Efeito do amblyomin-x na interface do sistema imune e hemostático durante a progressão do tumor renca (carcinoma renal murino): in vivo e in vitro

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Data
2016-11-30
Autores
Souza, Jean Gabriel de [UNIFESP]
Orientadores
Tavassi, Ana Marisa Chudzinski Tavassi [UNIFESP]
Tipo
Tese de doutorado
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Resumo
A Kunitz-type inhibitor domain-containing protein, isolated from the salivary glands of the Amblyomma cajennense tick, termed Amblyomin-X, which triggers apoptosis in murine renal adenocarcinoma cells (Renca) by inhibiting the proteasome and endoplasrnic reticulum stress. Herein, using in vitro assays and an orthotopic kidney tumors in BALB/c mice, we have demonstrated that Amblyomin-X was able to drastically reduce the incidence of lung metastases by inducing cell cycle arrest and apoptosis. ln addition, Amblyomin-X treatment was able to modulate cells-immune response and inflammatory cytokines. It increased and activated of TCD8+ and decreased immunosuppressor cells, such as MDSC's cells in tumor microenvironment and improves lFNy and TNFa., as well as decreased lL17 levels. ln the in vivo image analyses, we observed the co-localization of Amblyomin-X with Renca tumor mass for longer time compared to tumor free animal. ln NSG mice, Amblyomin- X have shown minor antitumor effect, which was recovered with" adoptive TCD8+ transfer. ln summary, Amblyomin-X has shown antitumor activity with high affinity for tumor cells and dependent on the recruitment of immunologic system to amplify its antitumor property, indicating a strong potential toward a safe anticancer drug. x
O Amblyomin-X é uma proteína que apresenta um domínio do tipo Kunitz, obtida na forma recombiante a partir da biblioteca de cDNA das glândulas salivares do carrapato Amblyomma cajennense. Esta proteína é capaz de induzir a morte por apoptose de células de adenocarcinoma renal murina (RENCA) via inibição do proteassoma e estresse do retículo. Usando ensaios in vitro e um modelo ortotópico de tumor renal desenvolvido em camundongos da linhagem BALB!c, nós demonstramos que o Amblyomin-X foi capaz de reduzir drasticamente a incidência de metástases pulmonares derivadas do tumor renal, pela indução da parada do ciclo celular e apoptose. Além disso, o tratamento com Amblyomin-X de reprogramar o perfil de células do sistema imunológico presentes no microambiente tumoral, bem como o perfil de citocinas inflamatórias circulantes. Estas alterações desencadearam o aumento da população e a ativação de linfócitos T CD8 e a redução de células imunossupressoras, como exemplo MDSC, e ao aumento de Interferon-Gama (IFNy) e TNF-alfa, bem como, a redução dos níveis de ILl7A circulante. Nas analises por imagens in vivo, foi observado a colocalização do Amblyomin-X com a massa de tumor renal, e se manteve no organismo do animal tumorado por mais tempo comparado com o animal saudável. No modelo ortotópico de tumor renal conduzido em camundongos severamente imunossuprimidos (linhagem NSG), o tratamento com Amblyomin-X teve seu efeito antitumoral reduzido, o qual foi reestabelecido após a transferência adotiva de Linfócitos TCD8 isolados do modelo em BALB/c e tratados com Amblyomin-X. O conjunto de dados tem indicado que o Amblyomin-X possui efeito antitumoral com alta afinidade pelas células tumorais e tem seu efeito antitumoral potencializado pelo recrutamento de células do sistema imunológico. Sugerindo um grande potencial para o desenvolvimento como um antitumoral seguro.
Descrição
Citação
SOUZA, Jean Gabriel de. Efeito do amblyomin-x na interface do sistema imune e hemostático durante a progressão do tumor renca (carcinoma renal murino): in vivo e in vitro. 2016. 90 f. Tese (Doutorado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.