Navegando por Palavras-chave "Tumor de células germinativas testiculares"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Ativação dos receptores estrogênicos, sinalização intracelular e função em células de carcinoma embrionário testicular humano NT2/D1
    (Universidade Federal de São Paulo, 2022-09-15) Lima, Carla Macheroni [UNIFESP]; Porto, Catarina Segreti [UNIFESP]; Vicente, Carolina Meloni [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2222473909041643; http://lattes.cnpq.br/6262412968631187; http://lattes.cnpq.br/4508296844844787
    Os mecanismos envolvidos no desenvolvimento e na progressão do tumor de células germinativas testiculares (TGCTs) não estão totalmente esclarecidos. Estudos recentes do nosso laboratório mostraram a expressão dos receptores estrogênicos ESR1 e ESR2 em células de carcinoma embrionário testicular humano (NT2/D1). É possível que a ativação dos receptores estrogênicos e a modulação de vias de sinalização intracelular estejam envolvidos nestes processos. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos da ativação dos receptores estrogênicos na expressão e na fosforilação de proteínas envolvidas com sinalização intracelular SRC, ERK1/2 e AKT e suas funções na proliferação, invasão, migração e formação de colônias em linhagem de células de carcinoma embrionário testicular humano NT2/D1. Além disso, foi determinado o perfil proteico destas células tratadas com 17β-estradiol. Foi observado que: 1. 17β-estradiol (E2), agonista seletivo do ESR1 (PPT) e agonista seletivo do ESR2 (DPN) levaram ao rápido aumento no estado de fosforilação de SRC e ERK1/2 nas células NT2/D1. Esses efeitos foram bloqueados pelos antagonistas seletivos do ESR1 (MPP) e do ESR2 (PHTPP). 2. A forma fosforilada da AKT foi praticamente não detectável tanto nas células NT2/D1 controle (ausência de tratamento) como nas células tratadas com E2 por diferentes tempos quando comparada com o controle positivo. 3. E2, agonista seletivo do ESR1 (PPT) e agonista seletivo do ESR2 (DPN) levaram ao aumento do número de células NT2/D1. O pré-tratamento dessas células com os inibidores de SRC (PP2) e MEK1/2 (U0126) bloquearam estes efeitos. Estes resultados indicam o envolvimento destas vias de sinalização na proliferação das células NT2/D1. 4. E2 e o agonista seletivo do ESR2 (DPN) causaram um aumento na migração das células NT2/D1. O pré-tratamento com o antagonista seletivo do ESR2 (PHTPP) bloqueou o efeito estimulado pelo E2 e do DPN na migração das células NT2/D1, indicando que o complexo E2-ESR2 está envolvido neste processo. O tratamento com o agonista seletivo do ESR1 (PPT) não alterou a migração destas células. 5. E2, o agonista seletivo do ESR1 (PPT) e o agonista seletivo do ESR2 (DPN) levaram ao aumento na invasão das células NT2/D1. O pré-tratamento com os antagonistas seletivos do ESR1 (MPP) e do ESR2 (PHTPP) bloquearam estes efeitos, indicando que o complexo E2-ESR1 e E2-ESR2 estão envolvidos neste processo. 6. E2, o agonista seletivo do ESR1 (PPT) e o agonista seletivo do ESR2 (DPN) levaram a formação de colônias das células NT2/D1. O pré-tratamento com os antagonistas seletivos do ESR1 (MPP) e do ESR2 (PHTPP) bloquearam estes efeitos, indicando que o complexo E2-ESR1 e E2-ESR2 estão envolvidos neste processo. 7. Os pré-tratamentos com inibidores de SRC (PP2) e MEK1/2 (U0126) bloquearam os efeitos da ativação dos receptores estrogênicos na migração e na invasão celular e na formação de colônias das células NT2/D1. Estes resultados indicam o envolvimento destas vias de sinalização nestes processos. 8. Foi investigado o papel das metaloproteínases na invasão das células NT2/D1 ativadas pelos ERs. Na presença do inibidor das metaloproteínases (GM6001) os efeitos do E2, do agonista seletivo do ESR1 (PPT) e do agonista seletivo do ESR2 (DPN) foram bloqueados. 9. A análise proteômica nas células NT2/D1 controles (sem tratamento) e tratadas com E2, mostraram proteínas diferencialmente expressas após o tratamento com E2. Foi observado o aumento de algumas proteínas envolvidas com o processo de migração celular com o tratamento com o E2. Em conclusão, a ativação do complexo E2-ESR1 aumenta a fosforilação de SRC e ERK1/2 e leva à proliferação e invasão celular e formação de colônias. A ativação do complexo E2-ESR2 aumenta a fosforilação de SRC e ERK1/2 e leva à proliferação, migração e invasão celular e formação de colônias. O tratamento com os agonistas seletivos do ESR1 e do ESR2 ativa metaloproteinases e estas proteínas estão também envolvidas na invasão das células NT2/D1 Nosso estudo fornece uma nova visão sobre mecanismos moleculares de ERs e vias de sinalização intracelular em células de carcinoma embrionário testicular humano NT2/D1. O mecanismo de ação dos ERs em tumor de células germinativas testiculares ainda precisa ser profundamente compreendido, mas representa um importante alvo terapêutico no futuro.