Navegando por Palavras-chave "Células-tronco mesenquimais"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Efeito de células tronco mesenquimais sobre a expressão de transportadores de água e eletrólitos no rim de ratos hipertensos com estenose da artéria renal(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-09-28) Varela, Vanessa Araujo [UNIFESP]; Boim, Mirian Aparecida [UNIFESP]; Sales, Elizabeth Barbosa de Oliveira [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/0926950405314891; http://lattes.cnpq.br/8916858915652849; http://lattes.cnpq.br/6007968298939387; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Estudos prévios mostraram que células tronco mesenquimais (CTM) melhoram a função renal e a hipertensão renovascular (HRV) induzida por clampeamento da artéria renal, modelo 2 Rins 1 Clipe (2R-1C), através de efeitos parácrinos, imunomodulatórios e angiogênicos com redução da fibrose do rim estenótico (RE) e do contralateral (RC). Animais com HRV apresentam poliúria cuja causa não é conhecida e a qual não foi corrigida pelo tratamento com CTM. No presente estudo, avaliamos a participação de transportadores de sódio e água na diurese e natriurese apresentada por animais 2R-1C e o efeito de CTM sobre a expressão desses transportadores. Ratos Wistar machos e adultos foram dispostos nos seguintes grupos: controle (CT), CT tratados com CTM (CT+CTM), hipertensos (2R-1C) e hipertensos tratados (2R-1C+CTM). As CTM foram obtidas da medula óssea de ratos Wistar e infundidas (2x105 células, iv), na 3ª e 5ª semanas após o clampeamento da artéria renal esquerda. Pressão arterial sistólica (PAS) foi monitorada semanalmente. Seis semanas após o clampeamento, urina de 24 horas, sangue e rins foram coletados para análises bioquímicas, moleculares e histológicas. Em outra série, animais de cada grupo foram utilizados para estimar o ritmo de filtração glomerular (RFG) e o fluxo sanguíneo renal (FSR) do RE e do RC. A expressão dos transportadores: trocador Na/H (NHE3), canal de sódio (ENaC), bomba Na/K/ATPase, cotransportador Na/K/2Cl e das aquaporinas 1 e 2 (AQP1 e AQP2) foi avaliada por RT-PCR em tempo real, western blot e imunohistoquímica. A poliúria dos animais hipertensos ocorreu às custas de aumento na diurese e na natriurese do RC uma vez que esses parâmetros foram reduzidos no RE. Não foram detectadas modificações significantes na expressão de nenhum dos transportadores de sódio tanto no RE quanto no RC, sugerindo que a natriurese apresentada pelo RC foi de origem pressórica. A expressão de AQP1 foi discretamente reduzida apenas na medula do RE, porém foi significantemente suprimida tanto no córtex como na medula do RC. A expressão de AQP2 não foi modificada. Esses resultados sugerem que a poliúria apresentada pelos animais hipertensos tem pelo menos duas origens, a natriurese pressórica e a redução na capacidade de reabsorção de água por redução da AQP1 no RC. O tratamento com CTM não induziu modificações significantes no perfil de expressão dos transportadores indicando que a capacidade do RC em excretar sódio e água foi mantida durante o tratamento. Em conclusão, o tratamento com CTM foi eficaz para minimizar a HRV, e contribuiu para preservar a capacidade do RC em excretar sódio e água.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Efeitos fotobiomoduladores do laser de baixa potência na diferenciação condrogênica de células-tronco mesenquimais da medula óssea em sistema de cultura celular em 3 dimensões (3D)(Universidade Federal de São Paulo, 2024-02-14) Silva, José Roberto Mateus da [UNIFESP]; Oliveira, Carlos Rocha; Guilherme; http://lattes.cnpq.br/8908484393766511; http://lattes.cnpq.br/5658850593519924Células-tronco mesenquimais (CTM), são células com grande potencial de diferenciação em outros tipos celulares especializados. Podem ser obtidas a partir da medula óssea, dos tecidos adiposo e sinovial. As CTM apresentam a característica de serem cultiváveis in vitro, representando promissora fonte de regeneração e reparo de diferentes tecidos. Estudos têm demonstrado que o uso de Laser de Baixa Potência ou Low Level Laser Therapy (LLLT) têm capacidade de interagir com matrizes biológicas, promovendo reações fotoquímicas nas moléculas intra ou extracelulares, alterando suas funções biológicas e gerando novas respostas celulares/teciduais. Neste trabalho foi avaliada a influência da LLLT (2J/cm2 e 4J/cm2) na expressão de genes como o SOX9, HMOX1, SIRT1 e Aggrecan em culturas de CTM de camundongos, em 3 dimensões (3D), submetidas ao estímulo de meio diferenciador de condrócitos. O protocolo de estabelecimento da cultura em 3D permitiu a formação dos esferoides e a viabilidade celular, verificada pelo teste de MTT, indicou ausência de efeitos citotóxicos nestes aglomerados celulares. Embora todos os genes avaliados tenham apresentado aumento na sua expressão, quando submetidos à irradiação com a LLLT e comparados com o grupo controle, os genes SOX9 e HMOX1 foram os que mais apresentaram variações em relação aos níveis de RNAm e expressão proteica. Por outro lado, os genes SIRT1 e Aggrecan foram fracamente expressos. A microscopia por imunofluorescência revelou a presença das proteínas na população celular condicionada com meio diferenciador de condrócitos e estimulada com LLLT. Os resultados obtidos com a LLT em culturas primárias em 3D, derivadas de CTM murina, durante a diferenciação condrogênica, não foram acompanhados de citotoxicidade, além disso, foram observadas modulações positivas nos níveis de RNAm dos genes SOX9, HMOX-1, AGGRECAN e SIRT-1 e aumento da expressão proteica destes genes, que estão envolvidos na condrogênese. Dessa forma, concluímos que os resultados alcançados são relevantes, tanto para a pesquisa básica, como para as pesquisas clínicas, uma vez que, a busca por novas terapias celulares usando diferenciação de CTM em tipos específicos de células, como os condrócitos, vem se mostrando eficazes e revelando um baixo custo, como no caso da LLLT.
- ItemAcesso aberto (Open Access)O papel das células-tronco mesenquimais em modelos experimentais de doença renal aguda e crônica(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009-05-27) Semedo, Patricia [UNIFESP]; Câmara, Niels Olsen Saraiva [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Desde a década de 70 até o presente momento, o conhecimento sobre células-tronco (CTs) vêm crescendo exponencialmente. Dentre as CTs, interesse crescimento se dá no campo das células-tronco adultas, com especial atenção para as CTs da medula óssea, as células-tronco mesenquimais (CTMs). Muito têm se descoberto sobre o potencial terapêutico das CTMs para diversas patologias, devido a seu grande potencial em reparar tecidos e diminuir a inflamação local. Na área da nefrologia, muitos avanços foram feitos em doenças renais agudas e crônicas, entretanto as taxas de morbi-mortalidade mantêm-se elevadas. Devido ao caráter devastador das doenças renais, estudar uma forma alternativa de tratá-la está na terapia por CTMs. Nesse estudo, buscamos compreender o papel das CTMs em modelos renais agudo e crônico. Para tanto, em um modelo agudo de lesão de isquemia e reperfusão, CTMs foram administradas após 6h de reperfusão e analisadas em 24h e 48h. Os níveis de creatinina e uréia séricos apresentaram-se bem menores em 24h e 48h após reperfusão nos animais tratados com CTMs. Histologicamente, esses dados refletem em menor NTA e maior regeneração. Sabendo do potencial imunomodulador das CTMs, analisamos o perfil de citocinas no tecido renal. Observamos uma diminuição de citocinas inflamatórias (Th1) e aumento de citocinas anti-inflamatórias (Th2). Uma vez que realizamos o modelo experimental em ratos Wistar fêmeas e injetamos CTMs de machos, procuramos a CTM no tecido renal por PCR através da expressão do gene SRY (sex determing region Y). Em 24h, não encontramos as CTMs no tecido renal. Sistemicamente, a administração de CTMs exógenas não altera o perfil de citocinas Th1, porém leva ao aumento de citocinas Th2. Como os resultados foram animadores no modelo agudo, partimos para analisar o papel das CTMs no modelo renal crônico de nefrectomia 5/6. Com um tratamento contínuo de CTMs (a cada 2 semanas), após 8 semanas, observamos melhora nos níveis de creatinina e uréia sérica, bem como diminuição nos níveis de proteinúria. Apesar de uma tendência a melhorar o clearance de inulina nos animais tratados com CTMs, não houve diferença estatística com o grupo não tratado. Ao analisar a fibrose característica do modelo de 5/6, observamos menores índices de áreas fibróticas e glomerulosclerose no tecido dos animais tratados com CTMs, bem como redução em diversas moléculas fibróticas tais como Vimentina, Colágeno 1, TGF -β, FSP-1, Smad 3, MCP-1 e razão TIMP-1/MMP9. Já nesse modelo, as CTMs encontravam-se no tecido renal, e podemos correlacionar sua presença com o aumento de moléculas anti-fibróticas, tais como HO-1 e HGF. Em relação as citocinas expressas no tecido renal, novamente observamos uma polarização para citocinas Th2, o que por sua vez pode levar a inibição do processo de transição epitélio-mesenquimal (TEM). Surpreendentemente, a administração de CTMs levou a uma menor expressão de diversas citocinas séricas. Nos dois modelos utilizados, percebemos que administração de CTMs leva a melhora funcional renal, sendo o provável mecanismo envolvido nessa melhora a imunomodulação decorrente do tratamento, tanto no tecido renal quanto sistêmica, além da secreção de outras moléculas tais como HO-1 e HGF que medeiam processos anti-fibróticos, remodelando o tecido renal.