Efeito do tratamento com sakuranetina isolada de baccharis retusa m modelo murino de inflamação pulmonar aguda induzida por instilação de LPS
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Data
2014-02-09
Autores
Mernak, Marcia Isabel Bittencourt [UNIFESP]
Orientadores
Prado, Carla Maximo [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS) is characterized by an intense inflammatory response, due to a pro-inflammatory and oxidant pathway activation, which induces early lung injury, followed by pulmonary remodeling. Until now there are no specific and effective therapeutic approaches, and the mortality is still high, at around 40%, causing an important impact in public health. The sakuranetin (SK) is a flavonoid extracted from Baccharis retusa. Aims: To evaluate the effects of SK treatment on changes in respiratory mechanics and lung histopathology in a model of ARDS. Methods: Balb-C mice received intratracheal instillation of lipopolysaccharide (LPS) and were treated with vehicle or SK 30’ before or 6 hours after LPS instillation. Control animals received saline and vehicle treatment. In order to analyze the presence of lung alterations in the moment in which the SK treatment began, one group of LPS was sacrificed 6 hours after the instillation. The others groups were sacrificed 24 hours after the LPS instillation. We evaluated the lung function, lung inflammation and peripheral blood cells, cytokines, collagen fibers deposition and MMP-9 and TIMP-1 expression. In order to understand some possible mechanisms involved, the expression of NF-kB and oxidative stress were measured. Results: Six hours after the LPS instillation, animals had presented an increase in neutrophils in bronchoalveolar lavage (BALF) and in peripheral blood, total protein and TNF- in BALF, IL-1, IL-6, KC, macrophages, MMP-9 and TIMP-1 in lung tissue, and increase in oxidative stress and NF-kB content. The majority of these alterations persist at least for 24 hours. The treatment with SK, both before or after the LPS instillation, reduced the inflammation in BALF and in tissue, the circulant neutrophils, KC, collagen fibers remodeling, MMP-9 and TIMP-1 expression as well as oxidative stress and NF-kB content in comparison to animals treated with vehicle. In addition, the SK treatment 6 hours after LPS instillation also reduced total protein in BALF, TNF- and IL-1, event not observed in animals that received the preventive treatment. Conclusion: Our results showed that SK avoid and reduced pulmonary inflammation and avoid the pulmonary remodeling by reduction in oxidative stress, IL-1 as well as NF-kB activation in an experimental model of ARDS. These data suggest that this substance has an anti-inflammatory therapeutic potential and need to be further investigated in the treatment of ARDS
A síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) é caracterizada por uma resposta inflamatória difusa, decorrente da ativação dos agentes pró-inflamatórios e oxidantes, que provocam lesão pulmonar inicial, seguida por remodelamento pulmonar. Até o momento sem medidas terapêuticas específicas e totalmente eficazes, a mortalidade ainda é elevada, em torno de 40% com grande impacto na saúda pública. A sakuranetina (SK) é um flavonóide extraído da Baccharis retusa. Objetivo: Avaliar os efeitos do tratamento com SK nas alterações de mecânica respiratória e na histopatologia pulmonar em modelo experimental de SDRA. Metodologia: Camundongos Balb-C receberam instilação intratraqueal com lipopolissacaríde (LPS) e tratamento com veículo ou com SK 30’ antes ou 6 horas após da instilação de LPS. Animais controle receberam salina e tratamento com veículo. Para analisar a presença das alterações pulmonar no momento em que teve início o tratamento com SK, um grupo de LPS foi sacrificado 6 horas após a instilação. Os demais grupos foram sacrificados 24 horas após a instilação de LPS. Avaliou-se a função pulmonar, a inflamação pulmonar e as células no sangue periférico, citocinas, deposição de fibras colágenas e expressão de MMP-9 e TIMP-1. A fim de entender alguns mecanismos envolvidos, avaliou-se a expressão de NF-kB e o estresse oxidativo. Resultados: Seis horas após a instilação de LPS, os animais já apresentam aumento de neutrófilos no lavado broncoalveolar (LBA) e no sangue periférico, de proteína total e TNF- no LBA, de IL-1, IL-6, KC, macrófagos, MMP-9 e TIMP-1 no tecido pulmonar, e aumento do estresse oxidativo e do conteúdo pulmonar de NF-kB. A maioria destas alterações persistiu por 24 horas. O tratamento com SK tanto administrado previamente quanto 6 horas após a instilação de LPS reduziu a inflamação no LBA e no tecido, o número de neutrófilos circulantes, KC, remodelamento de fibras colágenas, expressão de MMP-9 e TIMP-1, estresse oxidativo e o conteúdo de NF-kB em relação ao grupo tratado com veículo. Além disso, o tratamento realizado 6 horas após a instilação de LPS ainda reduziu a proteína total no LBA, o TNF- e a IL-1, fato não observado no tratamento preventivo. Conclusão: Nossos resultados mostram que a SK previne e reduz a inflamação pulmonar e previne o remodelamento pulmonar por redução do estresse oxidativo, de IL-1 e NF-kB em modelo experimental de SDRA. Estes dados sugerem que esta substância tem grande potencial terapêutico anti-inflamatório e que deve ser melhor investigada no tratamento de SDRA
A síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) é caracterizada por uma resposta inflamatória difusa, decorrente da ativação dos agentes pró-inflamatórios e oxidantes, que provocam lesão pulmonar inicial, seguida por remodelamento pulmonar. Até o momento sem medidas terapêuticas específicas e totalmente eficazes, a mortalidade ainda é elevada, em torno de 40% com grande impacto na saúda pública. A sakuranetina (SK) é um flavonóide extraído da Baccharis retusa. Objetivo: Avaliar os efeitos do tratamento com SK nas alterações de mecânica respiratória e na histopatologia pulmonar em modelo experimental de SDRA. Metodologia: Camundongos Balb-C receberam instilação intratraqueal com lipopolissacaríde (LPS) e tratamento com veículo ou com SK 30’ antes ou 6 horas após da instilação de LPS. Animais controle receberam salina e tratamento com veículo. Para analisar a presença das alterações pulmonar no momento em que teve início o tratamento com SK, um grupo de LPS foi sacrificado 6 horas após a instilação. Os demais grupos foram sacrificados 24 horas após a instilação de LPS. Avaliou-se a função pulmonar, a inflamação pulmonar e as células no sangue periférico, citocinas, deposição de fibras colágenas e expressão de MMP-9 e TIMP-1. A fim de entender alguns mecanismos envolvidos, avaliou-se a expressão de NF-kB e o estresse oxidativo. Resultados: Seis horas após a instilação de LPS, os animais já apresentam aumento de neutrófilos no lavado broncoalveolar (LBA) e no sangue periférico, de proteína total e TNF- no LBA, de IL-1, IL-6, KC, macrófagos, MMP-9 e TIMP-1 no tecido pulmonar, e aumento do estresse oxidativo e do conteúdo pulmonar de NF-kB. A maioria destas alterações persistiu por 24 horas. O tratamento com SK tanto administrado previamente quanto 6 horas após a instilação de LPS reduziu a inflamação no LBA e no tecido, o número de neutrófilos circulantes, KC, remodelamento de fibras colágenas, expressão de MMP-9 e TIMP-1, estresse oxidativo e o conteúdo de NF-kB em relação ao grupo tratado com veículo. Além disso, o tratamento realizado 6 horas após a instilação de LPS ainda reduziu a proteína total no LBA, o TNF- e a IL-1, fato não observado no tratamento preventivo. Conclusão: Nossos resultados mostram que a SK previne e reduz a inflamação pulmonar e previne o remodelamento pulmonar por redução do estresse oxidativo, de IL-1 e NF-kB em modelo experimental de SDRA. Estes dados sugerem que esta substância tem grande potencial terapêutico anti-inflamatório e que deve ser melhor investigada no tratamento de SDRA
Descrição
Citação
MERNAK, Marcia Isabel Bittencourt. Efeito do tratamento com sakuranetina isolada de baccharis retusa m modelo murino de inflamação pulmonar aguda induzida por instilação de LPS. 2014. 111 f. Dissertação (Mestrado) - Instituto de Ciências Ambientais, Químicas e Farmacêuticas, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), Diadema, 2014.