Avaliação morfológica e molecular dos músculos masseter e temporal de ratos Wistar submetidos à privação do sono paradoxal

Avaliação morfológica e molecular dos músculos masseter e temporal de ratos Wistar submetidos à privação do sono paradoxal

Author Yujra, Veronica Quispe Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Ribeiro, Daniel Araki Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Patologia
Abstract This study will be presented in four Chapters. The first reviews the role of healthy sleep in cellular and tissue homeostasis, as well as clinical and experimental studies that showed possible mechanisms responsible for muscle atrophy as result from sleep deprivation. This process is few studied in Dentistry, an area in which sleep deprivation has not clarified the role of inflammation and/or degeneration of the masticatory muscles, in addition to having a direct relationship with dysfunctions in the stomatognathic system. Objective: Evaluate the influence of paradoxical sleep deprivation and rebound sleep on masseter and temporal muscles of Wistar rats. Methodology: Three experimental groups were used: Control = CTL, 96-hour sleep deprived group (SD) and Rebound (SD + R) group submitted to SD + 96-hour rebound sleep protocol. After euthanasia, masseter and temporal muscles were analyzed in the following aspects: morphological (HE, cross-sectional area, myofiber density); inflammatory (Western Blotting for Toll Like pathway, real-time PCR for TNF, COX-2, iNOS and immunohistochemistry for TNF); atrophic by the expression of MuRF and MAFbx; by MyOD and, myogenin immunoexpression and finally by synthesis pathway activation of the Akt / p70S6 and autophagic degradation for LC3 / P62 by the Western Blotting assay. Results: These are described in Chapters II and III. In Article A, we show that under the sleep deprivation masseter muscle expressed less histomorphometric changes and inhibited the Toll-like inflammatory pathway. The temporal muscle had higher signs of inflammation and also showed overexpression of the MAFbx atrophic gene (p <0.05). In article B, we noted that in SD groups, both muscles showed TNF hyperexpression (p<0.05), with modulation in SD + R, the same occurred in the myogenic activity of MyoD and Myogenin. Finally the analysis of protein turn-over indicated that Akt protein was decreased only in temporal (p <0.05) while LC3 degradation protein increased for both muscles after SD. Conclusion: In Chapter IV, grouped the general conclusions, the sleep deprivation induced changes in the masseter and temporal muscles of rats. The findings showed greater responsiveness of the temporal muscle in the activation of inflammatory and atrophic pathways, as well as inhibition of the main routes of synthesis, this evidenced of less adaptive capacity than the masseter and suggested greater relevance in the study of the effects of experimental sleep deprivation.

Este estudo será apresentado na forma de quatro capítulos. O primeiro revisa o papel do sono saudável na homeostase celular e tecidual, além de estudos clínicos e experimentais que demonstram possíveis mecanismos responsáveis pela atrofia muscular resultantes da privação de sono. Esse processo é pouco estudado na Odontologia, área em que a privação de sono não tem esclarecido o papel da inflamação e/ou degeneração dos músculos mastigatórios além de possuir relação direta com disfunções no sistema estomatognático. Objetivo: Avaliar a influência da privação de sono paradoxal e do sono rebote nos músculos masseter e temporal de ratos Wistar. Metodologia: Foram utilizados 3 grupos experimentais: Controle = CTL, grupo privado de sono (SD) por 96h pelo método multi-plataformas e grupo Rebote (SD+R) submetido ao protocolo SD + 96 horas de sono rebote. Após eutanásia, o masseter e o temporal foram analisados nos âmbitos: morfológicos (HE, área de corte transversal, densidade de miofibras); inflamatórios (Western Blotting para a via Toll-Like, PCR em tempo real para TNF-, COX-2, iNOS e imunoistoquímica para TNF-); atróficos pela expressão gênica de MuRF e MAFbx; miogênicos pela imunoexpressão de MyOD e Miogenina e finalmente pela ativação das vias de síntese Akt/p70S6 e degradação autofágica LC3/P62 pelo método de Western Blotting. Resultados: Estão descritos nos Capítulo II e III no formato de dois artigos. No Artigo A, foi demonstrado que sob privação, o Masseter sofreu menores alterações histomorfométricas tendo inclusive uma inibição da via inflamatória Toll-like. O músculo temporal teve maiores sinais de inflamação e também apresentou hiper-expressão do gene atrófico MAFbx (p<0,05). No artigo B, notase que nos grupos SD, ambos músculos apresentaram hiper-expressão de TNF- (p<0,05), com modulação nos SD+R, o mesmo ocorreu na atividade miogênica de MyoD e Miogenia. A análise final do turn-over proteico indicou que a proteína Akt estava diminuída apenas no Temporal (p<0,05) enquanto a proteína de degradação LC3 aumentou para ambos músculos, após SD. Conclusão: No Capitulo IV, agrupamos as conclusões gerais, a privação de sono induziu alterações nos músculos masseter e temporal de ratos. Os achados indicam maior responsividade do músculo temporal na ativação das vias inflamatórias e atróficas, bem como na inibição de uma das principais vias de síntese, evidenciando menor capacidade adaptativa que o masseter e sugerindo maior relevância no estudo dos efeitos da privação de sono experimental.
Keywords Sleep Deprivation
Rats
Masseter
Temporal
Muscle Atrophy
Privação De Sono
Ratos
Masseter
Temporal
Atrofia
Language Portuguese
Date 2019-11-28
Research area Modelos Experimentais De Doenças Agudas, Crônicas E Degenerativas
Knowledge area Patologia Experimental E Ambiental
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 131 p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=8474540
Access rights Closed access
Type Thesis
URI https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/59528

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