Azt Na Atividade Da Telomerase, Expressão De P53 E Apoptose Em Melanoma Metastático
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Data
2017-11-30
Autores
Souza Sobrinho, Celestino Prospero De [UNIFESP]
Orientadores
Ferreira, Lydia Masako [UNIFESP]
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
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Resumo
Introdução: O melanoma é uma neoplasia cutânea melanocítica que possui caráter agressivo e rápida expansão. Vários fatores contribuem para o seu surgimento, como a predisposição genética, exposição solar, traumatismos físicos em nevos já existentes e imunodeficiências. Tanto em melanoma como em outras neoplasias, evidências demonstram que o processo de transformação maligna envolve várias alterações genéticas, que modificam processos celulares importantes, incluindo proliferação, diferenciação e morte programada da célula, processos estes também associados ao encurtamento dos telômeros. A enzima responsável pela síntese do telômero é conhecida como telomerase, uma transcriptase reversa especializada que pode ser associada com imortalização celular e câncer, sua atividade está ausente na maioria das células somáticas humanas normais e presentes em quase todas as linhagens de células tronco, imortais, germinativas e em aproximadamente 90% dos tumores humanos. A capacidade finita de replicações celulares é ultrapassada por células imortalizadas, que reativam a telomerase, sugerindo que a progressão de doenças malignas depende de sua reativação, e que um agente inibidor dessa enzima como a zidovudina (AZT) poderia ser uma droga antitumoral efetiva. Objetivo: Avaliar o AZT na atividade da telomerase, expressão de P53 e apoptose em melanoma. Métodos: Foram utilizadas células de pacientes 16 provenientes de amostras de tecidos da região torácica, plantar, linfonodos axilares, linfonodos inguinais doadas em centro cirúrgico do hospital São Paulo e linhagens de células de melanoma Hs839T.As células foram cultivadas em meio de cultura suplementadas com 1000 μM de AZT em triplicata por 5h e 24h e comparados seus efeitos ao grupo controle. A avaliação da proliferação celular foi realizada pela técnica do MTT. A caracterização das células, marcação para P53, apoptose, detecção da telomerase (expressão proteica) foi realizada por citometria de fluxo e amplificação gênica da telomerase por PCR RT. Resultados: A ação do AZT diminuiu a expressão gênica da telomerase nas células estudadas com diferença estatisticamente significante. A ação do AZT não diminuiu a síntese proteica da telomerase nas células estudadas. Conclusão: Houve diminuição da expressão gênica da telomerase e não houve diminuição da síntese proteica da telomerase nas células estudas.
Introdução: O melanoma é uma neoplasia cutânea melanocítica que possui caráter agressivo e rápida expansão. Vários fatores contribuem para o seu surgimento, como a predisposição genética, exposição solar, traumatismos físicos em nevos já existentes e imunodeficiências. Tanto em melanoma como em outras neoplasias, evidências demonstram que o processo de transformação maligna envolve várias alterações genéticas, que modificam processos celulares importantes, incluindo proliferação, diferenciação e morte programada da célula, processos estes também associados ao encurtamento dos telômeros. A enzima responsável pela síntese do telômero é conhecida como telomerase, uma transcriptase reversa especializada que pode ser associada com imortalização celular e câncer, sua atividade está ausente na maioria das células somáticas humanas normais e presentes em quase todas as linhagens de células tronco, imortais, germinativas e em aproximadamente 90% dos tumores humanos. A capacidade finita de replicações celulares é ultrapassada por células imortalizadas, que reativam a telomerase, sugerindo que a progressão de doenças malignas depende de sua reativação, e que um agente inibidor dessa enzima como a zidovudina (AZT) poderia ser uma droga antitumoral efetiva. Objetivo: Avaliar o AZT na atividade da telomerase, expressão de P53 e apoptose em melanoma. Métodos: Foram utilizadas células de pacientes 16 provenientes de amostras de tecidos da região torácica, plantar, linfonodos axilares, linfonodos inguinais doadas em centro cirúrgico do hospital São Paulo e linhagens de células de melanoma Hs839T.As células foram cultivadas em meio de cultura suplementadas com 1000 μM de AZT em triplicata por 5h e 24h e comparados seus efeitos ao grupo controle. A avaliação da proliferação celular foi realizada pela técnica do MTT. A caracterização das células, marcação para P53, apoptose, detecção da telomerase (expressão proteica) foi realizada por citometria de fluxo e amplificação gênica da telomerase por PCR RT. Resultados: A ação do AZT diminuiu a expressão gênica da telomerase nas células estudadas com diferença estatisticamente significante. A ação do AZT não diminuiu a síntese proteica da telomerase nas células estudadas. Conclusão: Houve diminuição da expressão gênica da telomerase e não houve diminuição da síntese proteica da telomerase nas células estudas.
Introdução: O melanoma é uma neoplasia cutânea melanocítica que possui caráter agressivo e rápida expansão. Vários fatores contribuem para o seu surgimento, como a predisposição genética, exposição solar, traumatismos físicos em nevos já existentes e imunodeficiências. Tanto em melanoma como em outras neoplasias, evidências demonstram que o processo de transformação maligna envolve várias alterações genéticas, que modificam processos celulares importantes, incluindo proliferação, diferenciação e morte programada da célula, processos estes também associados ao encurtamento dos telômeros. A enzima responsável pela síntese do telômero é conhecida como telomerase, uma transcriptase reversa especializada que pode ser associada com imortalização celular e câncer, sua atividade está ausente na maioria das células somáticas humanas normais e presentes em quase todas as linhagens de células tronco, imortais, germinativas e em aproximadamente 90% dos tumores humanos. A capacidade finita de replicações celulares é ultrapassada por células imortalizadas, que reativam a telomerase, sugerindo que a progressão de doenças malignas depende de sua reativação, e que um agente inibidor dessa enzima como a zidovudina (AZT) poderia ser uma droga antitumoral efetiva. Objetivo: Avaliar o AZT na atividade da telomerase, expressão de P53 e apoptose em melanoma. Métodos: Foram utilizadas células de pacientes 16 provenientes de amostras de tecidos da região torácica, plantar, linfonodos axilares, linfonodos inguinais doadas em centro cirúrgico do hospital São Paulo e linhagens de células de melanoma Hs839T.As células foram cultivadas em meio de cultura suplementadas com 1000 μM de AZT em triplicata por 5h e 24h e comparados seus efeitos ao grupo controle. A avaliação da proliferação celular foi realizada pela técnica do MTT. A caracterização das células, marcação para P53, apoptose, detecção da telomerase (expressão proteica) foi realizada por citometria de fluxo e amplificação gênica da telomerase por PCR RT. Resultados: A ação do AZT diminuiu a expressão gênica da telomerase nas células estudadas com diferença estatisticamente significante. A ação do AZT não diminuiu a síntese proteica da telomerase nas células estudadas. Conclusão: Houve diminuição da expressão gênica da telomerase e não houve diminuição da síntese proteica da telomerase nas células estudas.