Envolvimento de ERK/MAPK na adesão e migração de neutrófilos e alterações no envelhecimento
Data
2010
Autores
Cardoso, André dos Santos Carneiro 
Orientadores
Simon, Karin Argenti
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
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Resumo
Os neutrófilos compõem a maior população de leucócitos circulantes no sangue humano, tendo importante papel na imunidade inata. Com a idade, o burst oxidativo, quimiotaxia e eficiência dos neutrófilos podem estar prejudicados, havendo subseqüente menor capacidade de destruição de
invasores. Essas funções são mediadas por receptores e vias de sinalização intracelular, que consequentemente podem estar alterados no envelhecimento. A regulação apropriada de genes em todas as formas de vida celular é dependente de circuitos intracelulares ou vias de transdução de sinal. A família das MAP quinases constitui a maior via sinalização de processos inflamatórios entre a superfície celular e o núcleo. Em mamíferos são conhecidos três grupos principais distintamente regulados de cascatas de MAPK que levam a expressão de genes alterada: ERK1/2, JNK e p38 MAP quinase. Os resultados obtidos com neutrófilos de voluntários jovens (18 a 25 anos) demonstram
envolvimento de ERK nos processos de adesão e transmigração celular. A inibição desta via de sinalização intracelular provocou diminuição significativa das taxas de adesão celular às HUVECs, bem como diminuição da taxa de transmigração de neutrófilos expostos a um estímulo quimiotático. Também foram observadas diferenças na comparação dos dados obtidos a partir da adesão de neutrófilos de voluntários jovens (n=26) e idosos (acima de 65 anos, n=20), sendo constatado aumento significativo da adesão do último grupo. A dosagem da expressão basal das moléculas de superfície não revelou diferenças com a inibição de pERK, sendo que a comparação entre os grupos
jovens e idosos revelou um aumento significativo na expressão de CD11b na membrana dos neutrófilos de idosos. Desta forma, podemos concluir que a via de sinalização intracelular ERK/MAPK desempenha importante papel no recrutamento do neutrófilo para o tecido periférico e que esse processo também é afetado pelo envelhecimento, sendo provocado possivelmente pelo maior status inflamatório encontrado nesse grupo, bem como por provável desregulação nas vias de sinalização intracelular envolvidas.
Neutrophils (PMNs) represent the major leukocyte population in human circulation, playing an important role in innate immunity. In aging, several PMN functions are impaired, including oxidative burst, chemotaxis and PMN efficiency. These functions are mediated by receptor and signaling pathways, which consequently may be altered in aging. Proper gene regulation is dependent on intracellular circuits and signal transduction pathways. MAPK family constitutes the major pro-inflammatory intracellular signaling pathway, of which ERK has been related to cell adhesion and transmigration processes, and implicated in neutrophil (PMN) CD11b/CD18 expression regulation. Adhesion results showed decreased adherence of PD-98059-incubated PMNs (p<0,01). Boyden chamber assays also revealed ERK-dependent PMN transmigration through IL-8 gradient (p<0,01). Differences were observed also in young (n=26) and elderly (n=20) data comparisons, showing significant increase of adherence rates in the latter group (p<0,01). Flow cytometry techniques were used in surface molecules CD11b, VLA-9, and CD31 analysis. None of the surface molecules showed any significant differences following pERK inhibition, while young and elderly groups analysis revealed CD11b increased levels in aging (p<0,05). Our results endorse the important role of ERK/MAPK signaling pathway in neutrophil recruitment to peripheral tissues. Evidence from the literature suggests that the continuous inflammatory condition found in the elderly might be due to multiple factors that accompany the aging process, including oxidative unbalance, tissue injury and increased production of inflammatory mediators, which, all together, might both lead to and/or result in cell signaling impairment.
Neutrophils (PMNs) represent the major leukocyte population in human circulation, playing an important role in innate immunity. In aging, several PMN functions are impaired, including oxidative burst, chemotaxis and PMN efficiency. These functions are mediated by receptor and signaling pathways, which consequently may be altered in aging. Proper gene regulation is dependent on intracellular circuits and signal transduction pathways. MAPK family constitutes the major pro-inflammatory intracellular signaling pathway, of which ERK has been related to cell adhesion and transmigration processes, and implicated in neutrophil (PMN) CD11b/CD18 expression regulation. Adhesion results showed decreased adherence of PD-98059-incubated PMNs (p<0,01). Boyden chamber assays also revealed ERK-dependent PMN transmigration through IL-8 gradient (p<0,01). Differences were observed also in young (n=26) and elderly (n=20) data comparisons, showing significant increase of adherence rates in the latter group (p<0,01). Flow cytometry techniques were used in surface molecules CD11b, VLA-9, and CD31 analysis. None of the surface molecules showed any significant differences following pERK inhibition, while young and elderly groups analysis revealed CD11b increased levels in aging (p<0,05). Our results endorse the important role of ERK/MAPK signaling pathway in neutrophil recruitment to peripheral tissues. Evidence from the literature suggests that the continuous inflammatory condition found in the elderly might be due to multiple factors that accompany the aging process, including oxidative unbalance, tissue injury and increased production of inflammatory mediators, which, all together, might both lead to and/or result in cell signaling impairment.
Descrição
Citação
CARDOSO, Andre dos Santos Carneiro. Envolvimento de ERK/MAPK na adesão e migração de neutrófilos e alterações no envelhecimento. Dissertação (Mestrado em Ciências) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2010.