Citogenotoxicidade e mutagenicidade da água do Sistema Estuarino de Santos-São Vicente

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Data
2019-11-25
Autores
Cardoso, Caroline Margonato [UNIFESP]
Orientadores
Ribeiro, Daniel Araki [UNIFESP]
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
The Santos-São Vicente Estuarine System (SESS) is one of the most degraded estuaries in Brazil. The disorderly urbanization of the Baixada Santista Metropolitan Region (RMBS) added with the inefficiency of regulatory mechanisms and basic sanitation, poverty, poor housing conditions, and environmental pollution make this region suitable for environmental monitoring studies. Thus, the aim of this study was to evaluate the water-induced cytogenotoxicity and mutagenicity of SSES collected at the points described as most contaminated (São Vicente and Piaçaguera Channels) using Wistar rats as an experimental model and Centropomus undecimalis fish. For this purpose, surface water was collected São Vicente Channel (SVC) and Piaçaguera Channel (PIC) of SESS and non-essential metals and metalloids (Cd, Pb, Hg and As) were quantified. Adult male Wistar rats were divided into four groups (n = 5) and exposed for 5 days: a) negative control received filtered water, b) saline control received saline water, c) experimental group received estuarine water from PIC and d) experimental group received estuarine water from SVC. Blood and liver were used for comet assay; bone marrow was used to perform the micronucleus test; histopathological, immunohistochemical analyzes (TNF-α, ki67 and 8-OHdG) and realtime PCR of caspase-3 were performed in the liver. The results revealed that rats exposed to water from SESS showed biological responses associated with genotoxicity, mutagenicity and cytotoxicity. Juvenile fish (n = 6) from C. undecimalis were collected from the SVC and compared to fish (n = 10) obtained from a pisciculture laboratory (control group). Micronucleus tests and nuclear abnormalities were performed with blood, and quantification of lipid peroxidation and DNA damage were performed with gills and livers of fish. Erythrocyte nuclear abnormalities in blood and lipid peroxidation in gills were higher in fish from SESS. In conclusion, SESS is capable of both mutagenic and cytotoxic activities in murine and fish, both having similar responses to environmental contaminants.
O Sistema Estuarino de Santos-São Vicente (SESS) é um dos estuários mais degradados do Brasil. A urbanização desordenada da Região Metropolitana da Baixada Santista (RMBS) somada à ineficiência dos mecanismos regulatórios, pobreza, condições precárias de moradia, saneamento básico, coleta de lixo e poluição ambiental tornam essa região apropriada para estudos de monitoramento ambiental. Assim, o objetivo deste estudo foi avaliar a citogenotoxicidade e mutagenicidade induzidas pela água do SESS coletadas nos pontos descritos como mais contaminados (Canal de São Vicente e Canal de Piaçaguera) utilizando ratos Wistar como modelo experimental e peixes Centropomus undecimalis. Para tanto, foram coletadas águas superficiais do Canal de São Vicente (CSV) e do Canal de Piaçaguera (CPIA) do SESS, e quantificados metais e metaloides não essenciais (Cd, Pb, Hg e As). Para isso, ratos machos adultos Wistar foram distribuídos em quatro grupos (n = 5) e foram expostos durante 5 dias: a) controle negativo que recebeu água filtrada, b) controle salino que recebeu água salina, c) grupo experimental que recebeu água estuarina do CPIA e d) grupo experimental que recebeu água estuarina do CSV. O sangue e o fígado foram utilizados para realização de ensaio cometa; a medula óssea para realização do teste do micronúcleo; análises histopatológicas, imunoistoquímica (TNF-α, ki67 e 8-OHdG) e PCR em tempo real da caspase-3 foram realizados em fígados. Os resultados revelaram que os ratos expostos à água do SESS apresentaram respostas biológicas associadas à genotoxicidade, mutagenicidade e citotoxicidade. Nos testes in situ, peixes juvenis (n=6) de C. undecimalis foram coletados no CSV e comparados aos peixes (n=10) adquiridos de um laboratório de Piscicultura (grupo controle). Testes de micronúcleo e anormalidades nucleares foram realizados com sangue, e a quantificação de peroxidação lipídica e dos danos ao DNA foram realizados nas brânquias e nos fígados dos peixes. Foi observado o aumento de anormalidades nucleares eritrocitárias e peroxidação lipídica das brânquias nos peixes coletados no SESS. Em suma, o SESS é capaz de exercer atividades tanto de natureza mutagênica quanto citotóxica em murinos e em peixes, ambos tendo respostas similares frente aos contaminantes ambientais.
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