Análise da composição de extratos de folha, flor e raiz de Bryophyllum Pinnatum (Lam.) Oken. Efeitos das folhas sobre o desenvolvimento e comportamento embriolarval de zebrafish

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Data
2022-06-20
Autores
Pereira, Kassia Martins Fernandes [UNIFESP]
Orientadores
Nakamura, Mary Uchiyama [UNIFESP]
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
Introdução: A prevalência de ansiedade é alta durante a gravidez e a planta Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken (BP), Crassulaceae, tradicionalmente usada em inflamações e infecções, tem suas folhas utilizadas para tratar condições emocionais e prevenir o parto prematuro. Os efeitos da exposição dos extratos brutos de BP durante o desenvolvimento animal e a extensão dos efeitos benéficos e tóxicos permanecem incertos. Objetivo: Avaliação química e análise de atividade antioxidante dos extratos da planta (folha, flor e raiz) e efeitos no comportamento animal do extrato da folha (LBP). Materiais e Métodos: Espectrometria de Massas acoplada à Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (HPLC/EM/EM) para análise qualitativa de diferentes extratos da planta. Avaliação de atividade antioxidante utilizando o DPPH. O peixe-zebra foi o modelo animal escolhido para monitorar o comportamento. Os testes comportamentais investigando preferência claro/escuro, tigmotaxia e atividade locomotora, tanto em condições normais quanto sob estresse, foram realizados após exposições crônicas e agudas em diferentes concentrações de LBP em embriões e larvas de peixe-zebra. Resultados: Os diferentes extratos apresentaram semelhança qualitativa em sua composição. Os extratos de flores apresentaram maior atividade antioxidante. LBP demonstrou efeitos bifásicos no comportamento larval de maneira dose-dependente. A dose de 500mg/L em exposição crônica resultou em diminuição da aversão ao escuro e aumento da atividade locomotora, enquanto em exposição aguda (25 min) resultou em diminuição da locomoção. Acima de 700mg/L, os embriões apresentaram desenvolvimento retardado. A exposição de 300mg/L durante o ciclo do sono aumentou o índice de escolha e diminuiu a tigmotaxia. Após a privação do sono, o grupo tratado com 100mg/L apresentou diminuição da aversão ao escuro e aumento da velocidade. Após o calor estressante, 30 e 300mg/L mostraram diminuir a aversão ao escuro. Conclusão: Folha e flor apresentaram semelhança qualitativa em sua composição; flor apresentou maior atividade antioxidante. LBP testado em peixe-zebra demonstrou alterações comportamentais compatíveis com os ansiolíticos, tanto em condições fisiológicas como sob estresse.
The prevalence of anxiety is high during pregnancy. While several traditional medicines use the plant Bryophyllum pinnatum (Lam.) Oken (BP), Crassulaceae, to treat inflammations and infections, Anthroposophical Medicine uses its leaves to treat emotional conditions and to prevent preterm delivery. The beneficial and toxic effects after crude extract exposure during animal development remains unclear. After chemical profile analysis, and antioxidant activities of extracted samples (leaf, flower and root), it was also performed different behavioral testing after chronic and acute exposures to different concentrations of leaves of B. pinnatum (LBP) on embryos and larval zebrafish, investigating light/dark preference, thigmotaxis and locomotor activity, in both normal and stress conditions. The LBP extract demonstrated biphasic effects on larval behavior in a dose- dependent manner. Chronic exposure of 500mg/L LBP resulted in decreased dark aversion and increased locomotor activity, while this same dose in acute (25 min) exposure resulted in decreased locomotor activity. Up to 700mg/L of LBP, the embryos showed retarded development. Larvae exposed to 500mg/L LBP resulted in decreased dark avoidance and increased locomotor activity. When 300mg/L of LBP was exposed during sleep cycle, the choice index increased, thigmotaxis decreased. After sleep deprivation, the 100mg/L treated group showed decreased dark aversion and increased velocity. After heating stressor, the 30- and 300mg/L treated groups showed decreased dark aversion. The leaf and flower showed qualitatively similar compounds; but the flower was observed stronger antioxidant activities. Related to the animal behavior, LBP showed anxiolytic changes, in both conditions during physiologic and under stressing environment.
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