Efeito da heparinização sistêmica em fígado e rim de suínos submetidos a choque hipovolêmico, clampeamento aórtico e reperfusão
Nenhuma Miniatura disponível
Data
2019-11-28
Autores
Silva, Seleno Glauber De Jesus [UNIFESP]
Orientadores
Fagundes, Djalma Jose [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Objectives: To develop a model of hemorrhagic shock (HS), aortic clamping (AC) and ischemia-reperfusion (IR) in pigs, and to study functional, morphological and immunohistochemical (IHC) effects in the liver and kidneys of these animals when submitted to systemic heparinization. Methods: Twenty-one swines (Sus scrofa, Large White breed) were distributed into three groups: CC (n = 8), underwent general anesthesia, invasive monitoring, laparotomy and supraceliac aortic isolation, HS for 30 min, AC for 1 h and visceral reperfusion for 3 h; CCH (n = 8), submitted to the same procedures plus to systemic heparinization with 200 IU/kg in bolus, with activated clotting time maintained > 200 s during AC; and Simulated (n = 5), submitted only to surgical manipulation, without HS or AC. Vital signs and blood samples for biochemical study were collected at various stages of the experiment. Euthanasia occurred at the end of the reperfusion period, when liver and kidney fragments were withdrawn and processed for hematoxylin-eosin and IHC staining by caspase-3 and submitted to semi-quantitative analysis. Results: the proposed IR model caused a severe cardiocirculatory disturbance, observed by increased carotid-femoral pressure gradients (p <0.001) and lactate (p = 0.001) and decreased serum pH (p = 0.013) in the CC and CCH groups in relation to the Simulated. An increase in the alanine aminotransferase of CC and CCH groups was observed in relation to the Simulated (p = 0.009) at the end of the experiment, but there was no significant change in the values of aspartate aminotransferase, urea or creatinine. The mean values of the histological lesion score did not show significant differences among Simulated, CC and CCH Groups, for both liver (0.8, 1.0 and 3.3 points, respectively; p = 0.23) and for kidneys (1.4, 2.9 and 3.1; p = 0.41). However, caspase-3 score decreased in CCH related to CC in both samples of liver (119.6 ± 6.67 vs 187.5 ± 4.12; p < 0.0001) and the kidneys (117.4 ± 6.10 vs 163.5 ± 9.92; p < 0.0001). Conclusions: The proposed HS, AC and IR model was effective in producing a severe cardiocirculatory disturbance. Although no significant physiological or histological changes were observed in liver and kidney, attenuation of cellular apoptosis was observed in the animals submitted to systemic heparinization.
Objetivos: desenvolver modelo de choque hemorrágico (CH), clampeamento aórtico (CA) e isquemia-reperfusão (IR) em suínos, e estudar os efeitos funcionais, morfológicos e imunoistoquímicos (IIQ) no fígado e rim destes animais quando submetidos à heparinização sistêmica. Métodos: Vinte e um suínos (Sus scrofa, linhagem Large White) foram distribuídos em três grupos: CC (n = 8), submetidos a anestesia geral, monitorização invasiva, laparotomia e isolamento aórtico supracelíaco, CH por 30 min, CA por 1 h e reperfusão visceral por 3 h; CCH (n = 8), submetidos aos mesmos procedimentos e à heparinização sistêmica com 200 UI/kg in bolus, sendo mantido tempo de coagulação ativado > 200 s durante o CA; e Simulado (n = 5), submetidos somente à manipulação cirúrgica, sem CH ou CA. Sinais vitais e amostras de sangue para estudo bioquímico foram coletados em várias etapas do experimento. A eutanásia ocorreu ao término do período de reperfusão, quando fragmentos de fígado e rins foram retirados e processados para coloração de hematoxilina e eosina e IIQ pela caspase-3 por meio de análise semi-quantitativa. Resultados: o modelo de IR proposto gerou um distúrbio cardiocirculatório grave, observado pelo aumento dos gradientes pressóricos carotídeo e femoral (p < 0,001) e lactato (p = 0,001) e diminuição do pH sérico (p = 0,013) nos grupos CC e CCH em relação ao Simulado. Foi observado aumento na aspartato aminotransferase dos grupos CC e CCH em relação ao Simulado (p = 0,009) ao final do experimento, porém sem alteração considerável dos valores de alanina aminotransferase, da ureia ou creatinina. Os valores médios do escore de lesão histológica não apresentaram diferenças significativas entre os Grupos Simulado, CC e CCH, tanto para fígado (0,8; 1,0 e 3,3 pontos, respectivamente; p = 0,23) quanto para rins (1,4; 2,9 e 3,1; p = 0,41). Entretanto, a imunoexpressão da caspase-3 (em unidades arbitrárias) apresentaram diminuição no Grupo CCH em relação ao CC tanto no fígado (119,6 ± 6,67 vs 187,5 ± 4,12; p < 0,0001) quanto no rim (117,4 ± 6,10 vs 163,5 ± 9,92; p < 0,0001). Conclusões: o modelo de CH, CA e IR proposto foi eficaz na produção de distúrbio cardiocirculatório grave. Apesar de não ter sido observada alteração fisiológica ou histológica significativa no fígado ou rins dos animais estudados, foi observada atenuação da apoptose celular nos animais submetidos à heparinização sistêmica.
Objetivos: desenvolver modelo de choque hemorrágico (CH), clampeamento aórtico (CA) e isquemia-reperfusão (IR) em suínos, e estudar os efeitos funcionais, morfológicos e imunoistoquímicos (IIQ) no fígado e rim destes animais quando submetidos à heparinização sistêmica. Métodos: Vinte e um suínos (Sus scrofa, linhagem Large White) foram distribuídos em três grupos: CC (n = 8), submetidos a anestesia geral, monitorização invasiva, laparotomia e isolamento aórtico supracelíaco, CH por 30 min, CA por 1 h e reperfusão visceral por 3 h; CCH (n = 8), submetidos aos mesmos procedimentos e à heparinização sistêmica com 200 UI/kg in bolus, sendo mantido tempo de coagulação ativado > 200 s durante o CA; e Simulado (n = 5), submetidos somente à manipulação cirúrgica, sem CH ou CA. Sinais vitais e amostras de sangue para estudo bioquímico foram coletados em várias etapas do experimento. A eutanásia ocorreu ao término do período de reperfusão, quando fragmentos de fígado e rins foram retirados e processados para coloração de hematoxilina e eosina e IIQ pela caspase-3 por meio de análise semi-quantitativa. Resultados: o modelo de IR proposto gerou um distúrbio cardiocirculatório grave, observado pelo aumento dos gradientes pressóricos carotídeo e femoral (p < 0,001) e lactato (p = 0,001) e diminuição do pH sérico (p = 0,013) nos grupos CC e CCH em relação ao Simulado. Foi observado aumento na aspartato aminotransferase dos grupos CC e CCH em relação ao Simulado (p = 0,009) ao final do experimento, porém sem alteração considerável dos valores de alanina aminotransferase, da ureia ou creatinina. Os valores médios do escore de lesão histológica não apresentaram diferenças significativas entre os Grupos Simulado, CC e CCH, tanto para fígado (0,8; 1,0 e 3,3 pontos, respectivamente; p = 0,23) quanto para rins (1,4; 2,9 e 3,1; p = 0,41). Entretanto, a imunoexpressão da caspase-3 (em unidades arbitrárias) apresentaram diminuição no Grupo CCH em relação ao CC tanto no fígado (119,6 ± 6,67 vs 187,5 ± 4,12; p < 0,0001) quanto no rim (117,4 ± 6,10 vs 163,5 ± 9,92; p < 0,0001). Conclusões: o modelo de CH, CA e IR proposto foi eficaz na produção de distúrbio cardiocirculatório grave. Apesar de não ter sido observada alteração fisiológica ou histológica significativa no fígado ou rins dos animais estudados, foi observada atenuação da apoptose celular nos animais submetidos à heparinização sistêmica.