Expressão do gene hsp90b1 na embriogênese ocular em modelo experimental (gallus domesticus) sob efeitos da toxoplasmose
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Data
2016-02-26
Autores
Nasare, Alex Martins [UNIFESP]
Orientadores
Alonso, Luis Garcia Alonso [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Evaluate possible morphological alterations in the ocular bulb and in the expression of total RNA, responsible for the regulation of HSP108, in experimental model using Gallus domesticus, while under infection by Toxoplasma gondii. Methods: Samples were obtained from embryonated eggs in 7th embryonic day (E7) and E20 and divided into three groups: control, PBS and experimental, which left eyes were used for histological studies using historresin method, right eyes had total RNA extracted using Trizol? method, cDNA were synthetized and had the HSP90B1 gene expression quantified and compared to housekeeping gene ?-actin using Polymerase chain reaction real-time (qPCR); parasites were identified using conventional PCR using SAG1 primer. Results: Histological studies showed that samples from experimental group had retinoic alterations as chorio-retinitis, inflammatory infiltrate and deformity in retinal pigment epithelium (RPE) in the presence of T. gondii, compared to control and PBS group; HSP90B1 gene expression was inhibited in experimental group, compared to control and PBS group, and samples from experimental group had parasite identified. Conclusions: Infection by T. gondii is able to cause morphological alterations in the ocular bulb, and the infection can inhibits HSP90B1 gene expression.
Analisar possíveis alterações morfológicas do bulbo do olho e na expressão do RNA total responsável pela síntese de HSP108, em modelo embrionário experimental de Gallus domesticus, quando infectado por Toxoplasma gondii. Métodos: As amostras foram obtidas de 18 ovos embrionados no 7º dia embrionário (E7) e no 20º dia embrionário (E20) e divididas em três grupos: controle, PBS (solução fosfato tamponada) e experimental, nas quais o olho esquerdo foi utilizado para histologia, pela técnica em historresina, e o olho direito para a extração do RNA total, pela técnica de Trizol®, seguida da síntese de cDNA e por fim, quantificada a expressão do gene HSP90B1, comparada ao marcador endógeno ?-actina pela reação em cadeira da polimerase (PCR) em tempo real (qPCR). Os parasitos foram identificados por PCR convencional pelo marcador SAG1. Resultados: Em estudos histológicos, os animais do grupo experimental apresentaram alterações na estrutura retiniana, como coriorretinite, infiltrado inflamatório e alterações no epitélio pigmentado da retina (EPR) além da presença do parasito, quando comparados aos grupos controle e PBS. A expressão do gene HSP90B1 foi inibida no grupo experimental em comparação aos grupos controle e PBS e, nas amostras do grupo experimental foram identificados parasitos pela PCR convencional. Conclusões: A infecção pelo T. gondii é capaz de desencadear alterações morfológicas no bulbo do olho, ao longo do processo biológico do desenvolvimento, e a infecção pelo parasito pode levar a alterações na expressão do gene HSP90B1.
Analisar possíveis alterações morfológicas do bulbo do olho e na expressão do RNA total responsável pela síntese de HSP108, em modelo embrionário experimental de Gallus domesticus, quando infectado por Toxoplasma gondii. Métodos: As amostras foram obtidas de 18 ovos embrionados no 7º dia embrionário (E7) e no 20º dia embrionário (E20) e divididas em três grupos: controle, PBS (solução fosfato tamponada) e experimental, nas quais o olho esquerdo foi utilizado para histologia, pela técnica em historresina, e o olho direito para a extração do RNA total, pela técnica de Trizol®, seguida da síntese de cDNA e por fim, quantificada a expressão do gene HSP90B1, comparada ao marcador endógeno ?-actina pela reação em cadeira da polimerase (PCR) em tempo real (qPCR). Os parasitos foram identificados por PCR convencional pelo marcador SAG1. Resultados: Em estudos histológicos, os animais do grupo experimental apresentaram alterações na estrutura retiniana, como coriorretinite, infiltrado inflamatório e alterações no epitélio pigmentado da retina (EPR) além da presença do parasito, quando comparados aos grupos controle e PBS. A expressão do gene HSP90B1 foi inibida no grupo experimental em comparação aos grupos controle e PBS e, nas amostras do grupo experimental foram identificados parasitos pela PCR convencional. Conclusões: A infecção pelo T. gondii é capaz de desencadear alterações morfológicas no bulbo do olho, ao longo do processo biológico do desenvolvimento, e a infecção pelo parasito pode levar a alterações na expressão do gene HSP90B1.
Descrição
Citação
NASARE, Alex Martins. Expressão do gene hsp90b1 na embriogênese ocular em modelo experimental (gallus domesticus) sob efeitos da toxoplasmose. 2016. 104 f. Dissertação (Mestrado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.