Viabilidade e morte celular em queimaduras In vitro

dc.audience.educationlevelMestrado
dc.contributor.advisorFerreira, Lydia Masako [UNIFESP]
dc.contributor.advisorLatteshttp://lattes.cnpq.br/1619822351741819
dc.contributor.authorFernandes, Ana Carolina Morais [UNIFESP]
dc.contributor.authorLatteshttp://lattes.cnpq.br/2375853964441250
dc.contributor.institutionUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)pt_BR
dc.coverage.spatialSão Paulo
dc.date.accessioned2020-03-25T11:44:01Z
dc.date.available2020-03-25T11:44:01Z
dc.date.issued2018-03-30
dc.description.abstractIntroduction: Burns are responsible for pathophysiological, cellular and molecular changes and represent a severe form of trauma. There are few in vitro studies that allow the analysis of viability and cell death in thermal burns. Objective: To develop an experimental in vitro burn model capable of evaluating the activity of skin cells such as NIH-3T3 fibroblast line cells under thermal stress conditions for specific temperature values. Characterizing the cellular morphology and the process of cell death by necrosis and / or apoptosis associated with thermal burn, impossible to be evaluated for skin cells in vivo. Methods: 1) NIH-3T3 fibroblast line cells were used, which were subjected to thermal burn for 30s at specified temperatures; 2) The effects of thermal injury on cell viability were determined by: MTT assay, flow cytometry and immunohistochemistry; 3) statistical analysis was performed by the ANOVA variance test, for p <0.05, considering the mean and standard error of quadriplicates, n=4. Results: the MTT assay determined two graphical curves (two phases) with an inflection point for the delta temperature of 15 ° C; flow cytometric analysis indicated that with the increase of the delta temperature there was progressively increase in apoptosis followed by progressive increase in necrosis; the immunohistochemistry evidenced that with the increase in temperature there was a decrease in number of cells and number of mitosis, changes in membrane structure and cytoskeleton (formation of vesicles), with pycnotic and irregular nuclei. Conclusion: With the increase of thermal injury temperature there were significant changes in cellular activity and viability; drastic changes in morphology, with cellular lysis and progressive increase of apoptosis and necrosis of NIH 3T3 cells.en
dc.description.abstractQueimaduras são responsáveis por alterações fisiopatológicas, celulares e moleculares e representam formas graves de trauma. Poucos são os estudos in vitro que possibilitem a análise da viabilidade e morte celular em queimaduras térmicas. Métodos: 1) Foram utilizadas células de linhagem de fibroblastos NIH-3T3, que foram submetidas a queimadura térmica por 30s a temperaturas especificadas; 2) Os efeitos da lesão térmica sobre a viabilidade celular foram determinados por ensaio MTT, citometria de fluxo e imunohistoquímica; 3) a análise estatística foi realizada pelo teste de variância ANOVA, para p<0.05, considerando a média e erro padrão de quadriplicatas, n=4. Resultados: o ensaio MTT determinou duas curvas gráficas (duas fases) com um ponto de inflexão para a temperatura delta de 15ºC. A análise por Citometria de Fluxo indicou que com o aumento do delta de temperatura houve progressivamente aumento de apoptose seguido pelo aumento progressivo de necrose. A Imunohistoquímica evidenciou que com o aumento da temperatura houve diminuição de número de células e do número de mitoses, mudanças na estrutura da membrana e citoesqueleto (formação de vesículas), com núcleos picnóticos e irregulares. Conclusão: Com o aumento da temperatura de lesão térmica houveram mudanças significativas na atividade celular e viabilidade (mudanças drásticas na morfologia, com lise celular e aumento progressivo de apoptose e necrose das células NIH 3T3).pt_BR
dc.description.sourceDados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2018)
dc.format.extent60 f.
dc.identifierhttps://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=6371073pt_BR
dc.identifier.fileDissertação_Ana Carolina Morais Fernandes.pdf
dc.identifier.urihttps://repositorio.unifesp.br/handle/11600/52530
dc.language.isopor
dc.publisherUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
dc.rightsAcesso aberto
dc.subjectQueimaduraspt_BR
dc.subjectLinhagem celularpt_BR
dc.subjectCélulas NIH 3t3pt_BR
dc.subjectFibroblastospt_BR
dc.subjectMorte celularpt_BR
dc.titleViabilidade e morte celular em queimaduras In vitropt_BR
dc.title.alternativeViability and cell death in in vitro burns.
dc.typeDissertação de mestrado
unifesp.campusSão Paulo, Escola Paulista de Medicinapt_BR
unifesp.graduateProgramCirurgia Translacionalpt_BR
unifesp.knowledgeAreaCiências da Saúdept_BR
unifesp.researchAreaEstresse Oxidativo e Modelos Experimentais em Transplantespt_BR
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Ana Beatriz Quintes Steiner - A.pdf
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Tese de doutorado