Navegando por Palavras-chave "Analytical validation"

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    Acesso aberto (Open Access)
    Desenvolvimento analítico em CLAE-DAD para quantificação do ácido gálico em extrato de Mouriri elliptica Martius Melastomataceae
    (Universidade Federal de São Paulo, 2020-10-02) Souza, Caique Calcagni de [UNIFESP]; Andreo, Marcio Adriano [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/4495354534371511; http://lattes.cnpq.br/0284343127391324
    INTRODUÇÃO: A espécie Mouriri elliptica é uma espécie vegetal oriunda do norte e nordeste brasileiro, que possui atividade antiúlcera, utilizada para o tratamento de gastrite e úlceras gástricas. OBJETIVO: Este trabalho tem como objetivo de desenvolver uma metodologia em CLAE-DAD para quantificação do ácido gálico em extrato de M. elliptica. MATERIAIS E MÉTODOS: A metodologia tem como etapas, a padronização volumétrica do extrato, o desenvolvimento da metodologia em CLAE-DAD utilizando o padrão de ácido gálico e validação desta metodologia tendo como referência a legislação vigente. RESULTADOS: Observa-se que o método desenvolvido atendeu os parâmetros de linearidade, seletividade e dois parâmetros de robustez. Adicionalmente, foi quantificado o teor de ácido gálico de um extrato padronizado de M. elliptica. CONCLUSÃO: O método desenvolvido apresentou resultados dentro dos parâmetros especificados pela resolução vigente para os ensaios realizados, se mostrando um método promissor para desenvolvimento de uma validação completa.
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    Acesso aberto (Open Access)
    Desenvolvimento e validação de método analítico in vitro para determinação de potência de produtos farmacêuticos com o ativo eritropoietina
    (Universidade Federal de São Paulo, 2024-06-28) Camargo, Bruno Taborda Paes [UNIFESP]; Lopes, Patrícia Santos [UNIFESP]; http://lattes.cnpq.br/7939687315116927; https://lattes.cnpq.br/3900809904681665
    O hormônio glicoproteico, eritropoietina humana (EPO) atua sobre as células predecessoras de eritrócitos estimulando sua proliferação, diferenciação, maturação e inibindo a apoptose, aumentando assim a produção de eritrócitos. A EPO é utilizada clinicamente para o tratamento de anemias associadas à falência renal crônica, tratamento de anemias associadas ao câncer, infecção por HIV, pré e pós-operatório, artrite reumatoide e transplante de medula óssea. Com o avanço da biotecnologia e o surgimento de técnicas de DNA recombinante, a EPO pode ser produzida em grande escala em Células de Ovário de Hamster Chinês (CHO) para a produção de medicamentos. O teste de potência da EPO é descrito ainda hoje, em compêndios oficiais, como um teste realizado em animais (in vivo), porém com o crescente cuidado ético no uso de animais em experimentos, os gastos com biotérios e a variabilidade dos resultados, iniciou-se o desenvolvimento de um método alternativo (in vitro). Utilizando uma linhagem celular não aderente predecessora de eritrócitos (TF-1), a metodologia em desenvolvimento é baseada em uma técnica colorimétrica e avalia a viabilidade e se as células estão metabolicamente ativas após estímulo com a EPO. Foram testadas variações analíticas para a técnica colorimétrica sendo que algumas dessas variações apresentaram resultados atisfatórios com curva de concentração resposta apresentando correlação forte para uma curva polinomial de segunda ordem. Foram realizadas em paralelo análises de espectrometria de massa e microscopia confocal para confirmar e avaliar a ação da EPO sobre a TF-1. A espectrometria de massa avaliou a regulação de proteínas intracelulares mediadas pela EPO e os resultados mostraram que 4 proteínas só puderam ser identificadas após a TF-1 receber estímulo da EPO, sendo estas proteínas de núcleo celular e estruturais. A Microscopia confocal avaliou a morfologia celular em cultivos com diferentes concentrações de EPO e foi possível visualizar que morfologicamente às células ficaram apresentaram modificações conforme a concentração de EPO aumentou na cultura. O método em desenvolvimento mostrou-se promissor, respondendo positivamente a avaliação de atividade celular, entregando uma curva de concentração resposta dependente da concentração de EPO utilizada no estímulo das células além dos ensaios de espectrometria e microscopia confirmarem que a linhagem celular responde ao estímulo do hormônio. Na sequência do trabalho, foi realizada a validação da metodologia desenvolvida, que entregou resultados dentro dos parâmetros estabelecidos para seletividade, linearidade, precisão, exatidão. A faixa de trabalho e os limites de detecção e de quantificação também puderam ser determinados. A metodologia in vitro proposta se mostra uma alternativa para substituição da metodologia in vivo atualmente descrita em compêndios oficiais.