Desenvolvimento de técnicas de diagnóstico molecular para detecção de grandes deleções e inserções na doença de pompe e identificação de elemento alu no genegaa
Data
2015-07-31
Autores
Faria, Douglas Oliveira Soares de 
Orientadores
Pesquero, Joao Bosco Pesquero
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Resumo
Pompe disease is an inborn error of metabolism of glycogen by autosomal recessive inheritance, characterized by lysosomal storage of glycogen consequent deficiency of the enzyme 4.1-acid alpha-glucosidase (GAA). This leads to cellular dysfunction or damage, particularly in heart muscle tissue, respiratory and skeletal systems. The clinical presentation of Pompe disease is highly variable, ranging from the most severe spectrum of disease, death occurs within the first year of life due to cardiorespiratory failure in 80% of babies. In patients with late onset Pompe disease, the skeletal muscle weakness and breathing is progressive and relentless, leading to wheelchair dependency and / or respirator and, ultimately, to death between early childhood and middle adulthood. Mutations in the GAA vary widely, including missense, nonsense, gross and small insertions and deletions, and frame-shift mutations. The technique of quantification of exons (TQE) is an alternative to determine and confirm the diagnosis of Pompe disease. This technique is going to be used to determine the dosage of related DNA sequences (or number of copies) in a complex sample of DNA, mainly gross deletions and insertions in the gene. This study aims at the development and standardization of these technique dosages of exons of the GAA gene. The result of this project will be of great importance making pompe.
Doença de Pompe é um erro inato de metabolismo do glicogênio de herança autossômica recessiva, caracterizado pelo depósito lisossomal de glicogênio consequente à deficiência da enzima 1-4 alfa-glicosidase-ácida (GAA). Isto leva a disfunções ou danos celulares, particularmente nos tecidos musculares cardíaco, respiratório e esquelético. A apresentação clínica da doença de Pompe é altamente variável; na faixa mais grave do espectro da doença, a morte ocorre dentro do primeiro ano de vida devido à insuficiência cardiorespiratória em 80% dos bebês. Nos pacientes com início tardio, a fraqueza muscular esquelética e respiratória é progressiva e implacável, levando a dependência de cadeiras de rodas e/ou respirador e, em última instância, à morte entre o início da infância e o meio da vida adulta. Fechar o diagnóstico na doença de Ponpe e complexo e demorado, depende da soma da habilidade clínica com diagnóstico genético e molecular precisos. Podem existir muitos resultados "falsos negativos" obtidos no sequenciamento de DNA tradicional, devido ao fato do gene alvo a ser é grande estar sujeito a grandes inserções ou grandes deleções, que não são detectadas no sequenciamento tradicional. E o desenvolvimento e padronização de técnicas com capacidade de detecção diferenciada como as técnicas TQF (Técnica de Quantificação de Fragmentos), MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) e PCR de Longo Alcance para o gene da GAA, podem representar grandes avanços para a Doença de Pompe bem como melhora na qualidade de vida dos pacientes, uma vez que por se tartar de uma doença progressiva; a rapidez em fechar o diagnostic é fundamental para o inicio precoce do tratamento específico.
Doença de Pompe é um erro inato de metabolismo do glicogênio de herança autossômica recessiva, caracterizado pelo depósito lisossomal de glicogênio consequente à deficiência da enzima 1-4 alfa-glicosidase-ácida (GAA). Isto leva a disfunções ou danos celulares, particularmente nos tecidos musculares cardíaco, respiratório e esquelético. A apresentação clínica da doença de Pompe é altamente variável; na faixa mais grave do espectro da doença, a morte ocorre dentro do primeiro ano de vida devido à insuficiência cardiorespiratória em 80% dos bebês. Nos pacientes com início tardio, a fraqueza muscular esquelética e respiratória é progressiva e implacável, levando a dependência de cadeiras de rodas e/ou respirador e, em última instância, à morte entre o início da infância e o meio da vida adulta. Fechar o diagnóstico na doença de Ponpe e complexo e demorado, depende da soma da habilidade clínica com diagnóstico genético e molecular precisos. Podem existir muitos resultados "falsos negativos" obtidos no sequenciamento de DNA tradicional, devido ao fato do gene alvo a ser é grande estar sujeito a grandes inserções ou grandes deleções, que não são detectadas no sequenciamento tradicional. E o desenvolvimento e padronização de técnicas com capacidade de detecção diferenciada como as técnicas TQF (Técnica de Quantificação de Fragmentos), MLPA (Multiplex Ligation Probe Amplification) e PCR de Longo Alcance para o gene da GAA, podem representar grandes avanços para a Doença de Pompe bem como melhora na qualidade de vida dos pacientes, uma vez que por se tartar de uma doença progressiva; a rapidez em fechar o diagnostic é fundamental para o inicio precoce do tratamento específico.
Descrição
Citação
FARIA, Douglas Oliveira Soares de. Desenvolvimento de técnicas de diagnóstico molecular para detecção de grandes deleções e inserções na doença de pompe e identificação de elemento alu no genegaa. 2015. 73 f. Dissertação (Mestrado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2015.