Estudo da frequência temporal e padronização de uma PCR Multiplex para a detecção de oxacilinases em isolados clínicos de pseudomonas aeruginosa
Data
2013
Autores
Petrolini, Fernanda Villas Boas 
Orientadores
Gales, Ana Cristina
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Inicialmente um dendrograma foi realizado para a classificacao das diferentes oxacilinases descritas em isolados de P. aeruginosa em grupos. Com base nisso, reacoes de PCR multiplex e/ou convencional foram padronizadas utilizando iniciadores especificos para a deteccao e sequenciamento dos diferentes grupos de oxacilinases, diferenciando as oxacilinases de espectro restrito e ES-OXA descritas em P. aeruginosa. A partir dessa padronizacao, foi avaliada a presenca desses genes em uma colecao de 231 isolados clinicos de P. aeruginosa nao susceptiveis a cefepima no periodo de 1997-2011 provenientes do Hospital São Paulo - UNIFESP, localizado na cidade de São Paulo. A identificacao bacteriana dos isolados clinicos de P. aeruginosa foram identificados pela tecnica de MALDI-TOF MS e confirmado pela presenca do gene cromossomal blaOXA-50 codificador de uma oxacilinase de espectro restrito. Os genes pesquisados nos isolados clinicos estudados foram as oxacilinases: blaOXA-1; blaOXA-2; blaOXA-5; blaOXA-10; blaOXA-18; blaOXA-20; blaOXA-45; blaOXA-46; blaOXA-50; blaOXA-198, as MBLÆs blaIMP; blaVIM; blaSIM; blaGIM; blaSPM; blaGIM; as ESβL blaCTX-M; blaGES; blaTEM; blaSHV; e as carbapenemases blaKPC; blaGES-5. Genes codificadores de oxacilinases foram observados em 17,7% dos isolados avaliados, sendo o gene blaOXA-56 o mais frequentemente encontrado, seguido pelo gene blaOXA-2 (1,3%) e blaOXA-4 (0,90%). Alem desses, outros genes codificadores de β-lactamase foram tambem encontrados: blaCTX-M-2 (31,6%), blaSPM-1 (5,6%), blaSHV-5 (2,2%), blaGES-1 (1,7%) e blaTEM-1 (0,4%). Uma coproducao de OXA-2 com GES-1 e OXA-56 com GES-1 ou SPM-1 tambem foram observadas. Uma disseminacao clonal foi observada entre os isolados produtores de OXA-2, OXA-4 e SHV-5. No entanto, uma heterogeneidade clonal foi observada entre os isolados produtores de OXA-56 e CTX-M-2, as β-lactamases mais frequentes nos periodos de 1997-2001 e 2004-2011, respectivamente. Uma grande diversidade de β-lactamases foi observada entre os isolados de P. aeruginosa nao susceptiveis a cefepima durante o periodo de 15 anos de estudo, e tais enzimas estao relacionadas a resistencia as cefalosporinas de amplo espectro em um hospital universitario e terciario brasileiro
Descrição
Citação
PETROLINI, Fernanda Villas Boas. Estudo da Frequência Temporal e Padronização de uma PCR Multiplex para a Detecção de Oxacilinases em Isolados Clínicos de Pseudomonas aeruginosa. 2013. 130f. Dissertação (Mestrado em Infectologia) – Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo. São Paulo, 2013.