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    A importância do efeito materno durante a ocupação de áreas com diferentes regimes térmicos em populações de lagartos Tropidurus imbituba
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-08-30) Andrade, Thayná Medeiros de [UNIFESP]; Carvalho, José Eduardo de [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/6738085765102617; http://lattes.cnpq.br/7967998228728927
    A temperatura é um fator preponderante para o desenvolvimento em espécies ovíparas de Squamata, que estão limitadas ao local de postura do ovo amniótico. Frente às variações térmicas ambientais, é de se esperar que indivíduos parentais possuam uma gama de mecanismos para garantir a eclosão e crescimento dos filhotes e, consequentemente, seu sucesso reprodutivo. Um desses mecanismos é o efeito materno, definido como a capacidade da fêmea de moldar o fenótipo da prole de acordo com as pistas que recebe do ambiente. O que determina as estratégias utilizadas e sua importância evolutiva ainda é pouco compreendido. Espera-se que o efeito materno seja favorecido em ambientes heterogêneos, onde as pistas maternas serão determinantes para sobrevivência da prole; enquanto em ambientes homogêneos, as condições de desenvolvimento da prole de diferentes fêmeas são similares e as características do filhote seriam determinadas principalmente pelo próprio genótipo. Lagartos tropiduríneos são um bom sistema de estudo para compreender melhor o papel do efeito materno na ocupação de novos ambientes, uma vez que ocupam ambientes que variam em sua complexidade térmica e estrutural. Nesse sentido, o presente trabalho teve por objetivo compreender de que forma populações de Tropidurus imbituba que ocupam ambientes heterogêneos, representados por áreas urbanas, e homogêneos, representados por áreas de restinga, se diferenciam nas estratégias maternas. A hipótese geral testada foi a de que haveria maior manipulação materna sobre a prole em áreas de maior heterogeneidade térmica. De forma específica, esperava-se que: 1) fêmeas de áreas urbanas investissem em ninhadas com maior número de ovos em comparação a fêmeas de restinga; 2) fêmeas grávidas de áreas urbanas apresentassem temperaturas preferenciais mais altas; 3) embriões provenientes de ambiente urbano apresentassem taxas de desenvolvimento mais aceleradas. Os resultados mostram que a ocupação de um ambiente heterogêneo não esteve associada a uma maior manipulação materna da prole. Em ambientes urbanos, fêmeas investiram em ovos maiores. Em ambientes de restinga, fêmeas grávidas apresentaram menores temperaturas preferenciais em relação a fêmeas não grávidas. Embriões provenientes de ambos os tipos de ambiente apresentaram as mesmas taxas de desenvolvimento. Investigar o sucesso da prole associado às características de cada ambiente pode ajudar a elucidar se essas diferentes estratégias são adaptativas.
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    Perfil redox sazonal e o papel do fluido folicular na maturação de oócitos bovinos submetidos ao choque térmico
    (Universidade Federal de São Paulo, 2017-09-27) Rodrigues, Thais Alves [UNIFESP]; Lopes, Fabiola Freitas de Paula [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Heat stress promotes changes in reproductive microenvironment, compromising the oocyte and embryos development. High temperature alters cells redox balance. However, it is not know how the temperature affects the oocyte microenvironment as wells as the role of follicular fluid (FF) in heat-shocked oocytes. The aim of the first experiment was to determine the effect of seasonal heat stress in the activity of antioxidant enzymes, lipid peroxidation and total protein in bovine FF. Glutathione peroxidase activity was reduced in FF collected in summer compared to winter. However, there was no effect on superoxide dismutase and lipid peroxidation. There was a tendency of total protein reduction in FF in summer. In the second series of experiments, the heat stress was applied in vitro (heat shock). The aim of those experiments was to determine the role of FF in cumulus cells (CCs) expansion, nuclear maturation, protein quinase activated by mitogens (MAPK) activity, oxygen reactive species (ROS) production and developmental competence of bovine oocytes subjected to heat shock during in vitro maturation (IVM). Cumulus-oocyte complexes (COCs) were collected from slaughterhouse ovaries and distributed to the treatments heat shock (41ºC for 14 h followed by 38.5°C for 8 h) or control (38.5ºC for 22 h) in the presence of 0, 10 or 15% FF. For CCs expansion evaluation, images before and after COCs IVM were acquired. The oocytes were stained with 5 μg/ml Hoechst 33342 to evaluate nuclear maturation. Heat shock reduced CCs expansion and nuclear maturation. However, supplementation of IVM medium with 10% FF reverted these deleterious effects. MAPK activity was determined by Western Blotting. There was no effect of heat shock or FF in oocyte MAPK activity. However, heat shock enhanced MAPK activity in CCs and 10% FF was capable of reverting this effect. Heat shock also reduced the number of cleaved oocytes and the percentage of blastocyst. However, addition of 10% FF reverted this effect. The third series of experiments determined the role of FF exosomes in CCs expansion and embryos development competence in oocytes subjected to heat shock during IVM. Exosomes were isolated by ultracentrifugation. Heat shock reduced the expansion of CCs, cleavage and blastocyst rates. However, supplementation with FF exosomes (16 x 109 particles/ml) reverted this effect. Heat shock did not affect gene expression in blastocysts. In addition, exosomes reduced expression of NANOG and enhanced the expression of SOX2, indicating that exosome supplementation accelerated the embryo development. Exosomes were uptaken by CCs and not by the oocyte, indicating that the thermoprotective effect of FF can be mediated by exosomes via CCs. In conclusion, the moderate increase in environmental temperature is capable of changing the antioxidant system in follicular fluid. In addition, exposure of oocytes to heat shock during IVM showed a negative impact in CCs expansion, nuclear maturation, MAPK activity and embryo development. However, both FF and exosomes were capable of reverting the heat stress deleterious effects.