Navegando por Palavras-chave "Fosfato"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Estratégias para o desenvolvimento de célula eletroquímica em papel visando à determinação de fosfato
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2021) Nascimento, Hadassa Vaz [UNIFESP]; Ferreira, Tiago Luiz [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo
    Phosphorus is a chemical element of fundamental importance for life on Earth, as it is part of the biological cycles of several living beings. The excess of phosphate compounds in aquatic environments caused by human actions, cause eutrophication of rivers and lakes. In this context, this work studied the electrochemical behavior of the phosphate using the cyclic voltammetry technique and used an electrochemical cell on paper to identify phosphate. The strategy employed used graphite mines to build the working electrode and the auxiliary electrode. For this, a study carried out from a selection of graphites showed that H graphite is the best option for a working electrode, because its balanced composition of carbon and clay allows the current peaks to be formed with an excellent definition and without adsorption of material. After modifying this electrode with a dispersion of Vulcan® XC 72, there was an increase in signal amplitude, which was lost after successive analysis tests with the same modifier layer. The reference electrode, also built in this work and used in conventional analyzes, made with calomel or silver, was removed from the system and the potential shifted to a more negative region as expected, but the voltammetric profile remained stable, despite the small loss in current amplitude, with tests with hexacyanoferrate (III). This loss of amplitude did not occur for phosphomolybdenum. For the development of the cell on paper, strategies based on the stamping process, construction with modeling of the wax, cutouts of sulfite paper and filter paper and the technique of printing with wax based on microfluidic devices on paper (µPADs) were tested, the last being the one that presented reliable results to make the paper electrochemical cell selective to the phosphate ion.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Investigação do papel do metabolismo do inositol e fosfato na manutenção da estabilidade genômica em Saccharomyces cerevisiae
    (Universidade Federal de São Paulo, 2023) Pires, Marina Rodrigues [UNIFESP]; Cussiol, José Renato Rosa [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4717700560534533; http://lattes.cnpq.br/5482411443059459
    A DDR (DDR, do inglês, DNA Damage Response) compreende um conjunto de processos biológicos complexos que tem como principal função manter a estabilidade genômica e proteger a célula de danos na molécula de DNA. Diferentes estudos apontam que, especificamente, o metabolismo do inositol e de fosfato inorgânico atuam durante a DDR. O metabolismo do inositol é responsável pela produção dos polifosfatos de inositol, moléculas que desempenham funções essenciais para a manutenção da viabilidade celular. Já o metabolismo de fosfato inorgânico é responsável por manter a homeostase celular, principalmente, em condições de baixos níveis nutricionais. As proteínas Opi1 e Pho81 (dois reguladores do metabolismo do inositol e fosfato, respectivamente) são extensivamente fosforiladas durante o dano genotóxico pelas quinases da DDR. Interessantemente, a perda de função de Opi1 leva a hipersensibilidade à genotoxinas. Além disso, foi anteriormente demonstrado que Pho81 acumula no núcleo durante o dano genotóxico. Esses achados sugerem que a função celular dessas proteínas é importante durante a DDR. Portanto, esse projeto teve como objetivo principal estudar a importância do metabolismo do inositol e do fosfato inorgânico para a estabilidade genômica de células eucarióticas utilizando a levedura Saccharomyces cerevisiae como organismo modelo. Para isso, através da técnica de clonagem e mutação sítio-dirigida, geramos clones nos quais os resíduos de serina e treonina, que são fosforilados pelas quinases da DDR, foram substituídos por resíduos de alanina, criando assim fosfomutantes. De posse dos fosfomutantes, monitoramos a capacidade de fosforilações mediadas pelas quinases da DDR de regular a via do inositol, pois verificamos que houve desregulação no metabolismo do inositol no contexto de estresse de replicação induzido pelo MMS. Além disso, caracterizamos o papel da proteína Pho81 durante o estresse genotóxico. Nossos resultados indicaram um aumento na ativação de Pho81 com consequente hiporregulação do metabolismo do fosfato durante o estresse genotóxico induzido pelo agente alquilante de DNA, o metanossulfonato de metila ou MMS. Por último, nossos resultados sugerem que a modulação do metabolismo do inositol pode não estar relacionada com a fosforilação direta das quinases da DDR.