Navegando por Palavras-chave "Mosaicismo 45,X/46,XY"

Agora exibindo 1 - 1 de 1
  • Imagem de Miniatura
    Item
    Embargo
    Avaliação de elementos regulatórios e domínios funcionais de SRY na etiologia molecular da disgenesia gonadal 46,XY utilizando diferentes metodologias citogenômicas e moleculares
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-06-27) Ferreira, Karen Rodrigues [UNIFESP]; Silva, Magnus Régios Dias da [UNIFESP]; Ferreira, Lucas Garcia Alves [UNIFESP]; Kizys, Marina Malta Letro [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/2251799531659813; http://lattes.cnpq.br/8126556017013838; http://lattes.cnpq.br/2598816440086436; https://lattes.cnpq.br/5804250910667258
    A determinação típica do sexo durante a gestação depende da presença ou ausência do cromossomo (chr) Y, que abriga o gene SRY (Yp11.2), o qual está localizado na fita antissenso e atua como um fator-gatilho para determinação molecular pró-testicular. Variantes patogênicas no SRY estão geralmente associadas à disgenesia gonadal (DG) 46,XY. Tem ficado evidente a importância de se investigar os elementos de regulação da expressão gênica em regiões não codificantes. Por isso, o presente trabalho rastreou variantes e rearranjos estruturais no locus gênico do SRY e regiões flanqueadoras em um caso esporádico e um caso familiar de DG 46,XY na forma completa (DGC), parcial (DGP) ou mista (DGM) acompanhados no Ambulatório de Desenvolvimento do Hospital São Paulo da Universidade Federal de São Paulo. O caso #1 é esporádico e corresponde a um indivíduo com gônada displásica e genitália atípica. O cariótipo por bandamento G no sangue periférico revelou duas linhagens celulares: 45,X,psu dic(22;Y)(p13;p?11.32)[32]/45,X[8]. A reação em cadeia da polimerase (PCR) seguida do sequenciamento do tipo Sanger demonstrou a presença do gene SRY sem variantes. O whole genome sequecing (WGS) foi utilizado para auxiliar na determinação dos pontos de quebra da translocação. Contudo, não foi possível a avaliação da região do rearranjo cromossômico. O cariótipo sugeriu que o ponto de quebra da translocação é mais telomérico em relação ao SRY. Perda de segmentos genômicos a jusante do SRY que se estendem até a banda Yp11.32 já foram associadas a casos de DGP 46,XY. Por isso, realizamos a técnica de hibridização in situ fluorescente (FISH) com sonda para o gene SHOX em sangue periférico para estimar o tamanho da perda da banda Yp11.32. No entanto, houve falha na hibridização das sondas. Já FISH em tecido testicular evidenciou a presença do SHOX, demonstrando que o ponto de quebra está a mais de 2 Mb em região mais telomérica que o SRY. A técnica de mapeamento óptico do genoma (OGM) foi também realizada para auxiliar na investigação dos segmentos genômicos envolvidos com a translocação. Embora tenha corroborado a presença de uma população de células 45,X, o OGM não identificou a translocação Y;22 observada pelo cariótipo. A partir desses dados, o caso #1 foi reclassificado como DGM 45,X/46,XY, tendo a haploinsuficiência do mosaicismo como etiologia molecular. O caso #2 é familiar, sendo que o probando #2.1 apresenta DGC 46,XY, seu meio-irmão #2.2 apresenta desenvolvimento testicular típico e seu sobrinho #2.3 (filho de #2.2) tem DGP 46,XY. Apesar da variabilidade fenotípica, dados anteriores demonstraram que os três membros estudados dessa família apresentam duplicação de 17 pb no gene SRY, a qual leva à variação no domínio C-terminal da proteína SRY (p.Tyr198CysfsX18). Investigamos se variantes em outros genes relacionados a diferenças de desenvolvimento do sexo (DDS) poderiam explicar essa variabilidade por WGS. Não foram encontradas outras variantes patogênicas que segregam com o fenótipo. Para investigar o efeito dessa variante sobre a atividade do SRY, realizamos um ensaio dual-luciferase para fatores de transcrição, porém a resposta de um dos controles do experimento não foi como esperada.