Avaliação seminal de ciclistas de baixo e alto rendimento

Abstract

Objetivo: Estudar o efeito da prática intensa do ciclismo no potencial fértil masculino. Método: O estudo transversal incluiu 72 amostras seminais provenientes do grupo Alto Rendimento (AR=32), do grupo Baixo Rendimento (BR=28) e do grupo Controle (C=12). Inicialmente os voluntários foram avaliados por um urologista e encaminhados para a coleta seminal. Uma alíquota do sêmen foi utilizada para avaliação do espermograma, outra foi centrifugada a 600xG por 30 minutos quando o plasma seminal foi separado e utilizado na análise proteômica por meio de quantificação e digestão proteica, análise por espectrometria de massas e busca das proteínas correspondentes aos espectros encontrados. Quanto ao pellet restante, foi ressuspendido e analisado de acordo com a função dos espermatozoides, como análise cinética por meio da motilidade espermática, integridade acrossômica, atividade mitocondrial, aferição do potencial de membrana mitocondrial, fragmentação de DNA e quantificação de ânions superóxidos nos espermatozoides. A análise estatística foi realizada no programa SPSS, iniciando com análise descritiva dos dados e aplicando um teste por Modelos Lineares Generalizados, adotando um α de 5%. Para análise proteômica foi realizado o teste Kruskal-Wallis com post hoc de Games Howell e a Análise Discriminante. Resultados: O grupo BR apresentou maiores valores de neutrófilos, cinética espermática (velocidade média de percurso e velocidade retilínea) e integridade de DNA espermático, quando comparado ao grupo AR. Por outro lado, o grupo AR apresentou maiores taxas de presença do ânion superóxido e fragmentação do DNA classe III, quando comparado ao grupo BR, assim como alta taxa de fragmentação classe IV quando comparado ao grupo C. Foram encontradas 14 proteínas diferencialmente expressas do total de 281 quantificadas, sendo 2 hiperexpressas no grupo AR e 4 no grupo BR. As demais proteínas estiveram hipoexpressas em relação ao grupo C. Conclusões: O ciclismo de Alto Rendimento está associado a um aumento dos níveis de fragmentação do DNA espermático e elevação da atividade oxidativa intracelular, enquanto o de Baixo Rendimento à alta expressão proteica de resposta ao processo imune e inflamatório, à via alterativa de energia e à proliferação celular.

Objective: Study the effect of intense cycling practice on male fertile potential. Method: The prospective study included 72 semen samples from the High Intensity group (HI=32), Low Intensity group (LI=28) and Control group (C=12). Initially, the volunteers were evaluated by a urologist and collect a seminal sample. An aliquot of semen was used for semen analysis, another was centrifuged at 600xG for 30 minutes, then the supernatant seminal plasma was used in proteomic analysis through protein quantification and digestion, mass spectrometry analysis and search for proteins corresponding to the spectrum found. The remaining pellet was resuspended and analyzed according to sperm function, such as kinetic analysis through sperm motility, acrosome integrity, mitochondrial activity, measurement of mitochondrial membrane potential, DNA fragmentation and quantification of superoxide anions in sperm. Statistical analysis was performed using the software SPSS 21.0, starting with a descriptive analysis of the data and applying a test by Generalized Linear Models, adopting an α of 5%. For proteomic analysis, the Kruskal-Wallis test with Games Howell post hoc and Discriminant Analysis were performed. Results: The LI group had higher rates of neutrophils, sperm kinetics such as; velocity average path, velocity on a straight line, and sperm DNA integrity, when compared to the HI group. On the other hand, the HI group presented higher rates of superoxide anion and class III DNA fragmentation, when compared to the LI group, as well as a high rate of class IV fragmentation when compared to the C group. Fourteen differentially expressed proteins were found from a total of 281 quantified, being 2 overexpressed in the HI group and 4 in the LI group. The remained proteins were underexpressed in relation to C group. Conclusions: High-performance cycling is associated with an increase in sperm DNA fragmentation levels and in intracellular oxidative activity, while low performance cycling is associated with high protein expression in response to immune and inflammatory processes, alternative energy pathway and cell proliferation.