Analise da distribuicao dos filamentos intermediarios de citoqueratina e vimentina em celulas trofoblasticas gigantes de camundongos por imunofluorescencia e imunolocalizacao ultraestrutural
Data
2003
Autores
Tunes, Patricia Cristina Souza Magalhaes 
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
As celulas trofoblasticas gigantes de camundongos atingem seu tamanho maximo na fase mediana da prenhez, periodo em que realizam grande atividade de sintese e de fagocitose. Nesta fase, estas celulas, grandes e invasivas, exibem um citoesqueleto rico em filamentos intermediarios. Objetivo: Com o objetivo de correlacionar a presenca destes filamentos com a morfo-funcionalidade das celulas trofoblasticas, nos propusemos a analisar a distribuicao dos filamentos intermediarios de citoqueratina e vimentina em celulas trofoblasticas gigantes de camundongos, do 9° ao 11° dias da prenhez. Metodos: Os sitios de implantacao foram processados: a - para as reacoes de imunofluorescencia, segundo dois procedimentos, ou seja, previa fixacao do material em paraformaldeido 4 por cento e posterior criocongelacao ou criocongelacao do material e posterior fixacao dos criocortes em acetona; b - para a reacao de imunocitoquimica ultraestrutural, com fixacao do material em glutaraldeido 0,2 por cento e paraformaldeido 4 por cento e inclusao em resina LRWhite. Os anticorpos utilizados foram: anticorpo monoclonal de camundongo anticitoqueratina e anticorpo policlonal de cabra anti-vimentina e seus respectivos conjugados: IgG anti-camundongo conjugado com FITC e IgG anti-cabra conjugado com TRITC, ambos na presenca de um marcador nuclear, para as reacoes de imunofluorescencia. Para as reacoes de imunocitoquimica ultraestrutural, os conjugados foram: IgG anti-camundongo complexado a particulas de ouro de 15nm e IgG anti-cabra complexado a particulas de ouro de 5nm, respectivamente. Resultados: A maioria das celulas trofoblasticas apresentou co-expressao de citoqueratina e vimentina somente na periferia citoplasmatica e muitas apresentaram coexpressao por todo o citoplasma. Ultraestruturalmente, os filamentos de citoqueratina e vimentina foram observados, por todo o citoplasma, dispersos ou em feixes, espessos ou delgados; varios feixes de filamentos, constituidos unicamente por vimentina, foram observados proximos a estruturas citoplasmaticas e regioes circundando o nucleo. Conclusoes: Os filamentos de vimentina dispersos por todo o citoplasma das celulas trofoblasticas contribuem, assim como os de citoqueratina, para manter a forma e a estabilidade celular, mas principalmente, adicionam plasticidade ao citoesqueleto destas celulas em intenso crescimento. Alem disso, a presenca dos plasticos filamentos de vimentina tambem contribuem para ancorar o volumoso nucleo das celulas trofoblasticas e ainda, ancorar e transportar organelas e vacuolos fagociticos
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Citação
São Paulo: [s.n.], 2003. 109 p.