Avaliacao do efeito da oxido nitrico sintase induzivel sobre a expressao do fator de diferenciacao dos osteoblastos (Cbfa1) na celula de musculo liso vascular de ratos
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Data
2009
Autores
Gloria, Maria Aparecida [UNIFESP]
Orientadores
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
O fator de diferenciacao, Cbfa1, e o regulador chave para a diferenciacao dos osteoblastos in vivo. A expressao do Cbfa1 tambem tem sido demonstrada em celulas osteoblasto-similes, as quais podem tambem derivar das celulas de musculo liso vascular (CMLVs). A superexpressao do Cbfa1 tem sido demonstrada na CMLV e esta associada a calcificacao vascular. O oxido nitrico (NO) foi inicialmente descrito como um potente vasodilatador sintetizado pelas celulas do endotelio vascular. Hoje se sabe que ele e um radical livre de vida curta produzido por outras celulas do organismo sob a acao da oxido nitrico sintase (NOS) e esta associado tambem com a regulacao, proliferacao e diferenciacao dos osteoblastos. O objetivo do presente estudo foi o de examinar a possivel regulacao do Cbfa1 pela NOS induzivel (iNOS) em cultura primaria da celula de musculo liso da arteria renal de ratos (CMLVr). A expressao de RNAm de Cbfa1 e iNOS foram analisadas pela reacao de polimerizacao em cadeia em CMLVr tratadas com lipopolissacaride (LPS), betaglicerofosfato (BGF) e aminoguanidino (AG). A expressao de Cbfa1 foi tambem analisada por imunocitoquimica. A sintese de NO foi determinada pelo metodo de quimioluminescencia. Houve um aumento na expressao de RNAm do Cbfa1 no grupo LPS (0,45±0,09) e LPS+BGF (0,48±0,07) quando comparado ao grupo controle (CTL) (0,20±0,04; p<0,05). NO grupo LPS+AG (0,14±0,04) houve uma diminuicao na expressao de RNAm de Cbfa1 quando comparado aos grupos CTL e LPS (p<0,05). A expressao de Cbfa1 tambem estava aumentada no grupo LPS (89,4±1,0%) e no grupo LPS+BGF (88,2±1,4%) comparada ao grupo CTL (53,4±1,4%; p<0,05), quando analisadas por imunocitoquimica. A producao de NO estava aumentada no grupo LPS (118,9±11,6) e diminuida no grupo LPS+AG (31,8±1,5) quando comparada ao grupo CTL (75,6±5,1 nmol/mg proteina; p<0.05). No grupo LPS+AG a producao de NO tambem estava diminuida quando comparada ao grupo LPS (p<0.05). A viabilidade celular para todos os grupos foi similar ao grupo CTL. Em conclusao, esse estudo demonstrou que a iNOS tem um efeito sobre o Cbfa1 evidenciado pelo aumento de sua expressao em cultura primaria de CMLVr
Descrição
Citação
São Paulo: [s.n.], 2009. 75 p.