Navegando por Palavras-chave "Dose-response relationship, drug"
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- ItemAcesso aberto (Open Access)Ação do AZT na expressão gênica e na síntese proteica da telomerase nas células de melanoma metastático humano(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-11-30) Souza Sobrinho, Celestino Prospero de [UNIFESP]; Ferreira, Lydia Masako [UNIFESP]; Santos, Ivan Dunshee de Abranches Oliveira [UNIFESP]; Sabino Neto, Miguel [UNIFESP]; Ivan Dunshee de Abranches Oliveira Santos : http://lattes.cnpq.br/7940183627771947; Miguel Sabino Neto : http://lattes.cnpq.br/2430172074494397; http://lattes.cnpq.br/1619822351741819 ; http://lattes.cnpq.br/8228543033522519; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Introdução: O melanoma é uma neoplasia cutânea melanocítica que possui caráter agressivo e rápida expansão. Vários fatores contribuem para o seu surgimento, como a predisposição genética, exposição solar, traumatismos físicos em nevos já existentes e imunodeficiências. Tanto em melanoma como em outras neoplasias, evidências demonstram que o processo de transformação maligna envolve várias alterações genéticas, que modificam processos celulares importantes, incluindo proliferação, diferenciação e morte programada da célula, processos estes também associados ao encurtamento dos telômeros. A enzima responsável pela síntese do telômero é conhecida como telomerase, uma transcriptase reversa especializada que pode ser associada com imortalização celular e câncer, sua atividade está ausente na maioria das células somáticas humanas normais e presentes em quase todas as linhagens de células tronco, imortais, germinativas e em aproximadamente 90% dos tumores humanos. A capacidade finita de replicações celulares é ultrapassada por células imortalizadas, que reativam a telomerase, sugerindo que a progressão de doenças malignas depende de sua reativação, e que um agente inibidor dessa enzima como a zidovudina (AZT) poderia ser uma droga antitumoral efetiva. Objetivo: Avaliar o AZT na atividade da telomerase, expressão de P53 e apoptose em melanoma. Métodos: Foram utilizadas células de pacientes 16 provenientes de amostras de tecidos da região torácica, plantar, linfonodos axilares, linfonodos inguinais doadas em centro cirúrgico do hospital São Paulo e linhagens de células de melanoma Hs839T.As células foram cultivadas em meio de cultura suplementadas com 1000 μM de AZT em triplicata por 5h e 24h e comparados seus efeitos ao grupo controle. A avaliação da proliferação celular foi realizada pela técnica do MTT. A caracterização das células, marcação para P53, apoptose, detecção da telomerase (expressão proteica) foi realizada por citometria de fluxo e amplificação gênica da telomerase por PCR RT. Resultados: A ação do AZT diminuiu a expressão gênica da telomerase nas células estudadas com diferença estatisticamente significante. A ação do AZT não diminuiu a síntese proteica da telomerase nas células estudadas. Conclusão: Houve diminuição da expressão gênica da telomerase e não houve diminuição da síntese proteica da telomerase nas células estudas.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Freeze-drying as an alternative method of human sclera preservation(Conselho Brasileiro de Oftalmologia, 2008-04-01) Frota, Ana Carolina de Arantes; Lima Filho, Acácio Alves de Souza [UNIFESP]; Dias, Ana Beatriz Toledo; Lourenço, Andréia Cristina dos Santos [UNIFESP]; Antecka, Emilia; Burnier Júnior, Miguel Noel Nascente [UNIFESP]; McGill University Department of Ophthalmology Henry C. Witelson Ocular Pathology Laboratory; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)PURPOSE: To compare the effect of preserving sclera samples in either 95% ethanol or freeze-dried. METHODS: Ninety-six samples of human sclera were studied. Half of them were freeze-dried and half preserved in 95% ethanol. Preservation periods of 18, 45, 90 or 174 days were studied. Automated immunostaining was carried out in the Ventana BenchMarkR LT platform using collagen 1 and fibronectin antibodies. Histological staining was also performed with hematoxilin-eosin and Masson trichrome. Samples were classified according to the degree of collagen fiber parallelism (0-2), intensity of Masson staining (0-2), and the expression of both antibodies (0-3). Friedman and Wilcoxon tests were applied to compare preservation methods and p-values below 0.05 were considered to ensure statistical significance. RESULTS: Relevant results were found in three situations: (i) Friedman's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group rehydrated after 174-days as compared to the 90-day group; (ii) Wilcoxon's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group after 18 and 174 days as compared to the ethanol group; (iii) the freeze-dried group disclosed higher immunohistochemical expression for COL-1 antibody in the sclera samples rehydrated after 45, 90 and 174 days as compared to the ones rehydrated after 18 days. CONCLUSION: Histological and immunohistochemical analysis showed freeze-drying to be a superior method for sclera preservation as compared to 95% ethanol. This technique provides an easy method to manipulate tissue, with longer shelf life, and storage at room temperature.