Proteômica Aplicada Ao Estudo Do Processamento N-Terminal Proteico No Secretoma De Células Tumorais

Abstract

Objective:To Identify Biological Markers Associated To Proteolytic Processes In Melanoma. To Perform Qualitative And Quantitative Analysis Of The Secretome Of Tumoral Cells And Patient Samples, As Well As To Identify The Main Post-Translational Modifications At The N-Terminus Of Secreted Protein, Correlating The Results With Proteolytic Processing Events In The Light Of Biological Pathways Related To Oncogenesis. Methods: We Performed A Proteomic Analysis Of Secreted Proteins From Four Human Cell Lines: (I) A Paired Set Of Fibroblasts - Hs 895. T, A Cell Line Obtained From A Lung Metastatic Site From A Patient Who Had With Melanoma And Hs 895. Sk, A Cell Line Of Skin Fibroblasts (Derived From The Same Patient); (Ii) Two Malignant Melanoma Lines - A375, A Malignant Melanoma Cell Of Primary Source Lineage, And Sh4, A Cell Line Derived From A Patient With Pleural Metastatic Melanoma. Terminal Amine Isotopic Labeling Of Substrates (Tails) Analysis Was Performed On Human Cell Lines (Hs 895 Sk, Hs 895 T, A375 And S

Objetivo: Identificar De Forma Sistêmica, Possíveis Marcadores Moleculares Associados A Processos Proteolíticos Em Melanoma. Analisar Qualitativamente E Quantitativamente O Secretoma De Células Tumorais De Melanoma E Amostras De Pacientes, Bem Como Identificar As Principais Modificações Pós-Traducionais Presentes No N-Terminal Das Proteínas Secretadas E Correlacionar Os Resultados Obtidos Com Posssíveis Processamentos Proteolíticos De Proteases Específicas E Associar Os Resultados Com Possíveis Vias Biológicas Envolvidas No Processo Tumorigênico. Métodos: Realizamos Uma Análise Proteômica Dos Secretomas Derivados De Quatro Linhagens Celulares Humanas: (I) Um Conjunto Pareado De Fibroblastos " Hs 895. T, Uma Linhagem Celular Obtida De Um Local Metastático Pulmonar De Um Paciente Com Melanoma E Hs 895. Sk, Uma Linhagem Celular De Fibroblastos Da Pele (Derivada Do Mesmo Paciente); (Ii) Duas Linhagens Malignas De Melanoma " A375, Uma Linhagem De Célula Maligna De Melanoma De Fonte Primária, E Sh4, Uma Linhagem Ce