Navegando por Palavras-chave "Condrócitos"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Desvendando a relação estrutura-função de condroitim sulfatos : estudo de efeitos anti-inflamatórios sobre condrócitos e macrófagos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-08-31) Cunha, Andre Luiz da [UNIFESP]; Michelacci, Yara Maria Correa da Silva [UNIFESP]; Aguiar, Jair Adriano Kopke de [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/5023687526571878; http://lattes.cnpq.br/3137165519167799; http://lattes.cnpq.br/5971806359279104; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)The aim of the present study was to investigate the activities of chondroitin sulfates (CS) with different structures on cultured chondrocytes and macrophages. CS were extracted and purified from bovine trachea (CSTB), porcine trachea (CSTS), chicken sternum (CSFr) and skate (CSRj) cartilage. The preparations were 90-98% pure, with ~1% proteins, nucleic acids and keratan sulfate contaminants. Structural analysis of these CS and of commercial C4S and C6S has shown that most of their disaccharides are monosulfated: C4S, CSTB, CSTS and CSFr are predominantly 4-sulfated (64-78%), while C6S is more 6-sulfated (71%) and CSRj is more heterogenous. All the CS showed minor ammounts of non-sulfated disaccharides (2-7%), and 2,6-disulfated disaccharides were detected in C6S (7%) and CSRj (14%). All CS were polydisperse, with modal molecular weights of 26-135 kDa. The different CS reduced the IL-1β-induced liberation of NO and PGE2 on both human and horse chondrocytes, and CSTB was the most effective. C4S, C6S, CSFr and CSRj reduced the LPS-induced TNF-α liberation, but not IL-6, on RAW 264.7 immortalized macrophage-like cell line. In contrast, on bone marrow derived macrophages (primary culture), C4S, C6S, CSTB and CSTS reduced the LPS-induced liberation of TNF-α, IL-6, IL-1β, and NO, indicating that the RAW response to CS was different from that of primary macrophages. All CS, except for commercial C4S, inhibited the translocation of NF-κB transcription factor to the nucleus of LPS-challenged bone marrow derived macrophages. In conclusion, our results have shown that CS with different structures had anti-inflammatory effects on macrophages, besides the already known effects on chondrocytes, suggesting that, in vivo, a synergic action of these molecules on different cell types help to achieve its desired therapeutic effects.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Estudo de moléculas derivadas da lagarta lonomia obliqua sobre o metabolismo oxidativo de condrócitos humanos(Universidade Federal de São Paulo, 2023-10-05) Toledo, Thais Mingatos de [UNIFESP]; Chudzinski Tavassi, Ana Marisa [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/6899353560628046; http://lattes.cnpq.br/6977104441277863Objetivos: Estudar a atividade do peptídeo D3, derivado de uma hemolina presente em veneno da lagarta Lonomia obliqua, no metabolismo oxidativo de condrócitos humanos, investigando seus possíveis alvos moleculares por meio de diferentes estratégias de proteômica de condrócito (NHAC-kN) sob estresse oxidativo. Métodos: Para análise proteômica de condrócitos e do secretoma foram feitos tratamentos temporais na presença e ausência do peróxido de hidrogênio e do peptídeo D3. Para identificação dos possíveis alvos do D3, utilizou-se a metodologia da quimioproteômica com marcação por tags isobáricas. Após tratamento, as proteínas extraídas foram reduzidas, alquiladas e digeridas overnight e os peptídeos tripsínicos coletados. Por fim, todas as amostras foram acidificadas, dessalinizadas e secas e ressuspendidas para análise LC-MS/MS em espectrômetro de massas Thermo Scientific Q Exactive Plus. Os dados obtidos foram analisados no software MaxQuant para identificação e quantificação de proteínas. Resultados do proteoma e do secretoma das células tiveram a significância estatística determinada pelo teste T-Student bicaudal utilizando o software Perseus, com False Discovery Rate obtidos por permutação. Resultados: A proteômica e a análise do secretoma identificaram que os principais processos modulados pelo peróxido de hidrogênio foram: resposta a proteínas não enoveladas, remodelagem da matriz extracelular e secreção. O tratamento das células estimuladas com o peróxido seguido do D3 apresentou uma melhora na manutenção da matriz extracelular saudável e indícios de menor atividade secretória relacionada à degeneração da matriz, além da diminuição do estresse do retículo endoplasmático e Golgi. A análise de quimioproteômica identificou 11 possíveis alvos, sendo que a paratimosina e a dissulfeto isomerase foram identificadas em todas as abordagens. Conclusões: Pode-se afirmar, com base nos dados analisados que o peptídeo D3 tem efeito positivo em condrócitos humanos estimulados com H2O2, favorecendo manutenção da resposta secretória, manutenção das proteínas da matriz e menor estresse oxidativo das organelas secretórias.
- ItemSomente MetadadadosEstudo ultra-estrutural da matriz extracelular dos grumos celulares formados na cultura de fibrocondrócitos de meniscos de joelhos de coelhos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2000) Araujo, Veronica Garcez de [UNIFESP]; Correa, Olga Maria de Toledo [UNIFESP]A articulacao sinovial do joelho possui dois meniscos, um medial e um lateral, inseridos entre o condilo femural e o plato tibial. Esse posicionamento anatomico dos meniscos permite que atuem na distribuicao do peso imposto ao joelho. Grandes alteracoes da funcao articular tem sido observadas durante as remocoes cirurgicas total ou parcial dos meniscos. Sabe-se, tambem, que o esforco fisico continuo e prolongado da articulacao do joelho promove um aumento da concentracao de colageno e proteoglicanos nos meniscos, deixando evidente que os fibrocondrocitos respondem a algumas modificacoes do meio ambiente. O estudo de cultura de celulas pode ser considerado como um recurso extremamente util na analise da matriz extracelular. Parametros morfologicos e bioquimicas mostram que condrocitos isolados da matriz e cultivados in vitro possuem mecanismos que lhes permitem manter as caracteristicas fenotipicas que possuem in vivo. Estudos recentes desenvolvidos em nosso laboratorio demonstraram a viabilidade do cultivo de fibrocondrocitos. O isolamento destas celulas a partir de fibrocartilagem mostrou-se de facil reproducao e adequado para o estudo da sintese de macromoleculas da matriz extracelular. A partir desses cultivos, foi possivel observar que as celulas na cultura primaria cresceram formando agregados celulares que lembram verdadeiros grumos de celulas. Tres estagios do desenvolvimento dos grumos foram estabelecidos: formacao que ocorreu entre os dias l e 3; crescimento, atingindo seu crescimento maximo no quinto dia de cultivo; e regressao, iniciando no oitavo dia de cultivo. As analises ultra-estruturais da matriz extracelular foram feitas nos grumos formados apos 3, 5 e 8 dias de cultivo. No estagio de formacao (terceiro dia), observamos fibrilas de colageno com estriacoes transversais de 67nm e feixes de microfilamentos sem ou preenchidos com pouca elastina amorfa. Estes feixes de microfilamentos foram morfologicamente similares as fibras oxitalanicas (sem elastina) e elauninicas (com pouca elastina), descritas na literatura. No quinto dia, foi possivel observar elementos fibrilares com periodicidade ao redor de 1OOnm e com morfologia semelhante ao do colageno tipo VI. No oitavo dia, as fibrilas de colageno estriado e fibras oxitalanicas nao foram mais observadas. Durante este mesmo periodo, ocorreu um aumento no colageno do tipo VI e nas fibras elasticas maduras. Os resultados da cultura primaria deixam claro que...(au)
- ItemSomente MetadadadosInfluência da displasia da tróclea femoral nos resultados clínico-funcionais do implante autólogo de condrócitos em lesoes condrais da articulação femoropatelar(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2020-07-01) Mestriner, Alexandre Barbieri [UNIFESP]; Faloppa, Flavio [UNIFESP]; Universidade Federal de São PauloBackground: Autologous chondrocyte implantation (ACI) is a viable treatment option for cartilage lesions in the patellofemoral joint (PFJ). However, the influence of trochlear dysplasia on ACI outcomes in the PFJ remains undetermined. Purpose: to evaluate the influence of trochlear dysplasia on clinical outcomes after ACI for the treatment of cartilage lesions in the PFJ with a minimum of 2 years follow-up. Methods: A retrospective review of 190 patients submitted to cartilage repair with ACI for focal cartilage defects in the PFJ by a single surgeon was performed. Patient factors, lesion morphology, and pre- and postoperative patient-reported outcomes measures (PROMs) including KOOS, Lysholm, Tegner and IKDC scores were collected. Two imaging analyzes, using knee radiography and MRI, were performed. The first analysis excluded patients with alteration in patellar height or TT-TG distance. Two independent observers determined the presence and grade of trochlear dysplasia in the second image analysis, based on Dejour and Lippacher classifications. Forty-six patients with a mean follow-up of 3.7 ± 1.9 years and mean age of 30.1 ± 8.8 were then stratified into two matched groups based on the presence or absence of trochlear dysplasia (23 vs. 23) and a comparison was established based on PROMs and failure rates. A secondary analysis excluded patients with low-grade dysplasia (Dejour type A) and established a comparison between nineteen patients with high-grade dysplasia (Dejour types B, C and D) and nineteen without trochlear dysplasia. XIX Results: Interobserver reliability (k) was 0.774 for the Dejour and 0.924 for the Lippacher classification (p < 0.001). There were no statistically significant differences in demographic characteristics between both groups (23 patients with trochlear dysplasia vs. 23 without dysplasia). PROMs at final follow-up did not differ between control and trochlear dysplasia group (p > 0.05). No difference was seen regarding failure rates between both groups (p > 0.999). Additionally, no differences in clinical outcomes were seen between patients with high-grade dysplasia (Dejour types B, C and D) and patients without dysplasia (p > 0.05). Conclusion: Trochlear dysplasia presence and severity did not influence ACI clinical outcomes in the PFJ at 3.7 years of follow-up. This study suggests that trochlear dysplasia should not be considered as a contra-indication to cartilage repair with ACI in the PFJ.
- ItemSomente MetadadadosMorte celular em condrocitos da cartilagem articular humana com osteoartrite(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2003) Reginato, Rejane Daniele [UNIFESP]