Processamento da metacaspase-2 (tbmca2) de trypanossoma brucei

Abstract

Metacaspases are peptidase similar lower eukaryotes caspases, which are enzymes participating in cell death system in mammals. Were found metacaspases in many types of plants, fungi and protozoa, and experiments Cell viability showed that they, as Caspases in mammals are closely correlated with cell death in these organisms. The analysis of the primary structures suggest that metacaspases have their similar tertiary structure caspases. The metacaspases as caspases are expressed in the form of inactive zymogen. The specific point of view by substrate caspases They have affinity for aspartic acid residue in the PI position and important interactions with residues at positions P2, P3 and P4, so that there substrates available able to differentiate the different caspases. However, they have metacaspases specificity arginine residues at positions PI, P2 and P3. The aim was to combine the knowledge studies "previous specificity, with the crystallographic structure of TbMCA2, therefore, produce enzymes containing point mutations to make new kinetic studies of specificity and the importance of calcium for the structure and specificity of TbMCA2 these experiments They were targeted and based on the available three-dimensional structures. 8

Metacaspases são peptidases de eucariotos inferiores similares as caspases, que são enzimas que participam do sistema de morte celular em mamíferos. Foram encontrados diversos tipos de metacaspases em plantas, fungos e protozoários, e experimentos de viabilidade celular demonstraram que elas, assim como as caspases em mamíferos, estão intimamente correlacionadas com a morte celular nestes organismos. As análises das estruturas primárias sugerem que as metacaspases possuem sua estrutura terciária similar as caspases. As metacaspases assim como as caspases são expressas na forma de zimogênio inativo. Do ponto de vista da especificidade por substrato as caspases possuem afinidade por resíduos de ácido aspártico na posição PI, além de importantes interações com os resíduos nas posições P2, P3 e P4, de maneira que existem substratos disponíveis capazes de diferenciar as diferentes caspases. Porém, as metacaspases possuem uma especificidade por resíduos de arginina nas posições PI, P2 e P3. O objetivo deste trabalho foi aliar os conhecimentos de estudos" anteriores de especificidade, com a estrutura cristalográfica da TbMCA2, para tanto, produzimos enzimas contendo mutações pontuais para realização de novos estudos cinéticos de especificidade e da importância do cálcio para a estrutura e especificidade da TbMCA2, estes experimentos foram direcionados e fundamentados nas estruturas tridimensionais disponíveis. 8