Navegando por Palavras-chave "Células tronco mesenquimais"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Avaliação do transplante alogênico de células tronco mesenquimais isoladas de tecido adiposo em cães portadores de sequela neurológica causada pela cinomose(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-08-25) Barros, Michele Andrade de [UNIFESP]; Kerkis, Irina [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4302687618153569; http://lattes.cnpq.br/4281189100627193; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Avaliar clinicamente a segurança e a eficácia terapêutica do transplante alogênico de Células Tronco Mesenquimais (CTM) de tecido adiposo canino em cães com sequelas neurológicas crônicas derivadas do vírus da cinomose. Métodos: Foram selecionados 20 cães com diagnóstico confirmado da doença e subsequente sequela neurológica com sinais mínimos de ataxia, paresia e ou plegia de membros torácicos e ou pélvicos, livres de formações neoplásicas, sem restrição de raça, sexo e com idades entre 6 a 125 meses. Foram realizados três transplantes de CTM alogênicas por via intravenosa em intervalos de 30 dias entre elas. O acompanhamento clínico geral foi realizado a cada 30 dias, incluindo-se foto e vídeo-documentação da evolução dos animais. As análises estatísticas utilizadas para comparar a classificação da resposta terapêutica entre as variáveis categóricas foram os testes Qui-Quadrado Simulado e Exato de Fisher, enquanto que para comparar as classificações da resposta terapêutica entre as variáveis numéricas foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis. Resultados: 80% dos animais tratados apresentaram uma melhora do quadro neurológico e voltaram a deambular. Desses 80%, 50% apresentaram uma melhora significativa classificada como excelente (animal que voltou a deambular normalmente), 30% apresentaram melhora classificada como moderada (animal que voltou a deambular, porém com algum grau de dificuldade) e 20% apresentaram resposta classificada como leve (animal que apresentou uma pequena melhora neurológica, mas não voltou a deambular). De a cordo com a localização da lesão no SNC, 40% (N=8) tiveram lesão medular, 30% (N=6) lesão multifocal, 20% (N=4) lesão cerebelar e 10% (N=2) lesão tálamocortical (cortex cerebral). Seguindo uma análise de resposta terapêutica por localização da lesão no sistema nervoso, houve uma diferença significativa (valor – p= 0,005) entre os locais de lesão, sendo que 87,5% dos que tiveram lesão medular apresentaram uma resposta excelente, 75% dos que tiveram lesão cerebelar apresentaram resposta moderada, enquanto que 66,7% dos que tiveram lesão multifocal apresentaram resposta leve. Comparando os animais que receberam tratamento coadjuvante `a terapia com células-tronco (N=10), com os que só receberam terapia com células-tronco (N=10), não houve diferença significativa no tipo de resposta apresentada (valor –p= 0,703). Durante o tratamento, nenhum animal apresentou qualquer tipo de reação ou efeito colateral imediato ou tardio ao transplante alogênico. Conclusão: Múltiplas aplicações de Células Tronco Mesenquimais alogênicas derivadas de tecido adiposo canino mostraram-se seguras durante todo o acompanhamento em 100% dos animais tratados e eficazes em 80%, os quais voltaram a deambular. Os animais que possuem lesão exclusivamente medular, apresentam melhores chances de recuperar comparado aos animais com lesão neurológica multifocal.
- ItemSomente MetadadadosConstrução de um vetor para expressão controlada de condroitinase AC por células tronco mesenquimais/(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011-02-22) Moreira, Caroline Mônaco [UNIFESP]; Porcionatto, Marimélia Aparecida [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Adult mammal axons fail to regenerate when damaged, generating a fundamental problem, inhibiting the recovery of injured central nervous system (CNS). The lack of full regenerative capacity of the injured CNS is due to a glial scar formation on the injury site. The glial scar is formed by astrocytes, oligodendrocyte precursor cells, and microglia, cells that produce molecules that inhibit axonal regeneration. Chondroitin sulphate proteoglycans are the major responsible for this inhibitory characteristic. Chondroitin sulphate chain degradation by enzymes named chondroitinases reduces local inhibition and increases axonal regeneration. Another possibility to treat CNS injury is cell therapy using mesenchymal stem cells (MSC). MSC can be used to repair injured tissues providing new cells, to replace the damaged ones, or as a source of trophic factors, stimulating the regeneration by secreting bioactive factors. In the present work, we used a combination of two approaches for the treatment of injured CNS: gene and cellular therapies. We have produced a retroviral vector containing the gene for chondroitinase AC (cAC), for the controlled expression of the enzyme, produced the correspondent viruses and tested their transduction capacity in CHO and 9L cells. The expression of cAC was observed in CHO cells. In parallel, we have cultivated MSC that were also transduced with the viruses; however, we have not observed the cAC expression in these cells, suggesting a possible silencing mechanism. Although more studies are needed to the cAC expression by MSC, the combined use of MSC and cAC can be a useful tool for the treatment of injured SNC.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Diodo emissor de luz potencializa as ações de células tronco mesenquimais na insuficiência cardíaca pós-infarto em ratas?(Universidade Federal de São Paulo, 2024) Santos, Carolina Fernanda Chaves dos [UNIFESP]; Serra, Andrey Jorge [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/6499058447489317; http://lattes.cnpq.br/5397598320116511Objetivo: Avaliar o potencial terapêutico de células tronco mesenquimais do tecido adiposo (CTMAs) irradiadas com o diodo emissor de luz (LED) na disfunção cardíaca e na atenuação da inflamação e estresse oxidativo pós-infarto do miocárdio (IM). Métodos: 80 ratas Fisher-344 foram distribuídas em quatro grupos experimentais sendo o grupo SHAM, submetido a cirurgia simulada. E os grupos que foram submetidos ao infarto por oclusão da artéria coronária interventricular anterior: Grupo IM, ratas infartadas que permaneceram sem tratamento; Grupo IMC, ratas infartadas que receberam transplante intramiocárdico de 1x106 CTMAs não irradiadas; Grupo IMCL, ratas infartadas que receberam CTMAs irradiadas com LED de 630 nm, uma vez a cada 48h com exposição radiante de 4 J/cm². Uma ecocardiografia foi realizada nos animais sobreviventes 48 horas após intervenção para inclusão de animais com IM ≥ 37% do ventrículo esquerdo (VE). O estudo morfofuncional do VE foi conduzido 3 semanas pós-transplante por emprego de técnica ecocardiográfica e cateterismo do VE. Os corações foram coletados para as análises biomoleculares de perfil inflamatório, estresse oxidativo e de proteínas que modulam a cinética do cálcio por ELISA e Western blot. Resultados: Os animais tratados com CTMAs apresentaram menor dilatação cavitaria e atenuação da disfunção sistólica do VE. A cardioproteção exercida pelo LED foi observada, somente, nos valores da razão E/A em comparação com os outros grupos infartados. O estudo hemodinâmico revelou que o grupo tratado com CTMAs irradiadas com LED teve atenuação significante na pressão diastólica final, na +dP/dt e na -dP/dt. As ratas infartadas tiveram maior massa miocárdica, teor de água no pulmão, expressão de IL-6 e estresse oxidativo. O transplante celular normalizou o teor de água pulmonar, as concentrações de MDA, a carbonilação e o teor do NCX para níveis similares ao do grupo SHAM, com efeito adicional promovido pelo LED no conteúdo de PLBThr17. O efeito cardioprotetor do LED pode ser observado também por expressar maior atividade da enzima antioxidante SOD no miocárdio. Conclusão: A terapia com CTMAs pode atenuar a disfunção cardíaca e o estresse oxidativo pós-IM e a aplicação do LED potencializa os efeitos terapêuticos das CTMAs no miocárdio infartado, com efeito aditivo modesto do LED em proteínas que modulam a cinética do cálcio.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Efeito do tratamento com brilhant blue G, um bloqueador do receptor P2X7, potencializado com células-tronco mesenquimais no hipocampo de animais epilépticos crônicos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-06-30) Moreira, Diego Marques [UNIFESP]; Monteiro, Beatriz de Oliveira [UNIFESP]; Romariz, Simone Amaro Alves [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/9325741054357205; http://lattes.cnpq.br/0245964878412260; http://lattes.cnpq.br/9937060994528698; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Epilepsy has as its main characteristic the manifestation of spontaneous and recurrent seizures that develop from neuronal changes in certain areas of the central nervous system. It has recently been shown that the P2X7 receptor (P2X7r) is overexpressed in the brain of chronic epileptic animals and in experimental models for various neurodegenerative diseases, supporting the hypothesis that P2X7 participates in pathways involved in neurodegeneration. In addition, blocking P2X7r with Brilliant Blue G (BBG), a P2X7r antagonist capable of crossing the blood-brain barrier, prevents the death of neural cells induced by status epilepticus (SE) in the epileptogenic phase Mesenchymal stem cells have paracrine properties, that is, they are able to release trophic factors that lead to a decrease in the inflammatory, apoptotic process and increase in cell proliferation at the injured site. Currently, the stem cell study has been suggested as possible treatments for neurodegenerative diseases, due to its ability to decrease neuroinflammatory processes and also due to its ability to differentiate in neurons. Thus, our work investigated the therapeutic potential of P2X7 receptor blockers, BBG, combined with mesenchymal stem cell transplantation in the chronic period of pilocarpine-induced epilepsy. This study contributed to the understanding of the mechanisms involved in hippocampal repair promoted by BBG and by mesenchymal stem cells in epilepsy. Adult male Wistar rats were treated with pilocarpine for an S.E. induction, and 14 days after recovery of substances subjected to stereotactic surgery for intrahippocampal MSC administration.After surgery, the rats were kept on observation for chronic seizures recording for 90 days, and treated with BBG from the 30th to the 60th day after SE (16 injections on interquartered days). As MSC donors were used by C57 / BL6EGFP mice All procedures were duly authorized by the institution's ethics committee under opinion # 8977 (Annex II). The results obtained in this study are the transplantation of MSC in epileptic rats, concomitantly with the treatment with BBG, to act in the preservation of cells and the reduction of seizures, thus indicating therapeutic potential.We conclude that the protective activity in the CTM-BBG group indicates that the decrease in inflammation in epilepsy is a critical piece for a reduction of seizures.The inflammatory mechanisms involved in epilepsy need to be better explo red.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Efeitos da dieta hiperlipídica sobre a expressão de receptores de leptina e sua ação sobre modificações epigenéticas em células mesenquimais multipotentes extraídas do tecido adiposo de camundongos.(Universidade Federal de São Paulo, 2022-12-20) Bispo, Andressa França de Sousa [UNIFESP]; Vale, Maria Isabel Cardoso Alonso [UNIFESP]; Correa, Lucia Maria Armelin [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4266175652800598Uma dieta hiperlipídica leva à obesidade, uma condição que gera importantes alterações no tecido adiposo branco (TAB). As células tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (Adipose derivedStromalCells – ASCs), são responsáveis por gerar novos adipócitos, expandindo o tecido adiposo. Alterações na expressão de fatores de transcrição e de marcas epigenéticas no núcleo de ASCs podem ter efeitos na proliferação e na adipogênese dessas células afetando a expansãosaudável (hiperplásica) do TAB versus expansão patológica (hipertrófica) do TAB em indivíduos obesos. A leptina é uma adipocina com efeitos no sistema nervoso central, que incluem a indução do gasto energético e da saciedade. Também, tem grande relevância na ativação de células imunes e na modulação da resposta inflamatória. Sabe-se que, na obesidade, os efeitos centrais da leptina são prejudicados, pois os aumentos no acúmulo de TAB e nos níveis de leptina são acompanhados por resistência hipotalâmica à leptina, assim, seus efeitos locais podem prevalecer e contribuir para a expansão do TAB e aumento da inflamação. Esse fenômeno tem sido considerado resistência à leptina e pode ser resultado de deficiências em vários níveis na via de sinalização da leptina, incluindo acesso reduzido do hormônio ao seu receptor devido a alterações na expressão do receptor e/ ou alterações na transdução de sinal pós-receptor. O TAB é um ambiente rico em leptina, mas as ações locais da leptina sobre a adipogênese não foram completamente investigadas. Assim, se faz necessário avaliar as contribuições da sinalização parácrina da leptina e de seus receptores na obesidade, em células mesenquimais multipotentes do TAB, objetivo do presente projeto. Considerando que as ASCs são células progenitoras que residem em um nicho altamente enriquecido em leptina (secretadas por adipócitos) no TAB de obesos, hipotetizamos que a obesidade (via ação da leptina em ASCs), levaria a importantes alterações nas enzimas promotoras de marcas epigenéticas, que culmina na queda da expressão de alguns genes comumente silenciados na obesidade, especialmente aqueles relacionados à adipogênese. Para estudarmos estas alterações avaliamos a expressão do receptor de leptina por PCR em Tempo Real, em ASCs isoladas do TAB subcutâneo e epididimal de animais controles e obesos (induzidos por dieta hiperlipídica), a fim de correlacionar os dados com demais resultados do grupo. Adicionalmente, tratamos ASCs de obesos com leptina a fim de entender seu efeito parácrino (in vitro) sobre estas mesmas marcas. Nossos resultados mostraram que os animais obesos (induzidos pela dieta hiperlipídica DHL) apresentaram um aumento de ~30% na massa corpórea, maior glicemia de jejum (~50%) e intolerância à glicose. A expressão de ambos os receptores Lepr1 e Lepr2 foram diminuídos em ~40 e 45%, respectivamente, em ASCs de obesos em comparação aos animais controle. A leptina (como esperado) não foi expressa nestas células, tal qual LepR3. Detectamos uma diminuição na expressão da H3K27 acetilada nas ASCs de obesos, e da Acly, que parece ter um importante papel na acetilação da histona 3. Essa marca epigenética contribui para a ativação da transcrição de genes ligados a adipogênese. Adicionalmente, a expressão da Acly e da enzima demetilase Kdm6b (enzima que remove grupos metil para posterior ação de acetilases) diminuiu quando ASCs foram tratadas in vitro com leptina. Assim, sugerimos que a sinalização aumentada de leptina em ASCs diminui a expressão de ATP Citrato Liase, levando à redução de substrato para acetilação de H3K27 o que pode contribuir para o silenciamento de genes comumente observados na obesidade.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Imunomodulação promovida pelo transplante de células tronco mesenquimais derivadas de medula óssea em lesões no sistema nervoso central(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2011-02-22) Galindo, Layla Testa [UNIFESP]; Porcionatto, Marimélia Aparecida [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Central nervous system (CNS) injury breakes the impermeability of the blood brain barrier, this allows the invasion of immune cells and activation of glial cells, mainly microglia and astrocytes. This process triggers the secretion of inflammatory mediators by these cells. Cytokines are the main molecules in neuroinflammatory response and are critical for its regulation, exerting a variety of actions in the CNS. Furthermore, mesenchymal stem cells (MSC) which have proliferative potential and are able to originate different and specialized cell lineages, also secrete these molecules, characterizing its immunomodulatory function. MSC, particularly those derived from bone marrow, promote tissue repair by secreting factors that enhance tissue regeneration stimulating proliferation, migration and differentiation of endogenous stem-like progenitors found in most tissues, decreasing inflammatory and immune reactions and apoptosis. The ability of such cells to alter tissue microenvironment through its trophic influence may contribute more significantly than their capacity for transdifferentiation in effecting tissue repair.Our hypothesis is that MSC secreted cytokines could take part in the attraction of endogenous neural stem cells (NSC) to an injury site in the CNS, providing a favorable microenvironment for these cells. Our aim was to study the effects of factors secreted by MSC on NSC in vitro and to analyse the MSC cytokines expression in vivo in a model of CNS traumatic injury. We first evaluated the effects of MSC secreted factors on apoptosis, proliferation and differentiation of adult NSC derived from the subventricular zone and cultured as neurospheres. Neurospheres were cultured in MSC conditioned medium (MSC-CM), which was obtained from bone marrow-derived MSC cultures. Besides a traumatic injury was performed at the primary motor cortex of mice and MSCs were injected at the injury site. Our results show that MSC secreted factors do not induce or prevent NSC apoptosis, increase NSC proliferation and induce bigger expression of GFAP gene in vitro, this could indicate a tendency of differentiation to astrocytes. In vivo experiments show that MSC injection at an acute model of injury diminishes pro-inflamatory cytokines in the injured tissue, suggesting that MSC secreted factors may modulate the inflammation at the injury site, which may be interest to the development favorable microenvironment for endogenous NSC and consequently repair of the injured tissue.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Investigação da terapia por células tronco mesenquimais na manutenção da motricidade em ratos portadores de lesão do córtex motor primário(Universidade Federal de São Paulo, 2023-09-05) Rufino, Rodrigo de Andrade [UNIFESP]; Silva, Marcelo Cavenaghi Pereira [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/9024534148148896; http://lattes.cnpq.br/1686290368867464O córtex motor primário (M1) é uma estrutura que em roedores compreende toda a região do córtex frontal. Esta região é responsável pela execução de movimentos voluntários por meio de suas principais eferências via motoneurônios superiores para a medula espinhal. Lesões cerebrais traumáticas que acometem diretamente o M1 pode provocar fraqueza muscular e dificuldade de contração voluntária de grupos musculares, afetando diretamente a qualidade de vida do indivíduo. Entretanto, diversos estudos da literatura vêm mostrando o uso de células tronco mesenquimais (CTMs) no tratamento de lesões e doenças neuro desmielinizantes. Assim, esta tese teve como objetivo avaliar a influência neuromoduladora da utilização de células-tronco mesenquimais derivadas da polpa dental (CTPD) em ratos portadores de lesão eletrolítica do M1. Foram utilizados ratos adultos machos da linhagem Wistar divididos em três grupos experimentais: um grupo Controle (G1; n = 7), um grupo M1 lesão (G2; n = 7) e um grupo M1 lesões + injeção de CTPD (G3; n = 7). Todos os animais foram submetidos a uma avaliação motora no rotarod. Nossos resultados mostram uma diminuição do tempo de permanência no rotarod após a lesão eletrolítica de M1 nos grupos G2 e G3, porém, o grupo G3 teve um aumento progressivo no tempo de permanência com a inoculação de CTPD. Também observamos uma maior quantidade de células da micróglia e astrócitos no grupo G3 em relação ao grupo G1 e G2. Portanto, nós podemos concluir que o tratamento com CTPD possivelmente promoveu uma maior quimiotaxia astrocitária e microglial, contribuindo para a formação da cicatrização glial durante a fase aguda da lesão e para a recuperação funcional do tecido neural, visto pela melhora no tempo de permanência no teste rotarod.
- ItemAcesso aberto (Open Access)O paradoxo arritmogênico do transplante de células tronco pós infarto de miocárdio(Universidade Federal de São Paulo, 2023) Seibt, Larissa Emília [UNIFESP]; Serra, Andrey Jorge [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/6499058447489317; http://lattes.cnpq.br/3257204441527752Objetivo: Examinar a repercussão antiarrtimica das células tronco mesenquimais (CMT) do tecido adiposo (CTMAs) em animais com infarto de miocárdio (IM). Métodos: O estudo contemplou três grupos experimentais: sham, submetido a cirurgia simulada para induzir IM e injeção intramiocárdica de solução salina; IMS, infartado por oclusão de coronariana e submetido a injeção intramiocárdica de solução salina; IM+CTMAs, infartado por oclusão coronariana submetido a injeção intramiocárdica de CTMAs. As injeções foram realizadas três dias após as cirurgias e o experimento de inducibilidade arritmogênica conduzido no quinto dia de experimentação; todos os animais foram autanasiados no quinto dia de expeirmtno para coleta e congelamento do miocárdio infartado e remoto. Foram analisados estresse oxidativo miocárdico, teor miocárdico de diferentes tipos de colágeno, conexinas e citocinas inflamatórias sabidamente envolvidas na gênese da arritmia ventricular pó-IM. Resultados: Apenas 35% dos animais do grupo IM-CTMAs desenvolveram arritmias ventriculares, enquanto a no grupo IMS foi de 65%. A proporção de taquicardia ventricular (TV) não sustentada (TVNS), sustentada (TVS) e fibrilação ventricular (FV) foi semelhante entre os grupos IM e IM+CTMAs, porém animais com CTMAs tiveram TV de menor duração. As CTMAs preveniram o aumento de IL-1β nas áreas distintas do miocárdio. Houve maior carbonilação e teor de 4-hidroxinonenal (4-HNE, um marcador de lipoperoxidação) no miocárdio das ratas infartadas, porém, as CTMAs atenuaram o aumento do 4-HNE na área infartada. O IM reduziu o conteúdo de conexina 43 na área remota, mas sem modificação na área infartada. Interessante, o transplante de CTMAs elevou o teor conexina 43 na área remota, inclusive acima dos níveis identificados para o grupo Sham. Conclusão: As CTMAs têm ação protetora para o desenvolvimento de arritmias, porém, não impetra benefícios expressivos para os animais que desenvolveram arritmias ventriculares. É possível pensar que a cardioproteção das CTMAs envolva ações anti-inflamatórias/oxidantes e melhora na formação de junções comunicantes.