Sistema RANK/RANKL e OPG em cultura de fibroblastos adultos do ligamento periodontal humano sob pressão contínua
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Data
2016-05-20
Autores
Pereira, Mateus de Abreu [UNIFESP]
Orientadores
Ferreira, Lydia Masako [UNIFESP]
Tipo
Dissertação de mestrado
Título da Revista
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Título de Volume
Resumo
Introduction: The cultive of periodontal ligament fibroblasts associated with simulation of pressure or tension on the cell allows analysis in its morphology and form, identify proteins and molecules involved in this process. The system formed by the protein Nuclear Factor Activator Receptor ?B (RANK) \ Nuclear factor Activator Receptor ?B Ligand (RANKL) and osteoprotegerin (OPG) are directly linked to the regulation of osteoclast and osteoclastogenesis, formation and / or bone resorption. Objective: Evaluate the fibroblasts of RANK \ RANKL and OPG in adult fibroblasts of human periodontal ligament under continuous pressure. Methods: The tissue was collected from periodontal ligament of 40 third molars of adult patients who were grown in culture flasks until the sixth passage. The cells were placed on plates with 6 wells with a 3 mm diameter which were subjected to the continuous pressure (3 to 4 g / mm2) for 6 hours in monolayers. From the samples, the mRNA was extracted and evaluated by method Polymerase Chain Reaction Real-Time (qPCR).Results: In the continuous pressure model by using the fibroblasts of the periodontal ligament, in all the groups there was no expression of RANK \ RANKL, and all groups expressed OPG, and was significantly higher in the experimental group 2 (EG2) compared to control (CG) and experimental group 1 (EG1) (P = 0.005). Conclusion: The adult fibroblast from human periodontal ligament when under continuous pressure not expressed mRNA RANK \ RANKL and osteoprotegerin mRNA was expressed.
Introdução: O cultivo de fibroblastos do ligamento periodontal, associada a simulação de cargas de pressão ou tensão sobre a célula, permite analisar as modificações da sua morfologia e identificar proteínas e moléculas formadas e envolvidas neste processo. O sistema formado pelas proteínas receptor ativador de fator nuclear ?B (RANK), receptor ativador de fator nuclear ?B Ligante (RANKL) e a osteoprotegerina (OPG) está diretamente ligado a regulação de osteoclastos e a osteoclastogênese, na formação e reabsorção do tecido ósseo. Objetivo: Avaliar a expressão do RNAm das proteínas RANK\RANKL e OPG em fibroblastos adultos do ligamento periodontal humano sob pressão contínua. Métodos: Os fibroblastos foram coletados do ligamento periodontal de 40 terceiros molares inclusos de pacientes adultos e foram cultivados em frascos de culturas até a sexta passagem. As células foram alojadas em placas com 6 poços com 3 mm de diâmetro onde foram submetidos a pressão contínua (3 e 4 g/cm2 ) durante 6 horas em monocamadas. Das amostras, o RNAm foi extraído e avaliado pelo método de Reação em Cadeia de Polimerase em Tempo Real qPCR Resultados: No modelo de pressão contínua utilizando fibroblastos do ligamento periodontal, nos grupos avaliados, não houve a expressão de RANK\RANKL, mas expressaram OPG, tendo sido significativamente maior no grupo experimental 2 (GE2) em comparação com os grupos controle (GC) e experimental 1 (GE1). Conclusão: Os fibroblastos adultos de ligamento periodontal humano quando sob pressão contínua não expressaram o RNAm de RANK\RANKL e expressaram o RNAm da Osteoprotegerina.
Introdução: O cultivo de fibroblastos do ligamento periodontal, associada a simulação de cargas de pressão ou tensão sobre a célula, permite analisar as modificações da sua morfologia e identificar proteínas e moléculas formadas e envolvidas neste processo. O sistema formado pelas proteínas receptor ativador de fator nuclear ?B (RANK), receptor ativador de fator nuclear ?B Ligante (RANKL) e a osteoprotegerina (OPG) está diretamente ligado a regulação de osteoclastos e a osteoclastogênese, na formação e reabsorção do tecido ósseo. Objetivo: Avaliar a expressão do RNAm das proteínas RANK\RANKL e OPG em fibroblastos adultos do ligamento periodontal humano sob pressão contínua. Métodos: Os fibroblastos foram coletados do ligamento periodontal de 40 terceiros molares inclusos de pacientes adultos e foram cultivados em frascos de culturas até a sexta passagem. As células foram alojadas em placas com 6 poços com 3 mm de diâmetro onde foram submetidos a pressão contínua (3 e 4 g/cm2 ) durante 6 horas em monocamadas. Das amostras, o RNAm foi extraído e avaliado pelo método de Reação em Cadeia de Polimerase em Tempo Real qPCR Resultados: No modelo de pressão contínua utilizando fibroblastos do ligamento periodontal, nos grupos avaliados, não houve a expressão de RANK\RANKL, mas expressaram OPG, tendo sido significativamente maior no grupo experimental 2 (GE2) em comparação com os grupos controle (GC) e experimental 1 (GE1). Conclusão: Os fibroblastos adultos de ligamento periodontal humano quando sob pressão contínua não expressaram o RNAm de RANK\RANKL e expressaram o RNAm da Osteoprotegerina.
Descrição
Citação
PEREIRA, Mateus de Abreu. Sistema RANK/RANKL e OPG em cultura de fibroblastos adultos do ligamento periodontal humano sob pressão contínua. 2016. 77 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia Translacional) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2016.