Impacto da restrição de sono na ativação e diferenciação de células B-1.

Abstract

Células B-1, um subtipo de linfócitos B, estão presentes nos tecidos linfoides e nas cavidades peritoneal e pleural. Apresentam a capacidade de produzir anticorpos naturais e induzíveis, secretam citocinas, podem fagocitar patógenos, migrar para foco inflamatório inespecífico e modular a resposta imunológica. No entanto, aspectos da fisiologia dessas células como o seu papel em situação de estresse (por exemplo na privação e/ou restrição de sono), ainda não foram esclarecidos. Dessa forma, esse trabalho teve por objetivo avaliar a ativação e diferenciação de células B-1 murinas em contexto de restrição de sono. Para tanto, grupos de camundongos machos da linhagem C57BL/6 foram submetidos ao protocolo de 18h de restrição de sono por 21 dias, sendo cada grupo infectado por diferentes micro-organismos ao vigésimo dia: Escherichia coli (bactéria), Candida albicans e Paracoccidioides brasiliensis (fungos). Então, células B-1 peritoneais desses animais foram purificadas e avaliadas quanto expressão de marcadores de ativação (CD80, CD86, CD40 e MHC-II), produção de moléculas microbicidas (NO e ROS) bem como expressão dos genes de citocinas (IL-6, IL-10, IL-12 e TNF-α), TLRs (2, 6, 9) e fatores de comprometimento linfoide e mieloide (EBF, E2A, IL-7R, G-csfr, M-csfr e Spi1). Nossos resultados mostraram que para todos os modelos de infecção, a restrição de sono estimulou em pouco ou nada a expressão de CD40, CD80, CD86, e MHC-II em células B-1. A produção de moléculas microbicidas por sua vez foi maior nos animais restritos de sono infectados com P. brasiliensis (NO) e C. albicans (ROS). Ainda, os resultados da expressão de genes de TLRs mostraram que nos modelos infectados com fungos houve aumento na expressão de TLR-2. Foi observado também que a expressão dos genes de citocinas foi maior em animais restritos infectados com P. brasiliensis (IL-12) e C. albicans (IL-12, IL-6 e TNF-α). Os dados de expressão dos genes de comprometimento de linhagem mostraram que para todos os modelos de infecção, foi observada polarização de células B-1 para perfil mieloide nos animais restritos de sono. Em conjunto, os resultados obtidos trazem importantes informações acerca das células B-1 e sugerem que a restrição de sono por si só pode influenciar a ativação e diferenciação dessas células, porém tais mudanças dependem do tipo de estímulo de infecção, ressaltando ainda mais a importância de estudos que avaliem alterações imunológicas decorrentes da restrição do sono.

B1 cells are a subtype of B lymphocytes distributed in lymphoid tissues and peritoneal and pleural cavities. These cells produce natural and inducible antibodies, secrete cytokines, phagocyte pathogens, migrate to nonspecific inflammatory focus and are able to modulate the immune response. However, the physiological aspects of B1 cells in stress condition (sleep restriction, for example), are poorly known. Thus, the present study aims to evaluate murine B1 cells physiology, activation and differentiation in sleep restriction context. For that, male C57BL/6 mice were submitted to 18 h sleep restriction protocol for 21 days. Then, mice were infected by a different microorganism on the twentieth day: Escherichia coli (bacteria), Candida albicans and Paracoccidioides brasiliensis (fungi). After 24 h, peritoneal B1 cells were purified and evaluated for activation markers expression (CD80, CD86, CD40 and MHCII), cytokines (IL6, IL10, IL12 e TNF), TLRs (2, 6 and 9) and lymphoid and myeloid commitment factors (EBF, E2A, IL7R, Gcsfr, Mcsfr and Spi1). Our results showed that sleep restriction have no effect on expression of CD40, CD80, CD86, and MHCII in B1 cells. Microbicidal molecules were higher in sleeprestricted animals infected with P. brasiliensis (NO) and C. albicans (ROS). Furthermore, TLRs genes expression results showed that fungi infected models can lead to an increase in TLR2 expression in sleeprestricted animals. It was also observed that cytokines gene expression were higher in restricted animals infected with P. brasiliensis (IL12) and C. albicans (IL12, IL6 and TNF). To all infection models (P. brasiliensis, C. albicans and E. coli), a myeloid profile polarization was observed in sleeprestricted animals. Altogether, our results bring valuable information about B1 cells, suggesting that sleep restriction alone can influence B1 cell activation and differentiation, but such changes depend on infection stimulus, highlighting the importance of more studies that assess immunological changes resulting due sleep restriction.