Novo esquema de imunoquimioterapia indutor de resposta imune protetora em modelo murino de leishmaniose cutânea causada pela Leishmania (leishmania) amazonensis

Abstract

The palladacycle complex DPPE 1.2 was previously shown to inhibit Leishmania (Leishmania) amazonensis infection in vitro and in vivo. The present study aimed to evaluate the effect of DPPE 1.2 associated with a recombinant cysteine proteinase from L. (L.) infantum chagasi, rLdccys1, and the adjuvant Propionibacterium acnes (triple association) on L. (L.) amazonensis infection in two mouse strains, BALB/c and C57BL/6. The treatment with this association potentiated the leishmanicidal effect of DPPE 1.2 resulting in a reduction of parasite load in both strains of mice which, although not statistically significant, was higher compared to that found in groups treated with either DPPE 1.2 alone or associated with P. acnes or rLdccys1. The reduction of parasite load in both mouse strains was followed by immunomodulation mediated by an increase of naive CD4+ and CD8+ T lymphocytes in some treated groups compared to that found in controls and this increase was significantly higher in animals treated with the triple association. A significant increase of memory CD4+ and CD8+ T lymphocytes was also demonstrated in animals treated with the triple association. High levels of IFN-g were detected in foot lesions of all treated groups compared to those found in controls and a significantly higher secretion of this cytokine was observed in groups treated with the triple association, while reduction of active TGF-β was observed in all treated animals compared to controls. No infection relapse was observed 1 month after the end of treatment in mice which received DPPE 1.2 associated with rLdccys1 or rLdccys1 plus P. acnes in comparison to that exhibited by animals treated with DPPE 1.2 alone. Evaluation of serum levels of AST, ALT, urea and creatinine showed no alterations among treated groups, indicating that this treatment schedule did not induce hepato or nephrotoxicity. These data indicate the potential use of this association as a therapeutic alternative for cutaneous leishmaniasis caused by L. (L.) amazonensis.

A atividade do complexo paladaciclo DPPE 1.2 foi previamente demonstrada sobre a infecção pela Leishmania (Leishmania) amazonensis in vitro e in vivo. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito do DPPE 1.2 associado a uma cisteína proteinase recombinante de L. (L.) infantum chagasi, rLdccys1, e ao adjuvante Propionibacterium acnes (tripla associação) na infecção pela L. (L.) amazonensis em duas linhagens de camundongos, BALB/c e C57BL/6. O tratamento com a tripla associação potencializou o efeito leishmanicida do DPPE 1.2 resultando na redução da carga parasitária em ambas as linhagens de camundongos que, embora não estatisticamente significante, foi maior que a encontrada nos grupos tratados apenas com o DPPE 1.2 ou com esse paladaciclo associado à P. acnes ou à rLdccys1. Nas duas linhagens de camundongos a redução da carga parasitária foi acompanhada por imunomodulação mediada por aumento do número de linfócitos TCD4+ e TCD8+ naive em alguns grupos tratados comparado ao dos controles, sendo esse aumento significantemente maior nos animais tratados com a tripla associação. Significante aumento de linfócitos TCD4+ e TCD8+ de memória foi também demonstrado nos camundongos tratados com a tripla associação. Níveis elevados de IFN-g nas lesões foram detectados em todos os grupos tratados comparados aos dos controles, sendo a secreção dessa citocina significantemente maior no grupo tratado com a tripla associação, enquanto que a secreção de TGF-β foi significantemente reduzida nas lesões dos grupos tratados comparada à dos controles. Não foi observada recaída da infecção um mês após o final do tratamento nos camundongos que receberam o DPPE 1.2 associado à rLdccys1 ou à rLdccys1 mais P. acnes em comparação com a apresentada pelos animais tratados apenas com o DPPE 1.2. Não houve alterações dos níveis séricos de AST, ALT, ureia e creatinina em nenhum dos grupos tratados comparados aos valores de referência dos animais normais, indicando que esse esquema de tratamento não induziu hepato ou nefrotoxicidade. A potencialização do efeito leishmanicida do DPPE 1.2 quando associado à rLdccys1 e P. acnes abriu perspectivas para explorar o potencial dessa associação como uma alternativa terapêutica para a leishmaniose cutânea causada pela L. (L.) amazonensis.