Avaliação da imunidade protetora induzida pela vacinação intranasal com adenovirus recombinante contendo gene da trans-sialidase
Data
2019-10-30
Autores
Noronha, Isau Henrique 
Orientadores
Vasconcelos, Jose Ronnie Carvalho de
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Chagas’ disease is caused by the intracellular agent Trypanosoma cruzi. Estimates indicate that 8 million people are infected worldwide, and in Brazil that is over 1 million people are infected with T. cruzi. The course of the disease may range from mild symptoms to premature death of the patient. During T. cruzi infection, the adaptive immune system releases a response mediated particularly by CD4+ and CD8+ T cells, which is indispensable for containing the infection. In addition to these cells, B cells are essential for combating T. cruzi, B cells produce neutralizing antibodies capable of neutralizing the parasite. The only chemotherapy drugs available so far are benzonidazole and nifurtimox, both drugs are most effective during the acute phase but are very toxic. Development of T. cruzi vaccine is essential, especially vaccines that induce a T and B cell response. Development of T. cruzi vaccines has advanced with knowledge of new antigens and new immunization platforms, but all vaccine formulations in development use the intramuscular route for inoculation. It is important to develop mucosal immunization protocol, as mucosal vaccines are capable of inducing mucosal and systemic immunity. In this work, the immunization protocol used was an adenoviral vector encoding trans-sialidase gene to immunized BALB/c mice. Protection against experimental challenge and immune response of CD8+ T cells and B cells was evaluated. Immunization protected 100% of animals immunized intranasally. Contrary to expectations, no specific CD8+ T cell response is seen, but the immunization protocol is capable of generating antibody-secreting cells (ASC) that produce anti-TS IgG and IgA. Intranasal immunization generated high titers of anti-TS IgG, furthermore immunization generated anti-TS IgA in serum and mucosal tissue. These antibodies generated by immunization show the ability to inhibit invasion of T. cruzi in cells in vitro, this result demonstrates that anti-TS is able to neutralize T. cruzi during infection conferring protection. Together, intranasal AdTS is capable of protecting against the experimental challenge and the protective response is by specific antibodies (Anti-TS).
A doença de chagas é causada pelo agente intracelular Trypanosoma cruzi. Estimativas indicam que 8 milhões de pessoas estão infectadas no mundo, e no Brasil acredita-se que mais de 1 milhão de pessoas estão infectadas por T. cruzi. A evolução da doença pode variar de sintomas brandos até morte prematura do paciente. Durante a infecção por T. cruzi, o sistema imune adaptativo lança uma resposta mediada, particularmente, por células T CD4+ e T CD8+ que são indispensáveis para contenção da infecção. Além dessas células, as células B são essenciais para combate da infeção por T. cruzi, as células B produzem anticorpos neutralizantes capazes de neutralizar o parasita. Os únicos quimioterápicos disponíveis até o momento são o benzonidazol e o nifurtimox, os dois medicamentos apresentam melhor eficácia durante a fase aguda, porém são muito tóxicos. É essencial o desenvolvimento de vacina contra T. cruzi, especialmente vacinas que induzam uma resposta de células T e B. O desenvolvimento de vacinas contra T. cruzi tem avançado com conhecimento de novos antígenos e novas plataformas de imunização, porém todas as formulações vacinais em desenvolvimento utilizam da via intramuscular para inoculação. É importante desenvolver protocolo de imunizações para mucosa, já que vacinas de mucosa são capazes de induzir imunidade de mucosa e sistêmica. Nesse trabalho foi testado um protocolo de imunização com vetor adenoviral contendo gene de transsialidase (AdTS) pela via intranasal em camundongos BALB/c. Foi avaliado a proteção ao desafio experimental e resposta imune de células T CD8+ e células B. A imunização intranasal protegeu 100% dos animais. Ao contrário do esperado, não é visto resposta de células T CD8+ específicas, porém o protocolo de imunização é capaz de gerar células secretoras de anticorpo (ASC) que produzem anti-TS IgG e IgA. A imunização gerou altos títulos de anti-TS IgG, além disso a imunização gerou anti-TS IgA no soro e no tecido de mucosa. Esses anticorpos gerados pela imunização inibiram a invasão de T. cruzi em células in vitro, esse resultado demonstra que a anti-TS é capaz de neutralizar o T. cruzi durante a infecção conferindo proteção. Em conjunto, o AdTS pela via intranasal é a capaz de proteger ao desafio experimental e a resposta protetora é por células B produtora de anticorpos anti-TS.
A doença de chagas é causada pelo agente intracelular Trypanosoma cruzi. Estimativas indicam que 8 milhões de pessoas estão infectadas no mundo, e no Brasil acredita-se que mais de 1 milhão de pessoas estão infectadas por T. cruzi. A evolução da doença pode variar de sintomas brandos até morte prematura do paciente. Durante a infecção por T. cruzi, o sistema imune adaptativo lança uma resposta mediada, particularmente, por células T CD4+ e T CD8+ que são indispensáveis para contenção da infecção. Além dessas células, as células B são essenciais para combate da infeção por T. cruzi, as células B produzem anticorpos neutralizantes capazes de neutralizar o parasita. Os únicos quimioterápicos disponíveis até o momento são o benzonidazol e o nifurtimox, os dois medicamentos apresentam melhor eficácia durante a fase aguda, porém são muito tóxicos. É essencial o desenvolvimento de vacina contra T. cruzi, especialmente vacinas que induzam uma resposta de células T e B. O desenvolvimento de vacinas contra T. cruzi tem avançado com conhecimento de novos antígenos e novas plataformas de imunização, porém todas as formulações vacinais em desenvolvimento utilizam da via intramuscular para inoculação. É importante desenvolver protocolo de imunizações para mucosa, já que vacinas de mucosa são capazes de induzir imunidade de mucosa e sistêmica. Nesse trabalho foi testado um protocolo de imunização com vetor adenoviral contendo gene de transsialidase (AdTS) pela via intranasal em camundongos BALB/c. Foi avaliado a proteção ao desafio experimental e resposta imune de células T CD8+ e células B. A imunização intranasal protegeu 100% dos animais. Ao contrário do esperado, não é visto resposta de células T CD8+ específicas, porém o protocolo de imunização é capaz de gerar células secretoras de anticorpo (ASC) que produzem anti-TS IgG e IgA. A imunização gerou altos títulos de anti-TS IgG, além disso a imunização gerou anti-TS IgA no soro e no tecido de mucosa. Esses anticorpos gerados pela imunização inibiram a invasão de T. cruzi em células in vitro, esse resultado demonstra que a anti-TS é capaz de neutralizar o T. cruzi durante a infecção conferindo proteção. Em conjunto, o AdTS pela via intranasal é a capaz de proteger ao desafio experimental e a resposta protetora é por células B produtora de anticorpos anti-TS.
Descrição
Citação
NORONHA, Isau Henrique. Avaliação da imunidade protetora induzida pela vacinação intranasal com adenovirus recombinante contendo gene da trans-sialidase. 2019. 75 f. Dissertação (Mestrado em Microbiologia e Imunologia) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo, 2019.