Síntese química e oxidação das pontes de dissulfeto do inibidor de tripsina da família Squash SETI-IIa e alguns analógos
| dc.contributor.advisor | Greene, Lewis Joel [UNIFESP] | |
| dc.contributor.author | Faca, Vitor Marcel [UNIFESP] | |
| dc.date.accessioned | 2015-12-06T23:02:34Z | |
| dc.date.available | 2015-12-06T23:02:34Z | |
| dc.date.issued | 2002 | |
| dc.description.abstract | O inibidor de tripsina da familia squash SETI-Ila (Sechium edule trypsin inhibitor lia) um dos menores inibidores fortes descritos na literatura (Ki 10-9M). Ele contem 31 residuos aminoacidos por molecula dos quais 6 sao cisteinas. Sua sequencia de aminoacidos EDRKCPKILMRCKR SDCLKCTCQESGYCG, e forma uma compacta estrutura tridimensior mantida por 3 pontes dissulfeto. 0 inibidor foi extraido das sementes de chuchu (Sechium edul e purificado utilizando-se precipitacao corra acetona, cromatografia de gel-filtracao cromatografia de fase reversa por HPLC, servindo como material de referencia no presen estudo. 0 padrao das pontes dissulfeto do inibidor SETI-Ila foi determinado por digesf enzimatica com a enzima termolisina e caracterizacao dos fragmentos por analise c aminoacidos e sequenciamento por degradacao automatica de Edman. 0 padrao de pontE dissulfeto determinado foi Cys1-Cys4, Cys2-Cys5 e Cys3-Cys6, correspondente ao parir( relatado para outro inibidor da mesma familia (MCTI). 0 peptideo SETI-lia e dois analogo [desl-4]SETI-lia e [des1-4, P11, G20]SETI-Ila tambem foram obtidos por sintese automatica c peptideos utilizando-se a quimica Fmoc. 0 enovelamento e oxidacao das pontes dissulfeto f realizado com mistura de GSH e GSSG em solucao do peptideo diluida (<50pglmL) ou ei coluna de gel-filtracao, minimizando as interacoes intercadeia. Devido ao baixo rendimento dc peptideos sintetizados automaticamente, utilizou-se a cromatografia de afinidade por tripsir antes da etapa de fase reversa em HPLC para purificar-los. Tanto o peptideo sintetico SETI-IIa quanto os analogos [des1-4]SETI-lia e [des1-4, P11, G20]SETI-IIa apresentaram atividade inibitoria de tripsina apos oxidacao dos residuos de cisteinas. A sequencia [des1-4, P11 G20]SETI-IIa foi sintetizada para viabilizar a sintese por condensacao de fragmentos. 0 padrao das...(au) | pt |
| dc.description.source | BV UNIFESP: Teses e dissertações | |
| dc.format.extent | 159 p. | |
| dc.identifier.citation | São Paulo: [s.n.], 2002. 159 p. ilustab. | |
| dc.identifier.file | epm-018240.pdf | |
| dc.identifier.uri | http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/18271 | |
| dc.language.iso | por | |
| dc.publisher | Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP) | |
| dc.rights | Acesso restrito | |
| dc.subject | Inibidores da tripsina | pt |
| dc.subject | Biossíntese peptídica | pt |
| dc.subject | Dissulfetos | pt |
| dc.subject | Pontes | pt |
| dc.title | Síntese química e oxidação das pontes de dissulfeto do inibidor de tripsina da família Squash SETI-IIa e alguns analógos | pt |
| dc.title.alternative | Chemical synthesis and oxidation of disulfide bonds the squash trypsin inibitor SETI-IIa and analogs | en |
| dc.type | Tese de doutorado | |
| unifesp.campus | São Paulo, Escola Paulista de Medicina (EPM) | pt |
| unifesp.graduateProgram | Ciências Biológicas (Biologia Molecular) |