Navegando por Palavras-chave "Fertilization in vitro"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Análise da variação da concentração de amônia, dos aminoácidos alanina e glutamina e do dipeptídeo alanil-glutamina no meio de cultura de embriões humanos e os efeitos na reprodução assistida
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2009-03-25) Stevanato, Juliana [UNIFESP]; Bertolla, Ricardo Pimenta [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objective: to verify the relations between culture media concentrations of ammonia, alanine, glutamine, and alanyl-glutamine and embryo quality, pregnancy, and type of hormonal stimulation. Methods: a prospective case-control study was carried out including 62 embryos from 20 women submitted to assisted reproduction at the Sao Paulo Federal University. Inclusion criteria were age (up to 37 years old), one to four embryos transferred at day 3 of embryo culture, couples submitted to ICSI, and LH peak achieved through hCG administration. Experimental groups were subdivided according to embryo morphologic quality on days 2 and 3, homogenous (good embryos on days 2 and 3) or heterogeneous evolution, type of hormonal stimulation used (FSH or FSH and LH), and occurrence of pregnancy evaluated by serum ƒÒ-hCG. Culture media aliquots were collected after the embryos were transferred. Analysis of alanine, glutamine, alanyl-glutamine, and ammonia concentrations was performed using HPLC. Numerical variables were compared between groups using unpaired Student¡¦s T-test (heteroscedastic variables were transformed), and frequencies using Pearson¡¦s Chi-square or Fisher¡¦s exact test. Logistic models were constructed using female age, type of hormone used for stimulation, embryo quality, and the measured metabolites, in order to maximize predictability of occurrence of pregnancy. Data are presented as mean; standard deviation. Results: In the embryos transferred to women who achieved pregnancy, when compared to those who did not achieve pregnancy, lower levels of normalized glutamine (1.4; 0.7 and 1.9; 0.7, respectively, p=0.004) and ammonia (0.2; 0.01 and 0.3; 0.1, respectively, p=0.008) were observed. Higher levels or normalized alanyl-glutamine were observed in higher quality embryos on days 2 and 3, and on those who presented homogeneous evolution. Embryos from patients who received FSH with LH, when compared to those from patients who received only FSH, presented higher absolute values of alanyl-glutamine (334.9; 95.2 and 282.9; 62.4, respectively, p=0.017). In logistic regression, the model which best predicted pregnancy included all the normalized values of alanine, glutamine, age, type of hormone, and evolution (77.4% correct, p=0.00005). Conclusion: Our results allow us to conclude that, in our conditions: (i) embryos with better quality on days 2 and 3 and with a homogenous evolution are associated with higher contents of alanyl-glutamine in their culture media, (ii) lower levels of ammonia and glutamine in the culture media are associated to higher pregnancy rates, and (iii) FSH with LH during hormonal stimulation is associated to higher levels of alanyl-glutamine in the culture media.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Perfil metabolômico comparativo do líquido folicular de mulheres que alcançaram a gestação em tratamentos de fertilização in vitro
    (Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-10-17) Montani, Daniela Antunes [UNIFESP]; Fraietta, Renato [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/1545035937368744; http://lattes.cnpq.br/3170825336610377; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
    Objetivos: este estudo comparou o perfil metabolômico do líquido folicular de mulheres submetidas à injeção intracitoplasmática de espermatozoide, com o objetivo de verificar o potencial de gravidez e uma assinatura metabolômica dos resultados de gravidez em tratamentos de infertilidade. Métodos: Foi coletado o líquido folicular de 84 pacientes submetidas a estimulação ovariana controlada. As amostras foram divididas em dois grupos, dependendo do resultado beta hCG medido 14 ou 12 dias após a transferência do embrião: beta hCG positivo (n = 32) e beta hCG negativo (n = 52). Para a análise metabolômica foi realizado o protocolo de extração de Bligh & Dyer seguido de espectrometria de massa com ionização por eletropray em faixa de massa de 100-1200 m / z. Os dados dos espectros foram adquiridos em modo positivo e negativo. Os dados de metabolômica foram analisados por estatísticas multivariadas (PCA e PLS-DA) no software MetaboAnalyst 3.0. A PLS-DA foi utilizada para a seleção de biomarcadores. A curva de Característica Operacional do Receptor foi construída para os biomarcadores propostos como um conjunto e individualmente. A identificação dos biomarcadores selecionados foi feita no banco de dados on-line METLIN. A análise de enriquecimento funcional foi realizada no software CytoScape 3.5.1. Resultados: Ionização em modo positivo: foram selecionados seis íons como potenciais biomarcadores para o grupo beta hCG positivo, com valor preditivo de 99,1% e um íon foi selecionado para o grupo beta hCG negativo com valor preditivo de 96,7%. Na ionização em modo negativo, seis íons foram selecionados como biomarcadores característicos do grupo beta hCG negativo com valor preditivo de 83,5%. Ácido fosfatídico, fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina e ceramida foram os metabólitos atribuídos ao grupo de mulheres que engravidaram, enquanto, Monoacilglicerol, diacilglicerol, fosfatidilinositol, glicuronido de ácido cólico, androstano e precursores de estradiol foram atribuídos aos íons hiperrepresentados no grupo beta hCG negativo. Na análise funcional foram observadas, regulação do processo catabólico das proteínas lisossomais e a sinalização canônica de Wnt, como vias associadas ao maior potencial de gravidez. Enquanto que, a remodelação de lipoproteínas de alta densidade (HDL) e a via da P450 hidroxilase estão associadas ao menor potencial de gravidez. Conclusão: A abordagem metabolômica do LF pode ser uma boa ferramenta para indicar o potencial de gravidez em mulheres submetidas a ICSI permitindo, desta forma, identificar com alto poder de predição as pacientes que irão se beneficiar de tratamentos de alta complexidade.