Navegando por Palavras-chave "Polycomb represor complex 2"

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    O papel do complexo repressor de Polycomb 2 na assinatura epigenética de fatores de transcrição envolvidos na diferenciação de células mesenquinais derivadas tecido adiposo de camundongo obesos
    (Universidade Federal de São Paulo, 2021-08-10) Silva, Viviane Simões da [UNIFESP]; Correa, Lúcia Maria Armelin [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/8588625601104309; http://lattes.cnpq.br/5750758119820387
    A obesidade é uma doença crônica que leva a importantes alterações no tecido adiposo branco (TAB). As células tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo (Adipose derived Stromal Cells – AdSC) estão implicadas na expansão do tecido pois são responsáveis por gerar novos adipócitos. O comprometimento das AdSCs com um determinado programa de diferenciação celular depende da ativação e do silenciamento de fatores de transcrição específicos. Foi observado que o TAB de camundongos obesos está enriquecido na marca de trimetilação da lisina 27 da histona 3 (H3K27me3), catalisada pelo Complexo Repressor de Polycomb 2 (PRC2), que leva ao silenciamento de genes. Entretanto, não se sabe se as AdSCs contribuem para esse enriquecimento. As AdSC de camundongos obesos apresentam aumento na capacidade de diferenciação em células ósseas e adiposas. Baseado nesses dados a nossa hipótese é que a obesidade leva a alterações na regulação epigenética de fatores de transcrição nas AdSCs. Para estudarmos estas alterações avaliamos a expressão das subunidades de PRC2 (Ezh2, Suz12 e Eed) e de H3K27me3, por PCR Tempo Real e Western Blot, em AdSC isoladas do TAB subcutâneo e epididimal de animais controle e obeso, induzidos por dieta hiperlipídica (HFD). Apesar de não termos encontrado alteração na expressão de Ezh2, Suz12 e Eed, ou de H3K27me3 nas AdSCs isoladas desses animais, pudemos verificar que a obesidade diminuiu a expressão do fator de transcrição Klf15 em cultura de AdSCs epididimais, enquanto que os fatores de transcrição C/EBPβ e C/EBPδ não apresentaram alteração. Ao tratarmos essas AdSCs com UNC1999, um inibidor competitivo de Ezh2, observamos um aumento da expressão de Klf15. Klf15 é um importante fator de transcrição que participa da ativação de PPAR durante a adipogênese, e as nossas análises de bancos de dados de imunoprecipitação de H3K27me3 em pré-adipócitos 3T3-l1 (GSE21365 e GSE73434) mostraram o enriquecimento dessa marca de silenciamento no promotor desse gene. Esses achados sugerem que Ezh2 silencia Klf15 em AdSCs, e que esse silenciamento é alterado pela obesidade em TAB epididimal. Como não encontramos alteração na quantidade de metilação de H3K27 no núcleo de AdSCs, resolvemos avaliar alterações na sua acetilação (H3K27ac), que caracteriza regiões de ativação da transcrição gênica. Observamos que as AdSCs epididimais sofrem uma importante diminuição em H3K27ac, apesar da expressão de p300, enzima responsável por essa marca, não estar alterada. Portanto, nossos dados sugerem que a obesidade diminui significativamente a expressão do fator de transcrição Klf15, que atua na adipogênese, e diminui também a presença de H3K27ac no núcleo de AdSCs do TAB epididimal. Essas alterações na expressão de fatores de transcrição e de marcas epigenéticas no núcleo de AdSCs podem ter efeitos na proliferação e na adipogênese dessas células afetando a expansão saudável do TAB (hiperplásica) versus expansão patológica do TAB (hipertrófica) em indivíduos obesos.