Comparação entre membrana amniótica com e sem epitélio como substrato para cultura de células epiteliais do limbo ex vivo

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dc.contributor.authorCovre, Joyce Luciana [UNIFESP]
dc.contributor.authorLoureiro, Renata Ruoco [UNIFESP]
dc.contributor.authorCristovam, Priscila Cardoso [UNIFESP]
dc.contributor.authorRicardo, José Reinaldo da Silva [UNIFESP]
dc.contributor.authorFreymüller-Haapalainen, Edna [UNIFESP]
dc.contributor.authorGomes, José Álvaro Pereira [UNIFESP]
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.date.accessioned2015-06-14T13:43:01Z
dc.date.available2015-06-14T13:43:01Z
dc.date.issued2011-04-01
dc.description.abstractPURPOSE: To evaluate the efficacy and ultrastructural aspects of human limbal epithelial cells cultured on amniotic membrane (AM) with and without epithelium. METHODS: Limbal epithelial cell cultures were established from cadaveric cor neo-scleral rim explants derived from 6 different donors. The explants from each donor were placed under 3 different groups: on human preserved AM with epithelium (Group 1), AM deepithelialized with trypsin (Group 2) and control (Group 3). The epithelial cell migration was evaluated under phase contrast microscopy. After 15 days, the amniotic membrane with cells cultures were removed and submitted to scanning and transmission electron microscopy to check for epithelial migration and adhesion. RESULTS: All epithelial cell cultures from the controls grew over the botton of the culture plate wells until reaching confluence. Epithelial cultures grew over all but one denuded amniotic membrane. In the group amniotic membrane with epithelium, epithelial cell growing was observed only in 1 well. CONCLUSIONS: Using this model, denuded amniotic membrane appeared to be the best substrate for epithelial cell migration and adhesion comparing to amniotic membrane with epithelium. Removal of amniotic membrane epithelial seems to be an important step for establishing limbal epithelial cell culture on amniotic membrane.en
dc.description.abstractOBJETIVO: Avaliar a eficácia e aspecto estrutural de células límbicas epiteliais humanas cultivadas sobre membrana amniótica (MA) com e sem epitélio. MÉTODOS: As culturas límbicas foram obtidas a partir de rima corneoescleral remanescentes de transplantes de córnea de 6 diferentes doadores. Cada explante foi cultivado em três diferentes grupos: MA desepitelizada por tripsina (Grupo 1), MA com epitélio íntegro (Grupo 2) e controle (Grupo 3). A migração epitelial foi avaliada por microscopia de contraste de fase. Após 15 dias, as células cultivadas sobre MA foram submetidas à microscopia eletrônica para avaliar migração e adesão epitelial. RESULTADOS: Todas as células do grupo controle cresceram até atingir confluência. Somente uma das culturas em membrana amniótica desepitelizada não apresentou crescimento epitelial. O crescimento de células epiteliais sobre membrana amniótica epitelizada foi observada em apenas uma cultura. CONCLUSÃO: Baseando-se nestes achados, o uso de membrana amniótica desepitelizada aparenta ser o melhor substrato para migração e adesão epitelial comparando com membrana amniótica epitelizada. Remover o epitélio da membrana amniótica demonstra ser um importante passo para estabelecer culturas de células sobre membrana amniótica.pt
dc.description.affiliationUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de Oftalmologia Instituto da Visão
dc.description.affiliationUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de Oftalmologia
dc.description.affiliationUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Centro de Microscopia Eletrônica
dc.description.affiliationUnifespUNIFESP, Depto. de Oftalmologia Instituto da Visão
dc.description.affiliationUnifespUNIFESP, Depto. de Oftalmologia
dc.description.affiliationUnifespUNIFESP, Centro de Microscopia Eletrônica
dc.description.sourceSciELO
dc.format.extent114-117
dc.identifierhttp://dx.doi.org/10.1590/S0004-27492011000200009
dc.identifier.citationArquivos Brasileiros de Oftalmologia. Conselho Brasileiro de Oftalmologia, v. 74, n. 2, p. 114-117, 2011.
dc.identifier.doi10.1590/S0004-27492011000200009
dc.identifier.fileS0004-27492011000200009.pdf
dc.identifier.issn0004-2749
dc.identifier.scieloS0004-27492011000200009
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/6399
dc.identifier.wosWOS:000292938700009
dc.language.isopor
dc.publisherConselho Brasileiro de Oftalmologia
dc.relation.ispartofArquivos Brasileiros de Oftalmologia
dc.rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess
dc.subjectEpithelial cellsen
dc.subjectCell culture techniquesen
dc.subjectAmniotic membraneen
dc.subjectStem cellsen
dc.subjectLimbus corneaeen
dc.subjectCorneaen
dc.subjectCell adhesionen
dc.subjectComparative studyen
dc.subjectCélulas epiteliaispt
dc.subjectTécnicas de cultura de célulaspt
dc.subjectMembrana amnióticapt
dc.subjectCélulas-troncopt
dc.subjectLimbo da córneapt
dc.subjectCórneapt
dc.subjectAdesão celularpt
dc.subjectEstudo comparativopt
dc.titleComparação entre membrana amniótica com e sem epitélio como substrato para cultura de células epiteliais do limbo ex vivopt
dc.title.alternativeComparison between amniotic membrane with and without epithelium as a support for human limbal epithelial cells cultured ex vivoen
dc.typeinfo:eu-repo/semantics/article
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