Navegando por Navegando por Palavras-chave "Suscetibilidade a Doenças"
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- ItemSomente MetadadadosAvaliacao da producao de biofilme de isolados clinicos do genero Trichosporon e sua susceptibilidade a triazolicos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Iturrieta-Gonzalez, Isabel Antonieta [UNIFESP]Introdução: Infeccoes invasivas por Trichosporon spp. tem aumentado consideravelmente nos ultimos anos, principalmente em pacientes neutropenicos e em uso de cateteres. O genero apresenta sensibilidade limitada a diferentes antifungicos, sendo a classe dos triazolicos, a primeira linha de escolha para o tratamento dessas infeccoes. O estudo de fatores de virulencia e vital para entendimento da presenca deste fungo no ambiente, na microbiota e sua disseminacao no paciente. A producao de biofilme, fator pouco explorado no genero, pode ser associada ao desenvolvimento deste patogeno e a persistencia da infeccao mesmo na presenca de antifungicos. Objetivos: i) investigar a producao de biofilme em isolados de diferentes especies do genero Trichosporon, obtidos de amostras de hemocultura, urina e de micoses superficiais; ii) testar a susceptibilidade das celulas planctonicas dos isolados frente aos triazolicos; iii) testar a susceptibilidade das celulas formadoras de biofilme dos diferentes isolados frente aos triazolicos. Material e Metodos: foram analisados 61 isolados de Trichosporon spp.: 19 obtidos de amostras de hemocultura, 20 de urina, 15 de micose superficial e 7 cepas de referencia CBS. Todos foram submetidos a identificacao molecular atraves do sequenciamento da regiao IGS1 do rDNA e ao estudo da formacao de biofilme sobre placas de poliestireno. A quantificacao do biofilme foi feita por coloracao com cristal violeta. Os biofilmes de isolados pertencentes as especies T. asahii e T. asteroides foram estudados por microscopia eletronica de varredura para avaliar a morfologia celular, e por microscopia de fluorescencia, para avaliar a viabilidade celular. Finalmente foi realizado o estudo de susceptibilidade aos triazolicos em celulas planctonicas e em celulas formadoras de biofilme. A CIM em celulas formadoras de biofilme foi obtida atraves do metodo de reducao do XTT. Resultados: A especie mais frequente neste estudo foi T. asahii, correspodendo a 66,7% do total dos isolados clinicos. Os isolados apresentaram elevada capacidade de adesao e formacao de biofilme, sendo T. inkin, T. asteroides e T. faecale, as especies com maiores niveis de formacao. Os ensaios de microscopia eletronica de varredura mostraram que a especie T. asahii apresentou principalmente hifas e artroconidios, enquanto que T. asteroides apresentou principalmente artroconidios curtos e escassas formas de filamentacao. A superficie do biofilme dessas especies apresentaram celulas metabolicamente ativas. Todos os isolados foram sensiveis ao fluconazol e voriconazol, com 52% de isolados com fenotipo SDD para itraconazol nas especies T. asahii e T. faecale. As celulas formadoras de biofilme dos 54 isolados clinicos estudados e de 5 cepas de referencia CBS foram resistentes a fluconazol, itraconazol e voriconazol, no entanto, as cepas de referencia T. asahii CBS 2479 e T. mucoides CBS 7625 apresentaram sensibilidade frente a fluconazol e voriconazol, respectivamente. Conclusoes: O sequenciamento da regiao IGS1 permite uma identificacao acurada de especies do genero Trichosporon. Os niveis de formacao de biofilme observados sao similares ou ate maiores aos descritos para o genero Candida. Isolados de diferentes especies de Trichosporon que apresentaram diferentes micromorfologias sao capazes de produzir altas quantidades de biofilmes maduros, com celulas metabolicamente ativas em suas superficies. As celulas planctonicas dos isolados clinicos foram sensiveis a fluconazol e voriconazol, sendo este ultimo, o que apresenta uma melhor atividade in vitro. As celulas formadoras de biofilme de todos os isolados clinicos de Trichosporon spp. foram pelo menos 1000 vezes mais resistentes a voriconazol
- ItemSomente MetadadadosAvaliação dos perfis de susceptibilidade a antifúngicos e cariotipagem eletroforética de isolados clínicos de Cryptococcus neoformans, do Brasil, Chile e Venezuela, segundo variedades e sorotipos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 1999) Calvo Morales, Belinda Milagros [UNIFESP]; Gompertz, Olga Fischman [UNIFESP]Para investigar os perfis de susceptibilidade e cariotipagem eletroforetica ( segundo areas geograficas estudadas, variedades, sorotipos e presenca de infeccao por HIV foram analisados 100 isolados clinicos de Cryptococcus neoformans, de 93 pacientes de ambos os sexos, de idade variaveis, com ou sem alteracao da funcao imune. As cepa provinham das regioes norte, nordeste, sudeste e sul do Brasil (69), do Chile (11) e da Venezuela (20). De cada paciente foi colhida, pelo menos, uma amostra para exame microscopico direto e cultivo, no inicio e durante o tratamento quando possivel. De seis pacientes com primoinfeccao e um com recorrencia foram obtidos isolados sequenciais Foi empregado o meio canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB) para separar a variedades de C. neoformans. Foi realizado o teste de susceptibilidade a anfotericina B, 5 fluorocitosina, fluconazol e itraconazol, comparativamente, pelo metodo de microdiluicao, segundo National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) e modificacao usando o meio de YNB. Em 75 amostras a sorotipagem foi realizada pela tecnica de aglutinacao em lamina (Crypto Check Iatron Co. Japao). CE atraves de eletroforese em campo pulsatil (PFGE), no sistema counter-clamped homogeneus electric field (CBEF) foi investigada em 51 cepas. Observaram-se 89 amostras da variedade neoformans, sendo pesquisado o sorotipo em 64 delas. Sorotipo A foi observado em 60, sorotipo D em uma e sorotipo AD em tres amostras. Entre 11 isolados da variedade gattii, nove pertenciam ao sorotipo B e dois, ao sorotipo C. As cepas exibiram alta susceptibilidade aos antifungicos testados. Nao houve diferencas significativas das CIMs das amostras investigadas no Brasil, nem entre essas e as dos outros paises e entre aquelas de pacientes com ou sem infeccao por HIV. No entanto, foram identificados distintos padroes de susceptibilidade a azolicos entre isolados de arnbas as variedades. O crescimento foi satisfatorio tanto no meio RPMI-1640 como em YNB. Indice de concordancia de 97 por cento foi obtido para fluconazol, com leituras realizadas apos 72 horas em RPMI-1640 versus 48 horas em YNB, o que sugere leituras mais precoces de ensaios com YNB para esse antifungico. A susceptibilidade de cepas sequenciais de sete casos nao mostrou diferencas significativas das CIMS, na maioria delas. A variacao do numero de cromossomos foi de seis a 11 e o peso molecular de 450/565 a 2200 Kb...(au)
- ItemSomente MetadadadosCaracterizacao fenotipica e genotipica de especies de Trichosporon e sua susceptibilidade a produtos naturais derivados de plantas(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2012) Silva, Flavia Cristina da [UNIFESP]Trichosporon spp. sao patogenos oportunistas emergentes que causam alta mortalidade entre pacientes imunocomprometidos. A presente investigacao teve como objetivos avaliar a caracterizacao fenotipica, genotipica e susceptibilidade de 15 amostras de Trichosporon a oleos essenciais de plantas medicinais e a extratos brutos de plantas da familia Piperaceae Microbiologicamente, as amostras investigadas apresentaram caracteristicas morfologicas e fisiologicas muito variadas dentro de uma mesma especie e a maioria nao foi condizente com a identificacao genotipica dessas amostras. Nos testes de susceptibilidade a oleos essenciais, Citrus limon (limao) foi o que apresentou menores valores de CIM (concentracao inibitoria minima), e o oleo de Cymbopogon winterianus (citronela) foi o que teve maiores valores de CIM, portanto, menor eficacia na inibicao do crescimento das amostras. Dentre as plantas da familia Piperaceae, o extrato bruto das folhas de Piper crassinervium foi o que teve menores valores de CIM. Nenhuma amostra teve o crescimento inibido por Piper cernuum. Nas associacoes do extrato bruto das folhas de P. crassinervium e anfotericina B, nao foi verificado efeito aditivo ou sinergico, mas na associacao do mesmo extrato com itraconazol, efeito aditivo foi observado em duas amostras
- ItemSomente MetadadadosResposta imune a GP43 do Paracoccidioides brasiliensis em camundongos resistentes e suscetiveis a infeccao pelo fungo(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2003) Godoy, Luiz Claudio [UNIFESP]A paracoccidioidomicose (PCM) compromete praticamente qualquer orgao ou sistema no homem, e e adquirida pela inalacao de propagulos do Paracoccidiodies brasifensis (Pb), fungo dimorfico cujo principal componente antigenico e uma glicoproteina de 43kDa (gp43). Os mecanismos patogenicos e imunologicos envolvidos na doenca sao ainda parcialmente compreendidos. A gp43 foi caracterizada como ligante especifico de laminina e supressora da atividade de macrofagos murinos, atributos que podem contribuir para a virulencia do fungo. Todos pacientes com PCMI tem, no soro, anticorpos dirigidos contra este antigeno. Alem disso, o antigeno provoca respostas de hipersensibilidade do tipo tardio (HTT) em pacientes e animais infectados) experimentalmente. Entretanto, o papel da resposta imune a este antigeno ao longo dai infeccao ainda nao e bem compreendido. Para melhor investigar a resposta imunologica a este componente do Pb, utilizamos um modelo murino bem estabelecido de resistencia e suscetibilidade a PCM, no qual animais da linhagem A/Sn controlam melhor a disseminacao fungica e sobrevivem mais tempo a infeccao que camundongos B10.A. Animais infectados por via intratraqueal foram desafiados com gp43 purificada no coxim plantar. Verificou-se, pela variacao da espessura da pata, ocorrencia dei edema 30min apos injecao do antigeno, diferente do observado em animais controle,, nao infectados. Nao se constatou HTT ate 72h depois do desafio. Em termos dei infiltrado celular inflamatorio, analise histologica do coxim 24h apos o desafio revelou' predominio de celulas mononucleares, alem de significativo infiltrado de celulas polimorfonucleares, o que caracterizou uma reacao de fase tardia da resposta imediata' observada. Nao houve diferenca entre as linhagens murinas com relacao ao tamanho do edema. Contudo, a porcentagem de celulas mononucleares recrutadas pelo desafio nos animais resistentes aumentou progressivamente com o tempo de infeccao, o que nao se deu nos camundongos suscetiveisa(au)