Ação Do Inibidor De Tripsina Isolado De Sementes De Enterolobium Contortisiliquum Sobre A Linhagem De Células De Câncer De Mama Mda-Mb-231
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Data
2017-08-31
Autores
Lobo, Yara Aparecida [UNIFESP]
Orientadores
Oliva, Maria Luiza Vilela [UNIFESP]
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Breast cancer is the most frequent type among women and one of the leading causes of death in the world. MOA-MB-231 is a hormone-independent human breast cancer cells and has least favorable prognosis. In tumor progression, the activity of proteinases is involved in the cellular processes of proliferation, invasion and metastasis, so inhibitors of these enzymes have emerged as potential therapeutic targets. EcTI is a Kunitz-type serine proteinases inhibitor isolated from Enterolobium contortisiliquum seeds with effective antitumor action on several cell lines. The objective of this study was to evaluate the action of EcTI on the breast cancer MOA-MB-231 cellline. The EcTI was tested on cell viability, proliferation, adhesion, migration and invasion and the understanding of its effect investigated by the expression of integrins, cytokines and proteolytic enzymes, as well as cell signaling. The inhibitor blocked adhesion of these cells to collagen I (reduction - 30%) as well as migration (60%) and invasion (70%), inhibited the expression of a6 and [34 integrin subunits decreasing the phosphorylation of FAK and ERK and Akt, pathways related to cell proliferation, survival, adhesion, migration, and invasion. In addition, IL-6 and consequently, NFKB, overexpressed in cancer, IL-8 'cytokine, involved in survival and metastasis processes, and proliferation-related cytokine TGF-a, were decreased. Regarding to proteinase expression, the EcTI decreases the TPSA and MCP-1, which participate in the degradation of the ECM. Finally, the EcTI increased the content of heparan and chondroitin sulfate. Although the mechanism involved in this process has not yet been elucidated, the effect suggests that the increase of this proteoglycan may have amplified the adhesive process of MOA - MB - 231 cells, decreasinq the metastatic potential. In this way, EcTI is able to interfere in the complex triple negative cell signaling system, being an important instrument for understanding the structural requirements involved in establishing the aggressiveness of this type of tumor, indicating that this protein may contribute to the understanding of the tumor etiology.
O câncer de mama é o tipo mais frequente entre as mulheres e uma das principais causas de morte no mundo. A linhagem estabelecida MDA-MB-231 de câncer de mama é triplo negativa por não expressar receptores de estrogênio, progesterona e não amplificar o receptor do fator de crescimento epidérmico humano-2 (HER2) tendo um prognóstico menos favorável. Na proqressão tumoral, a atividade de proteinases em excesso está envolvida nos processos celulares de proliferação, invasão e metástase, logo proteinases e inibidores dessas enzimas têm surgido como potenciais alvos terapêuticos. O inibidor isolado de Enterolobium contortisi/iquum (EcTI) é um inibidor de serino proteinases tipo Kunitz com eficaz ação antitumoral sobre diversas linhagens celulares ..O objetivo desse estudo foi avaliar a ação de EcTI sobre a linhagem de câncer de mama MDA-MB-231. O EcTI foi testado sobre a viabilidade celular, proliferação, adesão, migração e invasão e o entendimento do seu efeito investigado pela expressão de integrinas, citocinas e enzimas proteollticas, bem como a sinalização celular. O EcTI afetou a viabilidade e a proliferação, mas não demonstrou efeito significativo sobre a morte celular. O inibidor bloqueou a adesão destas células ao colágeno I (redução - 30%), bem como a migração (60%) e a invasão (70%), inibiu a expressão das subunidades das integrinas a6 e [34 diminuindo a fosforilação de FAK e ERK e Akt , vias relacionadas com a proliferação , sobrevivência, adesão, migração e invasão celular. Ainda, diminuiu a IL-6 e consequentemente, o NFkB, superexpresso no câncer, a citocina IL-8, envolvida nos processos de sobrevivência e metástase e a TGF-a, citocina relacionada a proliferação. Com relação à expressão de proteinases, o EcTI diminui a expressão de TPSA e MCP-1, que participam na degradação da MEC. Finalmente, o EcTI aumentou o teor do heparam e condroitin sulfato celular. Embora o mecanismo envolvido nesse p;ocesso ainda não esteja elucidado, o efeito sugere que o aumento desses GAGS pode ter afetado o processo adesivo e a invasão celular. Desta forma, o EcTI é capaz de interferir no complexo sistema sinalizado r da célula de câncer triplo negativo, sendo instrumento importante para a compreensão dos requisitos estruturais envolvido no estabelecimento da agressividade desse tipo de tumor, indicando que essa proteína poderá vir a contribuir para o entendimento da etiologia do tumor.
O câncer de mama é o tipo mais frequente entre as mulheres e uma das principais causas de morte no mundo. A linhagem estabelecida MDA-MB-231 de câncer de mama é triplo negativa por não expressar receptores de estrogênio, progesterona e não amplificar o receptor do fator de crescimento epidérmico humano-2 (HER2) tendo um prognóstico menos favorável. Na proqressão tumoral, a atividade de proteinases em excesso está envolvida nos processos celulares de proliferação, invasão e metástase, logo proteinases e inibidores dessas enzimas têm surgido como potenciais alvos terapêuticos. O inibidor isolado de Enterolobium contortisi/iquum (EcTI) é um inibidor de serino proteinases tipo Kunitz com eficaz ação antitumoral sobre diversas linhagens celulares ..O objetivo desse estudo foi avaliar a ação de EcTI sobre a linhagem de câncer de mama MDA-MB-231. O EcTI foi testado sobre a viabilidade celular, proliferação, adesão, migração e invasão e o entendimento do seu efeito investigado pela expressão de integrinas, citocinas e enzimas proteollticas, bem como a sinalização celular. O EcTI afetou a viabilidade e a proliferação, mas não demonstrou efeito significativo sobre a morte celular. O inibidor bloqueou a adesão destas células ao colágeno I (redução - 30%), bem como a migração (60%) e a invasão (70%), inibiu a expressão das subunidades das integrinas a6 e [34 diminuindo a fosforilação de FAK e ERK e Akt , vias relacionadas com a proliferação , sobrevivência, adesão, migração e invasão celular. Ainda, diminuiu a IL-6 e consequentemente, o NFkB, superexpresso no câncer, a citocina IL-8, envolvida nos processos de sobrevivência e metástase e a TGF-a, citocina relacionada a proliferação. Com relação à expressão de proteinases, o EcTI diminui a expressão de TPSA e MCP-1, que participam na degradação da MEC. Finalmente, o EcTI aumentou o teor do heparam e condroitin sulfato celular. Embora o mecanismo envolvido nesse p;ocesso ainda não esteja elucidado, o efeito sugere que o aumento desses GAGS pode ter afetado o processo adesivo e a invasão celular. Desta forma, o EcTI é capaz de interferir no complexo sistema sinalizado r da célula de câncer triplo negativo, sendo instrumento importante para a compreensão dos requisitos estruturais envolvido no estabelecimento da agressividade desse tipo de tumor, indicando que essa proteína poderá vir a contribuir para o entendimento da etiologia do tumor.