Navegando por Palavras-chave "Aquaporins"
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- ItemSomente MetadadadosEstudo Histológico Da Expressão Da Aquaporina 2 Em Nervo Facial De Ratos(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2017-04-27) Gondra, Luiza De Almeida [UNIFESP]; Testa, Jose Ricardo Gurgel [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Objective: Facial palsy is a common mononeuropathy that occuring when interruption of facial nerve activity. The pathophysiology of idiopathic facial paralysis is uncertain and one of the possibilities would be the expression of aquaporins (AQPs), which influences neural edema and synaptic transmission by mechanisms of water homeostasis. Three AQPs (1, 2 and 4) were identified in the peripheral nervous system (PNS), and specifically in the facial nerve was identified AQP 1 and 2. The aim of the study was to describe the expression and histological location of AQP 2 in the facial nerve of rats. Methods: Five adult Wistar rats were used in the study. On the day zero (D0), four animals were submitted to compression of the extratemporal trunk of the right facial nerve (LESION group) and in one rat submitted to skin and subcutaneous dissection at right retroauricular region (SHAM group). On the following day (D1), the extratemporal segment (about 3 to 8 mm) of the right and left facial nerve of all animals were removed. The ten facial nerves samples were processed for paraffin sections to hematoxylin-eosin staining (HE) and immunohistochemistry using the anti-AQP 2 antibody. Qualitative analysis of the samples and Schwann cell immunolabelled counts where proceed. Results: Wallerian degeneration was observed in HE slides in 40% of the samples. The expression of AQP 2 on the facial nerve of rats was confirmed. In all nerves the presence of the antibody was observed, with greater expression in Schwann cells and endothelial cells and less expression in the cytoplasm of axons, perineural cells and epineurium. Schwann cell count revealed in two animals a statistical difference between the LESION group and the corresponding control nerves, with higher expression of AQP 2 on the nerves submitted to compression. Conclusion: The presence of AQP 2 in the facial nerve of rats was confirmed and the expression in this tissue was independent of any surgical intervention. After compression of the facial nerve, the marking of this protein increased, with possible mediation in the installation of the edema in this tissue.
- ItemSomente MetadadadosExpressão mitocondrial da proteína aquaporina 9 em células hipocampais e sua possível participação nos mecanismos de lancadeira de lactato(Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), 2013) Tescarollo, Fábio Cesar [UNIFESP]; Covolan, Luciene [UNIFESP]O encefalo e um dos orgaos metabolicamente mais ativos e, portanto, apresenta necessidades energeticas substanciais, principalmente em condicoes de hiperatividade, como na condicao epileptica. Estudos previos relatam que durante uma crise epileptica, agudamente ha reducao do aporte de glicose para os neuronios, havendo necessidade de substratos energeticos alternativos, como por exemplo, o lactato. Estudos previos preconizam que a proteina aquaporina 9 (AQP9) pode ter papel fundamental no transporte de lactato para o neuronio e para dentro da mitocondria, visto sua localizacao na membrana celular e principalmente, na membrana mitocondrial interna de neuronios. Foi demonstrado que o transporte de lactato para os neuronios e para as mitocondrias tambem ocorre atraves do transportador de monocarboxilato tipo 2 (MCT2), e e oxidado a piruvato pela enzima lactato desidrogenase (LDH) para ser utilizado como fonte de energia, como propoe as hipoteses da lancadeira de lactato astrocito-neuronio (ANLSH) e da lancadeira de lactato intracelular (ILS). Os objetivos desse trabalho foram estudar se a expressao da proteina AQP9 e alterada em modelos de hiperexcitabilidade celular no hipocampo in vitro e no modelo do Status epilepticus (SE) induzido por pilocarpina; e se a AQP9 apresenta condicoes de participar das lancadeiras de lactato. Para isso, ratos Wistar machos foram submetidos a 30 minutos de SE e apos extracao da camada CA1 do hipocampo, as celulas foram utilizada para ensaio de western blotting para as proteinas AQP9, MCT2 e LDH. Para os ensaios in vitro, hipocampos de embrioes com 18 dias de vida intrauterina foram extraidos, homogeneizados e mantidos em cultura por 6 dias. As celulas hipocampais em cultura foram estimuladas ou por adicao de 100μM de glutamato por uma hora (Glut100) ao meio ou pela retirada do cloreto de magnesio do meio e mantido por 3 horas em incubacao (-Mg). As celulas hipocampais em cultura foram utilizadas para ensaios de quantificacao de acumulo de 3H-2- deoxiglicose ([3H]2DG) intracelular e liberacao de lactato para o meio de cultura; estudos de expressao proteica das proteinas AQP9, MCT2 e LDH; ensaios de imunofluorescencia de dupla marcacao para as proteinas AQP9 ou MCT2 com mitotracker, e tambem analise por western blotting de extratos de proteinas mitocondriais. Alem disso, tambem foi realizado ensaio de imunofluorescencia de dupla marcacao para as AQP9 e MCT2, e por fim, para verificar se ha interacao entre MCT2 e AQP9, foi realizado um ensaio de imunoprecipitacao. Nossos resultados mostram que a estimulacao das celulas hipocampais em cultura com glutamato reduz o acumulo de glicose intracelular e ambas estimulacoes causam aumento na liberacao de lactato para o meio de cultura. A proteina AQP9 assim como MCT2 e LDH tem sua expressao aumentada, tanto em celulas do CA1 de hipocampos de ratos apos o SE quanto nas celulas em cultura estimuladas. AQP9 se co-localiza com mitotracker assim como o MCT2 alem de tambem estar presente nas fracoes mitocondriais analisadas. O resultado obtido no ensaio de imunoprecipitacao indica que possivelmente ha interacao entre AQP9 e MCT2. Portanto, os dados do presente trabalho sugerem que o aumento da expressao da proteina AQP9 e sua localizacao mitocondrial possivelmente a coloca em condicoes de exercer um papel no suprimento de lactato para neuronios em episodios de hiperexcitabilidade, como tambem de participar das hipoteses das lancadeiras de lactato.
- ItemAcesso aberto (Open Access)Revisão: transportadores de água(Associação Médica Brasileira, 1999-03-01) Cheidde, L. [UNIFESP]; Schor, Nestor [UNIFESP]; Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)