Seqüenciamento de invasão pIS2 de Escherichia coli enteropatogênica típica (EPEC típica) O111:H-
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Data
2002
Autores
Bragato, Bianca [UNIFESP]
Orientadores
Scaletsky, Isabel Cristina Affonso [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
Escherichia coli enteropatogenica (EPEC) induz a formacao de uma lesao histopatologica denominada lesao attaching and effacing (A/E), mas nao produz as toxinas de Shiga (Stx 1 e 2). Embora EPEC seja considerada tradicionalmente um microorganismo nao invasor, varios pesquisadores tem demonstrado que essas bacterias sao capazes de invadir uma variedade de linhagens celulares, como tambem a presenca de bacterias no interior de enterocitos. Fletcher et al. (1992) relataram que um fragmento de 4,5 kb, denominado pLV527, subclonado de um plasmideo de uma amostra de EPEC tipica 0111:H-, e capaz de conferir a uma E. coli K12 o fenotipo de invasao. Em 1995, Scaletsky et al. demonstraram que um plasmidio de aproximadamente 6,6 kb, presente em uma amostra de EPEC tipica tambem do sorotipo 0111:H-, denominado pIS2, foi capaz de conferir a uma E. coli K12 (DK1) a capacidade de invadir celulas epiteliais. Com o objetivo de compararmos ambos determinantes de invasao, realizamos o sequenciamento do plasmideo pIS2, pois faltavam informacoes sobre a caracterizacao genetica do fragmento pLV527. Foram construidas tres genotecas do plasmideo pIS2 em vetor pUC18 que geraram 872 colonias, onde, todos os clones que continham insertos foram sequenciados por completo, utilizando os primers M13/pUC. Foram desenhados waiking primers a fim de sequenciar os espacos entre as sequencias obtidas e tambem fechar o gap entre as pontas do plasmideo...(au)
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2002. 79 p. tab.