Efeito de peptídeos derivados da proteina Delonix regia trypsin inhibitor (DrTI) sobre parâmetros da hemostasia e em modelos de trombose arterial

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Data
2021-10-22
Autores
Souza, Daniel Alexandre de [UNIFESP]
Orientadores
Oliva, Maria Luiza Vilela [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
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Resumo
A hemostasia é definida como o complexo conjunto de processos bioquímicos que tem como função manter o sangue fluído e dentro dos vasos. Este sistema envolve uma variada classe de proteínas e processos interrelacionados e regulados de modo a manter a hemostasia. Este sistema é sensível a pequenas mudanças que podem levar a eventos severos, como hemorragia ou trombose. Diversos inibidores proteicos provenientes de plantas têm sido estudados e caracterizados e entre els está o Delonix regia trypsin inhibitor (DrTI). Esta proteína inibe serino-proteases (tripsina) e enzimas diretamente envolvidas no processo de coagulação, como a calicreína plasmática, fator XII e fator XI. Portanto, este trabalho objetiva avaliar o efeito de dois novos peptídeos sintéticos derivados da estrutura primária do DrTI na coagulação e em modelos de trombose arterial, para auxiliar no entendimento da patofisiologia protrombótica assim como o desenvolvimento de novas terapias antritrombóticas. Ambos os peptídeos agiram em parâmetros in vitro relacionados a trombose, demonstrando resultados promissores, uma vez que prolongaram o tempo de tromboplastina parcial ativado e inibiram a agregação plaquetária induzida por ADP e ácido araquidônico. Em modelos in vivo, de trombose arterial induzida por lesão fotoquímica e o estudo da interação de plaquetas-endotélio monitorada por microscopia intravital, ambos os peptídeos em dose de 0,5 mg/kg prolongaram o tempo para a oclusão arterial e modificaram o comportomaneto plaquetário, demonstrando alto potencial biotecnológico.
Hemostasis is defined as a set of complex biochemical processes that keep the blood fluid and contained in the vessels. Different systems involving varied classes of proteins are interrelated and regulated to maintain hemostasis, a physiological process, sensitive to small changes that can cause high severe events such as hemorrhage and thrombosis. Over the years, several plant protein inhibitors with anticoagulant properties have been studied and characterized, among them is Delonix regia trypsin inhibitor (DrTI). This protein inhibits serine proteases (trypsin) and enzymes directly involved in the coagulation process such as plasma kallikrein, factor XII and factor XI. Therefore, this work aims to evaluate the effects of two new synthetic peptides, derived from the primary sequence the DrTI in coagulation and thrombosis models to assist the understanding of the mechanisms involved in the pathophysiology pro-thrombotic as well as in the development of new antithrombotic therapies. Both peptides acted on in vitro hemostasis-related parameters showing promising results since they prolonged the Partially Activated Thromboplastin Time (aPTT) and inhibited the platelet aggregation induced by ADP and arachidonic acid. In mice models, arterial thrombosis, induced by photochemical injury, and platelet-endothelial interactions monitored by intravital microscopy, both peptides at doses of 0.5 mg/kg extended the time of artery occlusion and modified the platelet aggregation pattern demonstrating the high biotechnological potential of both molecules.
Descrição
Citação
SOUZA, D.A. Efeito de peptídeos derivados da proteina Delonix regia trypsin inhibitor (DrTI) sobre parâmetros da hemostasia e em modelos de trombose arterial. São Paulo, 2021. 71 f. Dissertação (Mestrado em Biologia Molecular) - Escola Paulista de Medicina (EPM), Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). São Paulo, 2021.