Relação estrutura-atividade de análogos cíclicos da angiotensina ii
Data
2014-12-17
Autores
Alves, Flavio Lopes 
Orientadores
Miranda, Antonio de Miranda
Tipo
Tese de doutorado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
AngiotensinII(AII) is the majoractive hormoneof therenin-angiotensin-aldosterone (RAAS) system.The molecule plays an important vasoconstrictorroleand actsin the establishmentof hypertension. In one attempt to understand thebioactive conformationof this flexiblepeptideand betterunderstand its structural requirementsneeded for itsactivity, we synthesized andtested a novelseriesof cyclicanalogues ofAII. With thisseriesof compounds, we would like to explore the effectsof conformationalconstraints, vialactambridge,located along thepeptide chaininthe vasoconstriction effect,binding into thecellular receptorand release ofcalcium.The peptideswere synthesized bythe solid phasemethodology employing the t-Boc strategy. Afterthe synthesis were completed, the compounds were cleaved and purified byhigh performanceliquid chromatographyandwere characterized byliquid chromatography attache to mass spectrometry. Conformationalstudiesby Circular Dichroismin media containingTFEand SDSbyand molecular dynamics simulationwere also carried out. Fromourresultswe can conclude thatthe best overallperformance wasobservedwith theCyclo (3-5)[Sar1, Asp3, Lys5]-AII(19) analogues, suggesting thatAsp/Lys was the best combinationof amino acid residues of the lactambridge [i(i +2)], located in the center of the molecule. The insertionof amino acids seems to be better than the incorporation of new residues.The cyclicanalogues, cyclo (0-1A)[Glu0, endo-(Lys1a)]-AII(5)and cyclo(0-1A)[Asp0, endo-(Orn1a)]-AII(6) also showed good results. That suggested that theamino acidresidue pairsGlu/Lys, andAsp/Orn,participantsof the lactambridgetype i(i +2) were moreappropriate. The size of thelactam ringwith 15 or13atomswere also welltolerated whenincorporated in theN-terminal portionof the molecule.Among the linearanalogues,[Asp0, endo-(Lys1a)]-AII(3) was the more active,suggestingthat incorporation ofresiduesfrom Asp/Lys atthe N-terminus was well acceptedand recognized by theAIIreceptor. There was no clearcorrelation between thebiologicaland conformational studiesperformed by Circular Dichroismandmolecular dynamics simulationresults.From our results, a new series of compounds could be explored in order to continue to understand the bioactive conformation of AII.
A angiotensina II (AII) é o principal hormônio ativo do sistema renina-angiotensina-aldosterona (SRAA). A molécula é um dos principais compostos com função vasoconstritora e que atuano estabelecimento da hipertensão. Na tentativa de desvendar a conformação bioativadeste peptídeo flexível e entender melhor os requisitos necessários para a sua atividade, sintetizamos e testamos uma nova série de análogos cíclicos da AII. Com esta serie pretendíamos estudar os efeitos de restrições conformacionais, via ponte de lactama, localizadas ao longo da cadeia peptídica nas atividades de vasoconstrição, ligação com o receptor celular e liberação de cálcio. Os peptídeos foram sintetizados pela metodologia da síntese de peptídeos em fase solida empregando-se a estratégia t-Boc. Após as sínteses, os compostos foram purificados por cromatografia liquida de alta eficiência e foram caracterizados por cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas. Estudos conformacionais por Dicroísmo Circular em meios contendo TFE e SDS e por simulação de dinâmica molecular também foram realizados. Dos nosso resultados pudemos concluir que a melhor performance global foi observada com o análogos Ciclo(3-5) [Sar1, Asp3, Lys5]-AII (19), que sugere que a melhor combinação, par de resíduos formadores da ponte com Asp/Lys, ponte de lactama do tipo i(i+2), no centro da molécula e por inserção de resíduos, não por incorporação. Os análogos cíclicos, Ciclo(0-1a) [Glu0, endo-(Lys1a)]-AII (5) e Ciclo(0-1a) [Asp0, endo-(Orn1a)]-AII (6) também apresentaram bons resultados e que sugere que os pares de resíduos de aminoácidos Glu/Lys e Asp/Orn participantes da ponte de lactama do tipo i(i+2) foram os mais apropriados e que o tamanho do anel lactâmico de 15 ou 13 átomos também foi bem tolerado quando incorporados na porção N-terminal da molécula. Dos análogos lineares, o [Asp0, endo-(Lys1a)]-AII (3) foi o mais ativo, sugerindo que a incorporação dos resíduos de Asp/Lys na porção N-terminal foi bem aceita e reconhecida pelo receptor a AII. Não houve uma clara correlação com os resultados biológicos com os estudos conformacionais realizados por Dicroísmo Circular e por simulação de dinâmica molecular. Já que análogos com conformações similares ora apresentaram boas e ora péssimas atividades biológicas.
A angiotensina II (AII) é o principal hormônio ativo do sistema renina-angiotensina-aldosterona (SRAA). A molécula é um dos principais compostos com função vasoconstritora e que atuano estabelecimento da hipertensão. Na tentativa de desvendar a conformação bioativadeste peptídeo flexível e entender melhor os requisitos necessários para a sua atividade, sintetizamos e testamos uma nova série de análogos cíclicos da AII. Com esta serie pretendíamos estudar os efeitos de restrições conformacionais, via ponte de lactama, localizadas ao longo da cadeia peptídica nas atividades de vasoconstrição, ligação com o receptor celular e liberação de cálcio. Os peptídeos foram sintetizados pela metodologia da síntese de peptídeos em fase solida empregando-se a estratégia t-Boc. Após as sínteses, os compostos foram purificados por cromatografia liquida de alta eficiência e foram caracterizados por cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas. Estudos conformacionais por Dicroísmo Circular em meios contendo TFE e SDS e por simulação de dinâmica molecular também foram realizados. Dos nosso resultados pudemos concluir que a melhor performance global foi observada com o análogos Ciclo(3-5) [Sar1, Asp3, Lys5]-AII (19), que sugere que a melhor combinação, par de resíduos formadores da ponte com Asp/Lys, ponte de lactama do tipo i(i+2), no centro da molécula e por inserção de resíduos, não por incorporação. Os análogos cíclicos, Ciclo(0-1a) [Glu0, endo-(Lys1a)]-AII (5) e Ciclo(0-1a) [Asp0, endo-(Orn1a)]-AII (6) também apresentaram bons resultados e que sugere que os pares de resíduos de aminoácidos Glu/Lys e Asp/Orn participantes da ponte de lactama do tipo i(i+2) foram os mais apropriados e que o tamanho do anel lactâmico de 15 ou 13 átomos também foi bem tolerado quando incorporados na porção N-terminal da molécula. Dos análogos lineares, o [Asp0, endo-(Lys1a)]-AII (3) foi o mais ativo, sugerindo que a incorporação dos resíduos de Asp/Lys na porção N-terminal foi bem aceita e reconhecida pelo receptor a AII. Não houve uma clara correlação com os resultados biológicos com os estudos conformacionais realizados por Dicroísmo Circular e por simulação de dinâmica molecular. Já que análogos com conformações similares ora apresentaram boas e ora péssimas atividades biológicas.
Descrição
Citação
ALVES, Flavio Lopes. Relação estrutura-atividade de análogos cíclicos da angiotensina ii. 2014. 129 f. Tese (Doutorado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2014.