Rearranjos gênicos de PDGFB: utilidade de método de FISH no diagnóstico de Dermatofibrosarcoma protuberans
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Data
2020-12-10
Autores
Macarenco, Ricardo Silvestre E Silva [UNIFESP]
Orientadores
Stavale, Joao Norberto [UNIFESP]
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Dermatofibrosarcoma protuberans is a highly recurrent and locally destructive superficial sarcoma. It has fibrohistiocytic differentiation and genetic aberrations involving PDGFB and COL1A1 genes. The current study aims to determine sensitivity and specificity of fluorescent in situ hibridization to detect PDGFB aberrations in dermatofibrosarcoma protuberans, using classic cases as gold-standard and classic cases of its mimickers as well. Also, it aims to verify the application of this method as diagnostic adjunct in cases with ambiguous morphology or immunohistochemistry. Methods: retrospective review of cases diagnosed in the department of pathology of the Universidade Federal de São Paulo, between 2005 and 2018. Overall 31 samples from 30 patients with dermatofibrosarcoma protuberans and its variants, and 28 samples from other superficial spindle cell neoplasms were selected. Cases previously diagnosed as dermatofibrosarcoma protuberans but presenting ambiguous morphological or immunohistochemical features upon review were set apart and included in a third group (16 cases). A tissue micro-array paraffin block was built with 1.5 mm diameter punch material from each case. A break-apart PDGFB-specific and commercially available probe was used on 3.5 microns-thick sections obtained from the paraffin block. Signals were analyzed and counted in 100 nuclei per case by two independent observers under a fluorescence microscope with specific filters. Results: the protocol used on the classic cases obtained 93% sensitivity and 100% specificity. Fluorescent in situ hybridization was useful to rule-out dermatofibrosarcoma in 12 (75%) ambiguous cases and to confirm the diagnosis in 4 (25%) cases in this group, including two paque-like dermatofibrosarcomas and two subcutaneous cases which were encapsulated and did not present readly apparent honey-combing adipose tissue infiltration. The alternative diagnosis most often found in the ambiguous group was fibroushistiocytoma / dermatofibroma (cellular, atypical, and deep variants) (11 cases – 68%). Conclusion: fluorescent in situ hybridization with break-apart probe has high sensitivity and specificity for the detection of PDGFB gene aberrations in dermatofibrosarcoma protuberans and its variants. It proved to be a useful tool in the diagnostic evaluation of ambiguous cases in this series.
Dermatofibrossarcoma protuberans é sarcoma superficial com elevado potencial de recorrência e de destruição local. Apresenta diferenciação fibrohistiocítica e aberrações genéticas envolvendo os genes PDGFB e COL1A1. O presente estudo tem por objetivo validar (determinar a sensibilidade e especificidade) o uso de hibridização in situ fluorescente para detectar alterações de PDGFB em casos de dermatofibrossarcoma protuberans, utilizando como padrão-ouro casos clássicos da entidade e casos clássicos de entidades que a mimetizam. Também, verificar a utilidade do método como auxiliar diagnóstico em casos com características morfológicas ou imuno-histoquímicas duvidosas. Métodos: por meio de levantamento retrospectivo de casos diagnosticados no departamento de patologia da Universidade Federal de São Paulo entre os anos de 2005 e 2018, 31 amostras de 30 pacientes com dermatofibrossarcoma e variantes, bem como 28 amostras de neoplasias fusocelulares superficiais outras foram selecionadas. Casos de diagnóstico ambíguo foram separados em terceiro grupo (16 casos). Foi confeccionado bloco de tissue micro-array de onde se obtiveram cortes histológicos de 1,5 mm de diâmetro e 3,5 microns de espessura. Estes foram submetidos à reação com probe comercial de tipo break-apart PDGFB-específico. Contagens de sinais nucleares em 100 células de cada caso foram realizadas por dois observadores independentes ao microscópio de fluorescência com filtros apropriados. Resultados: hibridização in situ fluorescente apresentou sensibilidade de 93% e especificidade de 100% com o protocolo utilizado. No grupo de casos duvidosos, o método foi de utilidade para descartar dermatofibrossarcoma em 12 (75%) casos bem como para confirmar o diagnóstico em 4 (25%) casos (dois dermatofibrossarcomas em placa e dois casos subcutâneos que não apresentavam infiltração em favo de mel do tecido adiposo, mas pseudocápsula tumoral). Fibrohistiocitoma cutâneo/dermatofibroma em suas variantes celular, atípica e profunda foi o diagnóstico diferencial mais encontrado no grupo duvidoso (11 casos – 68%). Conclusões: hibridização in situ fluorescente com probe break-apart apresentou altas sensibilidade e especificidade para detecção de aberrações de PDGFB em dermatofibrossarcoma protuberans, bem como se mostrou útil para classificação de casos ambíguos nesta série.
Dermatofibrossarcoma protuberans é sarcoma superficial com elevado potencial de recorrência e de destruição local. Apresenta diferenciação fibrohistiocítica e aberrações genéticas envolvendo os genes PDGFB e COL1A1. O presente estudo tem por objetivo validar (determinar a sensibilidade e especificidade) o uso de hibridização in situ fluorescente para detectar alterações de PDGFB em casos de dermatofibrossarcoma protuberans, utilizando como padrão-ouro casos clássicos da entidade e casos clássicos de entidades que a mimetizam. Também, verificar a utilidade do método como auxiliar diagnóstico em casos com características morfológicas ou imuno-histoquímicas duvidosas. Métodos: por meio de levantamento retrospectivo de casos diagnosticados no departamento de patologia da Universidade Federal de São Paulo entre os anos de 2005 e 2018, 31 amostras de 30 pacientes com dermatofibrossarcoma e variantes, bem como 28 amostras de neoplasias fusocelulares superficiais outras foram selecionadas. Casos de diagnóstico ambíguo foram separados em terceiro grupo (16 casos). Foi confeccionado bloco de tissue micro-array de onde se obtiveram cortes histológicos de 1,5 mm de diâmetro e 3,5 microns de espessura. Estes foram submetidos à reação com probe comercial de tipo break-apart PDGFB-específico. Contagens de sinais nucleares em 100 células de cada caso foram realizadas por dois observadores independentes ao microscópio de fluorescência com filtros apropriados. Resultados: hibridização in situ fluorescente apresentou sensibilidade de 93% e especificidade de 100% com o protocolo utilizado. No grupo de casos duvidosos, o método foi de utilidade para descartar dermatofibrossarcoma em 12 (75%) casos bem como para confirmar o diagnóstico em 4 (25%) casos (dois dermatofibrossarcomas em placa e dois casos subcutâneos que não apresentavam infiltração em favo de mel do tecido adiposo, mas pseudocápsula tumoral). Fibrohistiocitoma cutâneo/dermatofibroma em suas variantes celular, atípica e profunda foi o diagnóstico diferencial mais encontrado no grupo duvidoso (11 casos – 68%). Conclusões: hibridização in situ fluorescente com probe break-apart apresentou altas sensibilidade e especificidade para detecção de aberrações de PDGFB em dermatofibrossarcoma protuberans, bem como se mostrou útil para classificação de casos ambíguos nesta série.