Freeze-drying as an alternative method of human sclera preservation

dc.contributor.authorFrota, Ana Carolina de Arantes
dc.contributor.authorLima Filho, Acácio Alves de Souza [UNIFESP]
dc.contributor.authorDias, Ana Beatriz Toledo
dc.contributor.authorLourenço, Andréia Cristina dos Santos [UNIFESP]
dc.contributor.authorAntecka, Emilia
dc.contributor.authorBurnier Júnior, Miguel Noel Nascente [UNIFESP]
dc.contributor.institutionMcGill University Department of Ophthalmology Henry C. Witelson Ocular Pathology Laboratory
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.date.accessioned2015-06-14T13:38:30Z
dc.date.available2015-06-14T13:38:30Z
dc.date.issued2008-04-01
dc.description.abstractPURPOSE: To compare the effect of preserving sclera samples in either 95% ethanol or freeze-dried. METHODS: Ninety-six samples of human sclera were studied. Half of them were freeze-dried and half preserved in 95% ethanol. Preservation periods of 18, 45, 90 or 174 days were studied. Automated immunostaining was carried out in the Ventana BenchMarkR LT platform using collagen 1 and fibronectin antibodies. Histological staining was also performed with hematoxilin-eosin and Masson trichrome. Samples were classified according to the degree of collagen fiber parallelism (0-2), intensity of Masson staining (0-2), and the expression of both antibodies (0-3). Friedman and Wilcoxon tests were applied to compare preservation methods and p-values below 0.05 were considered to ensure statistical significance. RESULTS: Relevant results were found in three situations: (i) Friedman's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group rehydrated after 174-days as compared to the 90-day group; (ii) Wilcoxon's test showed better collagen fiber integrity in the freeze-dried group after 18 and 174 days as compared to the ethanol group; (iii) the freeze-dried group disclosed higher immunohistochemical expression for COL-1 antibody in the sclera samples rehydrated after 45, 90 and 174 days as compared to the ones rehydrated after 18 days. CONCLUSION: Histological and immunohistochemical analysis showed freeze-drying to be a superior method for sclera preservation as compared to 95% ethanol. This technique provides an easy method to manipulate tissue, with longer shelf life, and storage at room temperature.en
dc.description.abstractOBJETIVO: Comparar dois métodos de preservação de esclera humana, liofilização e álcool 95%, em diferentes períodos de tempo. MÉTODOS: Foram avaliados 96 fragmentos de seis escleras humanas. Metade das amostras foi submetida ao processo de liofilização e metade conservada em álcool 95%. Dois fragmentos de cada grupo foram avaliados pelas colorações de hematoxilina-eosina e tricrômio de Masson e submetidos a técnica de imuno-histoquímica para os anticorpos fibronectina e colágeno 1, após 18, 45, 90 e 174 dias de preservação. Os espécimens foram classificados de acordo com o paralelismo (PF:0-2) e integridade (IF:0-1) das fibras de colágeno e expressão imuno-histoquímica para os anticorpos fibronectina (FIB:0-3) e colágeno 1 (COL-1:0-3). A análise estatística foi realizada por meio dos testes de Friedman e Wilcoxon e o valor de p menor que 0,05 foi considerado estatisticamente significante. RESULTADOS: Verificaram-se diferenças significantes em três situações: (i) maior integridade das fibras de colágeno das escleras liofilizadas após 174 dias quando comparado aos 90 dias; (ii) maior expressão imuno-histoquímica para o anticorpo COL-1 nas amostras de escleras liofilizadas após os 18 dias iniciais de preservação; (iii) maior integridade das fibras de colágeno das escleras liofilizadas após 18 e 174 dias quando comparado às escleras preservadas em álcool. CONCLUSÕES: A preservação de tecido escleral por liofilização mostrou-se técnica tão eficaz quanto a preservação em álcool, apresentado vantagem quando considerada a integridade das fibras de colágeno. A liofilização mostra-se benéfica por permitir a estocagem do tecido em temperatura ambiente e com prazo de validade estendido.pt
dc.description.affiliationMcGill University Department of Ophthalmology Henry C. Witelson Ocular Pathology Laboratory
dc.description.affiliationFederal University of São Paulo Department of Ophthalmology
dc.description.affiliationUnifespUNIFESP, Department of Ophthalmology
dc.description.sourceSciELO
dc.format.extent137-141
dc.identifierhttp://dx.doi.org/10.1590/S0004-27492008000200002
dc.identifier.citationArquivos Brasileiros de Oftalmologia. Conselho Brasileiro de Oftalmologia, v. 71, n. 2, p. 137-141, 2008.
dc.identifier.doi10.1590/S0004-27492008000200002
dc.identifier.fileS0004-27492008000200002.pdf
dc.identifier.issn0004-2749
dc.identifier.scieloS0004-27492008000200002
dc.identifier.urihttp://repositorio.unifesp.br/handle/11600/4330
dc.language.isoeng
dc.publisherConselho Brasileiro de Oftalmologia
dc.relation.ispartofArquivos Brasileiros de Oftalmologia
dc.rightsAcesso aberto
dc.subjectFreeze-dryingen
dc.subjectScleraen
dc.subjectTissue preservationen
dc.subjectDose-response relationship, drugen
dc.subjectEthanolen
dc.subjectImmunohistochemistryen
dc.subjectCollagenen
dc.subjectLiofilizaçãopt
dc.subjectEsclerapt
dc.subjectPreservação de tecidopt
dc.subjectRelação dose-resposta a drogapt
dc.subjectEtanolpt
dc.subjectImunoistoquímicapt
dc.subjectColágenopt
dc.titleFreeze-drying as an alternative method of human sclera preservationen
dc.title.alternativeLiofilização como alternativa à preservação de esclera humanapt
dc.typeArtigo
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