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    Administration of Neural Precursor Cells Ameliorates Renal Ischemia-Reperfusion Injury
    (Karger, 2009-01-01) Wang, Pamella Huey Mei [UNIFESP]; Schwindt, Telma Tiemi [UNIFESP]; Barnabe, Gabriela Filoso [UNIFESP]; Motta, Fabiana Louise Teixeira [UNIFESP]; Semedo, Patricia [UNIFESP]; Beraldo, Felipe Caetano; Mazzali, Marilda; Reis, Marlene Antonia dos; Teixeira, Vicente de Paula Antunes; Pacheco-Silva, Alvaro [UNIFESP]; Mello, Luiz Eugenio Araujo de Moraes [UNIFESP]; Camara, Niels Olsen Saraiva [UNIFESP]; Universidade de São Paulo (USP); Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP); Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP); Univ Fed Triangulo Mineiro; Inst Israelita Ensino & Pesquisa Albert Einstein
    In this study we evaluated whether administration of stem cells of neural origin (neural precursor cells, NPCs) could be protective against renal ischemia-reperfusion injury (IRI). We hypothesized that stem cell outcomes are not tissue-specific and that NPCs can improve tissue damage through paracrine mechanisms, especially due to immunomodulation. To this end, Wistar rats (200-250 g) were submitted to 1-hour ischemia and treated with NPCs (4 x 10(6) cells/animal) at 4 h of reperfusion. To serve as controls, ischemic animals were treated with cerebellum homogenate harvested from adult rat brain. All groups were sacrificed at 24 h of reperfusion. NPCs were isolated from rat fetus telencephalon and cultured until neurosphere formation (7 days). Before administration, NPCs were labeled with carboxyfluorescein diacetate succinimydylester (CFSE). Kidneys were harvested for analysis of cytokine profile and macrophage infiltration. At 24 h, NPC treatment resulted in a significant reduction in serum creatinine (IRI + NPC 1.21 + 0.18 vs. IRI 3.33 + 0.14 and IRI + cerebellum 2.95 + 0.78mg/dl, p < 0.05) and acute tubular necrosis (IRI + NPC 46.0 + 2.4% vs. IRI 79.7 + 14.2%, p < 0.05). NPC-CFSE and glial fibrillary acidic protein (GFAP)-positive cells (astrocyte marker) were found exclusively in renal parenchyma, which also presented GFAP and SOX-2 (an embryonic neural stem cell marker) mRNA expression. NPC treatment resulted in lower renal proinflammatory IL1-beta and TNF-alpha expression and higher anti-inflammatory IL-4 and IL-10 transcription. NPC-treated animals also had less macrophage infiltration and decreased serum proinflammatory cytokines (IL-1 beta, TNF-alpha and INF-gamma). Our data suggested that NPC therapy improved renal function by influencing immunological responses. Copyright (C) 2009 S. Karger AG, Basel
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    Acesso aberto (Open Access)
    Caracterização in vitro de precursores neuronais da eminência gangliônica medial e avaliação in vivo do seu potencial anticonvulsivo após transplante em animais epilépticos
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2016-05-13) Romariz, Simone Amaro Alves [UNIFESP]; Longo, Beatriz Monteiro [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/0245964878412260; http://lattes.cnpq.br/9325741054357205; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Epilepsia, crises epilépticas espontâneas e recorrentes se desenvolvem a partir de disparos neuronais contínuos e de alta frequência que podem ser gerados por uma disfunção sináptica inibitória. Portanto, as consequências da perda ou disfunção de interneurônios GABAérgicos no desenvolvimento do quadro epiléptico são importantes. Os interneurônios inibitórios se originam na região do telencéfalo conhecida como eminência gangliônica medial (EGM). Células progenitoras da EGM têm a capacidade de migrar e se diferenciar em interneurônios inibitórios GABAérgicos, modificando o tônus inibitório quando transplantadas no cérebro do hospedeiro. Assim, o transplante de células progenitoras derivadas da EGM pode modificar a circuitaria neuronal em disfunções neurológicas onde há alteração da função inibitória, como na epilepsia. No entanto, o transplante de células da EGM requer uma grande quantidade de células fetais, esbarrando em questões éticas. A expansão in vitro desses progenitores em neuroesferas pode ser uma alternativa para a aplicação terapêutica das células da EGM em maior escala. Nosso objetivo foi comparar diferentes condições de cultivo de neuroesferas derivadas da EGM quanto ao padrão de diferenciação neuronal e expressão de genes presentes na EGM in vitro e, avaliar in vivo após transplante em animais adultos no período epileptogênico, o potencial anticonvulsivo e de diferenciação em interneurônios inibitórios de células oriundas da EGM cultivadas ou não como neuroesferas. Os resultados in vitro mostraram que a remoção dos fatores de crescimento EGF e FGF2, bem como a adição de ácido retinóico ao meio de cultivo de neuroesferas oriundas da EGM aumentam a proporção de neurônios e a expressão de genes relacionados à especificação celular de interneurônios inibitórios nas neuroesferas, comparado à condição padrão de cultura. Os resultados in vivo indicam que as células derivadas da EGM que não foram cultivadas como neuroesferas originam mais interneurônios inibitórios e apresentam um efeito anticonvulsivo mais eficaz quando comparadas com células da EGM cultivadas como neuroesferas, independente das modificações realizadas no meio de cultivo. Dentre as células da EGM cultivadas como neuroesferas, as que foram cultivadas na presença de fatores de crescimento reduziram a frequência de crises do tipo IV e se diferenciaram, preferencialmente, em astrócitos. Concluímos que os precursores neuronais oriundos da região da EGM apresentam um potencial anticonvulsivo e que a técnica de expansão dessas células em neuroesferas, mesmo com as modificações no meio de cultivo, não favoreceu o aumento de interneurônios inibitórios após transplante em animais epilépticos. Apesar disso, as células cultivadas como neuroesferas na condição padrão se diferenciaram em astrócitos após o transplante, um tipo celular que pode ser importante no controle das crises espontâneas e recorrentes devido a possiveis mecanismos de redução de crises que devem ser melhor investigados.
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    Medial Ganglionic Eminence Cells Freshly Obtained or Expanded as Neurospheres Show Distinct Cellular and Molecular Properties in Reducing Epileptic Seizures
    (Wiley-Blackwell, 2017) Romariz, Simone A. A. [UNIFESP]; Paiva, Daisylea S. [UNIFESP]; Galindo, Layla T. [UNIFESP]; Barnabe, Gabriela F.; Guedes, Vivian A.; Borlongan, Cesario V.; Longo, Beatriz M. [UNIFESP]
    AimsMedial ganglionic eminence (MGE) progenitors give rise to inhibitory interneurons and may serve as an alternative cell source for large-scale cell transplantation for epilepsy after in vitro expansion. We investigated whether modifications in the culture medium of MGE neurospheres affect neuronal differentiation and expression of MGE-specific genes. In vivo, we compared anticonvulsant effects and cell differentiation pattern among neurospheres grown in different culture media and compared them with freshly harvested MGE cells. MethodsWe used four variations of cell culture: standard, containing growth factors (EGF/FGF-2) (GF)