima de 50% (Csh 31 e Csh 32B) . Tais isolados foram caracterizados como pertencentes aos gêneros Klebsiella oxytoca (Csh31) e Bacillus pumilus (Csh 32B).
Oil seeps são locais com infiltração de gás e petróleo podendo ocorrer acima das estruturas terrestres ou offshore (mar profundo). Sua exploração em offshore tem sido limitada devido a dificuldades de amostragem e observação in situ. O advento dos submarinos e veículos operados remotamente (ROVs) recentemente permitiu a exploração destas regiões, permitindo a investigação de comunidades biológicas relacionadas a diferentes processos fisiológicos para a sua sobrevivência. Neste contexto, o presente trabalho teve o privilégio de obter amostras desse ambiente, resultado de expedições na região do Atlântico conhecida como Platô São Paulo, sendo possível o isolamento de 162 bactérias. Tais isolados foram submetidos a procedimentos envolvendo técnicas de triagem rápida para a verificação da habilidade de sobrevivência em condições de exposição ao hidrocarboneto n-hexadecano, como uma fonte única de carbono. Neste quesito, foi possível a seleção de 51 isolados bacterianos, os quais também foram avaliados quanto à produção de metabólitos com atividade emulsificante, quando utilizado óleo de motor automotivo como agente não polar. A atividade biodegradadora das 51 bactérias frente à hexadecano foi analisadas por cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (CG-EM). Assim, três (3) isolados (Csh 01, Csh 26 e Csh 28A ) revelaram taxas de biodegradação do hidrocarboneto acima de 50 %, tendo sido os mesmos caracterizados como pertencentes ao gênero Bacillus sp., com maior proximidade filogenética à espécie Bacillus cereus. Dois isolados foram selecionados quanto a atividade emulsificante acima de 50% (Csh 31 e Csh 32B) . Tais isolados foram caracterizados como pertencentes aos gêneros Klebsiella oxytoca (Csh31) e Bacillus pumilus (Csh 32B).