Análise Dos Efeitos Da Vitamina D3 Em Modelo Experimental De Aterosclerose Induzida Por Dieta
Data
2017-10-20
Autores
Carvalho, Juliana Goncalves 
Orientadores
Ihara, Silvia Saiuli Miki
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Objective: Low levels of vitamin D increase the risk of cardiovascular disease. The objective of this study is to verify the effects of vitamin D in an experimental model of rabbits fed a diet rich in lard / sucrose / cholesterol (BSC). Methodology: Rabbits (n = 20) were fed standard chow supplemented with 10% lard, 40% Sucrose and 0.5% Cholesterol (BSC) for 12 weeks. After this period, the animals were divided into 4 groups. The GI and GII groups received a BSC diet with 0.1% cholesterol and the animals of the GIII and GIV Groups received standard chow until the 24th week. Animals of the GII and GIII groups received vitamin D 1000UI daily orally. During the periods of 0, 12 and 24 weeks, the following parameters were evaluated: weight, lipid profile, glucose, insulin, SOD and CAT. After the 24th week the animals were euthanized, we removed the aorta to the iliac bifurcation for analysis of the atheroma plaques by macroscopic planimetry and histopathological and histomorphometric analysis of histological slides of aorta fragments stained by HE and calcium deposition by Von Kossa staining. We performed histopathological analysis on liver, kidney and pancreatic tissues. In the liver, we evaluated the degree of fibrosis by Picro Sirius staining. We analyzed the expression by immunohistochemical reaction of ICAM-1, MCP-1 and e-NOS in the kidney, pancreas and aorta, and insulin in the pancreas. The variables were analyzed by Kruskal-Wallis non-parametric tests followed by the Dunn test and Fischer's exact test for the categorical variables. Statistical significance was set at p <0.05. Results: The analysis of the serum parameters of total cholesterol, TG, HDL-c, glucose and insulin showed a significant difference only in TG and VLDL-c levels. There was no significant difference between the analyzed groups in relation to the percentage of aorta affected with plaque. There was a relationship between I / M and calcium deposition in the aortas in the arch, thoracic and abdominal portions, but without significant difference between the analyzed groups. The activity of the oxidative enzymes SOD and CAT also did not present significant difference between the groups. Histopathological analysis of the liver evidenced hepatic steatosis, balloonization, inflammatory infiltrate and areas of fibrosis forming interlobular septa. Kidney analysis revealed cell vacuolization, calcification and xanthomatous macrophages deposition at the medullary cortical junction. In the analysis of the pancreas, we did not observe any histopathological alteration. Immunohistochemical analyzes for anti-ICAM-1, anti-MCP-1, anti-e-NOS antibodies in the aorta, kidney and pancreatic tissues, as well as the anti-Insulin antibody in the pancreas showed no significant relationship between the groups. Conclusion: Due to the limiting factor of our study, which was the small number of animals analyzed, it was not possible to determine if Vitamin D3 was able to modulate the inflammatory process, as well as the activity of the oxidative enzymes and the immunoexpression of ICAM-1, MCP -1, e-NOS and Insulin.
Objetivo: Baixas concentrações de vitamina D aumentam o risco de doenças cardiovasculares. O objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da vitamina D em um modelo experimental de coelhos alimentados com uma dieta enriquecida com banha/sacarose/colesterol (BSC). Metodologia: Coelhos (n= 20) foram alimentados com ração padrão enriquecida com banha 10%, Sacarose 40% e Colesterol 0,5% (BSC), por 12 semanas. Após esse período, os animais foram distribuídos em 4 grupos. Os grupos GI e GII receberam uma dieta BSC com colesterol a 0,1% e os animais dos Grupos GIII e GIV receberam ração padrão, até a 24ª semana. Os animais dos grupos GII e GIII continuaram a receber ração padrão até o final do experimento e vitamina D 1000UI diariamente por via oral. Nos períodos de 0, 12 e 24 semanas, os seguintes parâmetros foram avaliados: peso, perfil lipídico, glicose, insulina, SOD e CAT. Após a 24ª semana os animais foram eutanasiados, retiramos a aorta até a bifurcação ilíaca para análise das placas de ateroma por planimetria macroscópica e análise histopatológica e histomorfométrica de lâminas histológicas de fragmentos de aorta coradas por HE e deposição de cálcio pela coloração de Von Kossa. Realizamos análise histopatológica nos tecidos de fígado, rim e pâncreas. No fígado, avaliamos o grau de fibrose pela coloração de Picro Sirius. Analisamos a expressão, por reação de imuno-histoquímica, de ICAM-1, MCP-1 e e-Nos no rim, pâncreas e aorta, e insulina no pâncreas. As variáveis foram analisadas por testes não-paramétricos de Kruskal-Wallis seguido do teste de Dunn e o teste exato de Fischer para as variáveis categóricas. Consideramos como significância estatística o valor de p< 0,05. Resultados: A análise dos parâmetros séricos de colesterol total, TG, HDL-c, glicose e insulina evidenciou diferença significativa apenas nos níveis de TG e VLDL-c. Não houve diferença significativa entre os grupos analisados com relação à porcentagem de aorta acometida com placa. Há relação entre a I/M e deposição de cálcio nas aortas nas porções do arco, torácica e abdominal, mas sem diferença significativa entre os grupos analisados. A atividade das enzimas oxidativas SOD e CAT também não apresentaram diferença significante entre os grupos. A análise histopatológica do fígado evidenciou esteatose hepática, balonização, infiltrado inflamatório e áreas de fibrose formando septos interlobulares. A análise dos rins evidenciou vacuolização das células, calcificação e deposição de macrófagos xantomizados na junção córtico medular. Na análise do pâncreas, não observamos nenhuma alteração histopatológica. As análises de imuno-histoquímica para os anticorpos anti-ICAM-1, anti-MCP-1, anti-e-NOS nos tecidos de aorta, rim e pâncreas, assim como o anticorpo anti-Insulina no pâncreas não evidenciou nenhuma relação significante entre os grupos. Conclusão: Devido ao fator limitante do nosso estudo que foi o pequeno número de animais analisados, não foi possível determinar se a Vitamina D3 foi capaz de modular o processo inflamatório, bem como a atividade das enzimas oxidativas e a imunoexpressão de ICAM-1, MCP-1, eNOS e Insulina.
Objetivo: Baixas concentrações de vitamina D aumentam o risco de doenças cardiovasculares. O objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da vitamina D em um modelo experimental de coelhos alimentados com uma dieta enriquecida com banha/sacarose/colesterol (BSC). Metodologia: Coelhos (n= 20) foram alimentados com ração padrão enriquecida com banha 10%, Sacarose 40% e Colesterol 0,5% (BSC), por 12 semanas. Após esse período, os animais foram distribuídos em 4 grupos. Os grupos GI e GII receberam uma dieta BSC com colesterol a 0,1% e os animais dos Grupos GIII e GIV receberam ração padrão, até a 24ª semana. Os animais dos grupos GII e GIII continuaram a receber ração padrão até o final do experimento e vitamina D 1000UI diariamente por via oral. Nos períodos de 0, 12 e 24 semanas, os seguintes parâmetros foram avaliados: peso, perfil lipídico, glicose, insulina, SOD e CAT. Após a 24ª semana os animais foram eutanasiados, retiramos a aorta até a bifurcação ilíaca para análise das placas de ateroma por planimetria macroscópica e análise histopatológica e histomorfométrica de lâminas histológicas de fragmentos de aorta coradas por HE e deposição de cálcio pela coloração de Von Kossa. Realizamos análise histopatológica nos tecidos de fígado, rim e pâncreas. No fígado, avaliamos o grau de fibrose pela coloração de Picro Sirius. Analisamos a expressão, por reação de imuno-histoquímica, de ICAM-1, MCP-1 e e-Nos no rim, pâncreas e aorta, e insulina no pâncreas. As variáveis foram analisadas por testes não-paramétricos de Kruskal-Wallis seguido do teste de Dunn e o teste exato de Fischer para as variáveis categóricas. Consideramos como significância estatística o valor de p< 0,05. Resultados: A análise dos parâmetros séricos de colesterol total, TG, HDL-c, glicose e insulina evidenciou diferença significativa apenas nos níveis de TG e VLDL-c. Não houve diferença significativa entre os grupos analisados com relação à porcentagem de aorta acometida com placa. Há relação entre a I/M e deposição de cálcio nas aortas nas porções do arco, torácica e abdominal, mas sem diferença significativa entre os grupos analisados. A atividade das enzimas oxidativas SOD e CAT também não apresentaram diferença significante entre os grupos. A análise histopatológica do fígado evidenciou esteatose hepática, balonização, infiltrado inflamatório e áreas de fibrose formando septos interlobulares. A análise dos rins evidenciou vacuolização das células, calcificação e deposição de macrófagos xantomizados na junção córtico medular. Na análise do pâncreas, não observamos nenhuma alteração histopatológica. As análises de imuno-histoquímica para os anticorpos anti-ICAM-1, anti-MCP-1, anti-e-NOS nos tecidos de aorta, rim e pâncreas, assim como o anticorpo anti-Insulina no pâncreas não evidenciou nenhuma relação significante entre os grupos. Conclusão: Devido ao fator limitante do nosso estudo que foi o pequeno número de animais analisados, não foi possível determinar se a Vitamina D3 foi capaz de modular o processo inflamatório, bem como a atividade das enzimas oxidativas e a imunoexpressão de ICAM-1, MCP-1, eNOS e Insulina.