Investigação de novos corantes para cromovitrectomia: biocompatibilidade pré-clínica de trisodium, orangell e methyl violet

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Data
2013-10-30
Autores
Lima, Rodrigo Arantes de Souza [UNIFESP]
Orientadores
Farah, Ana Luisa Hofling de Lima Farah [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado profissional
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Resumo
Purpose: To investigate the retinal toxicity by Electroretinography (ERG) and fundoscopy after intravitreal injection of the biological stains in two concentrations: Trisodium (0.50 g/L and 1.00 g/L), Orangell (0.25 g/L and 1.00 g/L) and Methyl Violet(1.00 g/L and 0.50 g/L). Methods: Nineteen New-Zealand-Albinos rabbits were assigned in six groups (n = 3 in each group except for the group 5 n = 4). The animals in group 1 received Trisodium (8-Hydroxypyrene-1,3,6-Trisulfonic Acid Trisodium) in the dose of 0.50 g/L and group 2 received 1.00 g/L. Group 3 received Orangell in the dose of 0.25 g/L and group 4 received 1.00 g/L. Group 5 received Methyl Violet in the dose of 1.00 g/L and group 6 received 0.50 g/L. A volume of 0,1 mL of dye was injected in the right eyes, whereas the left eyes received the same volume of balanced salt solution (BSS) as control. ERG recordings were performed at baseline and seven days after intravitreal injection. Ephios handheld system (Ephiós AB, Rejmyre, Sweden), ERG-jet and skin electrodes were used. Scotopic and fotopic curves were measured. Amplitude of waves was obtained by transferred data to software Mjolner v1.3:0.5. The responses at one week after injection were compared with baseline levels. A decrease in the post-injection amplitude of more than 66% was considered remarkable. Results: At clinical examination by indirect ophthalmoscopy seven days after dye injection, all eyes were negative for cataract, hemorrhage, retinal detachment, and intraocular opacities. Amplitude analysis of minimal scotopic b-wave (ROD), maximum (MAX) scotopic a- and b-wave, photopic single flash cone b-wave (SFC) and photopic 30 Hz flicker b-wave (FLI) showed no significant reduction in either dye injected or control eyes. Descriptive comparison between dyes showed that main amplitude decreasing, occurred in the Methyl Violet groups (5 and 6) in both scotopic an photopic recordings. One rabbit in group 5 (Methyl Violet 1.00g/L) was found dead seven days after dye injection. No other adverse effects were observed in our study. Conclusions: Trisodium, Orangell and Methyl Violet can be applied in future studies in order to prove the capacity to stain preretinal membranes and vitreous without toxicity. The three dyes did not induce significant ERG amplitude reduction in this preliminary experimental research. Further histopathological analysis may corroborate ERG amplitude analysis. Trisodium, Orangell and Methyl Violet may be promising vital dyes for ocular surgery.
Objetivo: o objetivo desse estudo foi investigar, através de Eletrorretinografia (ERG), fundoscopia e microscopia óptica a toxicidade da retiniana de 3 corantes biológicos em duas concentrações: trisodium (0,50 g / L e 1,00 g / L), Orangell (0,25 g / L e 1,00 g / L) e Methyl violet (1,00 g / L e 0,50 g / L). Métodos: Dezenove coelhos albinos foram distribuídos em seis grupos (n = 3 em cada grupo, excepto para o grupo de 5 n = 4). Os animais do grupo 1 receberam trisodium, na dose de 0,50 g / L e do grupo 2 receberam 1,00 g / L. O grupo 3 recebeu Orangell na dose de 0,25 g / L e o grupo 4 recebeu 1,00 g / L. O Grupo 5 recebeu methyl violet na dose de 1,00 g / L e o grupo 6 recebeu 0,50 g / L. Um volume de 0,1 mL de corante foi injectada nos olhos direitos, enquanto que os olhos esquerdos receberam o mesmo volume de solução salina balanceada (BSS) como o controle. Eletrorretinograma foi realizado no início do estudo e sete dias após a injeção intravítrea. Sistema portátil de ERG Ephios (Ephiós AB, Rejmyre, Suécia), ERG-jet e eletrodos acoplados a pele dos animais foram utilizados para captação das ondas do ERG. Curvas escotópicas e Fotópicas foram medidas. A amplitude das ondas foi obtida pela transferência dos dados para o software Mjolner v1.3: 0,5. As respostas uma semana após a injeção intravítrea foram comparadas com os níveis prévios a injeção. A diminuição na amplitude pós-injeção de mais de 66% foi considerada significativa. Resultado: Ao exame oftalmológico por oftalmoscopia indireta sete dias após a injeção dos corantes, todos os olhos não apresentavam catarata, hemorragia, descolamento de retina ou opacidades intraocular. A Análise da amplitude da onda-b escotópica mínima (ROD), onda-a e onda-b escotópica máxima (MAX) scotopic a-e b-ondas, onda-b “single-flash cone” fotópica (SFC) e onda-b 30 Hz ‘flicker” fotópica (FLI) não mostraram nenhuma redução significativa em qualquer olho submetido a injeção de corante ou solução salina balanceada. A Comparação descritiva entre corantes mostrou que a principal diminuição de amplitude, ocorreu nos grupos que receberam Methyl violet (5 e 6), tanto em condições fotópicas quanto escotópicas. Um coelho no grupo 5 (Methyl violet 1,00 g / L) foi encontrado morto sete dias após a injecção do corante. Nenhum outro efeito adverso foi observado em nosso estudo. Conclusão: Trisodium, Orangell and Methyl Violet podem ser utilizados em estudos futuros de maneira a provar sua capacidade de corar membranas pré-retinianas e o vítreo sem toxicidade. Os três corantes não induziram redução significativa na amplitude do ERG neste estudo experimental preliminar, resultado corroborado pela análise histopatológica. Trisodium, Orangell e Methyl violet podem ser promissores corantes vitais para cirurgia ocular.
Descrição
Citação
LIMA, Rodrigo Arantes de Souza. Investigação de novos corantes para cromovitrectomia: biocompatibilidade pré-clínica de trisodium, orangell e methyl violet. 2013. 1 f. Dissertação (Mestrado Profissional) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2013.